临床PCR实验室基本设置要求 张琼

1、临床PCR实验室基本设置要求,张 琼 2017年PCR上岗证,.,内 容,一.设置依据,二.PCR实验室设计,三.PCR实验室配置,.,设 置 “设”设计：布局、暖通设计 “置”配置：水电、设备装备,一.设置依据,.,国家关于PCR实验室建设及管理的现行技术规范和标准 *医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法卫办医政发 2010 194号 *临床实验室设计总则 GBT-20469-2006 *临床基因扩增检验实验室基本设置标准 *临床基因扩增检验实验室工作规范 *医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则 *生物安全实验室建筑技术规范 GB50346-2011 *实验室生物安全通用要求GB1948

2、9-2008 *洁净厂房设计规范GB50073-2013 *微生物和生物医学实验室生物安全通用准则WS233-2002 *实验室生物安全手册 世界卫生组织 *实验室生物安全认可准则CNAS-CL05,.,生物安全实验室建筑技术规范 GB/T 50346-2004 洁净室施工及验收规范 JGJ 71-1990 民用建筑电气设计规范 JGJ 16-2008 建筑电气工程施工质量验收规范 GB 50303-2002 建筑给水排水设计规范 GB 50015-2003 建筑给水排水及采暖工程施工质量验收规范 GB 50242-2002 采暖通风与空气调节设计规范 GB 50019-2003 通风与空调工

3、程施工质量验收规范 GB 50243-2002 建筑装饰装修工程质量验收规范 GB50210-2001,其他依据,.,“对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。”,BSL-2,首先PCR实验室要符合 生物安全二级要求！,.,1.临床实验室设计总则 GB/T 20469-2006,.,2.生物安全实验室建筑技术规范 GB 50346-2011,.,2.生物安全实验室建筑技术规范 GB 50346-2011,.,3.实验室 生物安全通用要求GB 19489-2008,.,.,4.微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 WS 233-2002,.,5.实验

4、室生物安全认可准则 CNAS CL02,.,6.实验室生物安全手册 世界卫生组织2004,.,这么多标准，参照哪个？,*临床实验室设计总则 GB/T 20469-2006 *生物安全实验室建筑技术规范 GB 50346-2011 *实验室生物安全通用要求GB 19489-2008 *微生物和生物医学实验室生物安全通用准则WS 233-2002 *实验室生物安全手册 世界卫生组织 2004 *实验室生物安全认可准则CNAS-CL05 2015,.,7.医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则,内容节选： 一.临床基因扩增检验实验室的设计 （一）临床基因扩增检验实验室区域设计规划。原则上临床基因扩增

5、实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区，标本制备区，扩增区，扩增产物分析区。这四个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分割状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。如使用实时荧光PCR仪，扩增区，扩增产物分析区可合并；采用标本处理，核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区，扩增区，扩增产物分析区可合并。,.,布局、暖通设计,二.PCR实验室设计,.,1.布局 标准四个分区,.,.,.,使用实时荧光PCR仪，扩增区、产物分析区可合并,.,.,2.临床PCR实验室的工作流程,试剂准备区,标本制备区,扩增区,产

6、物分析区,.,3.通风,理想的PCR实验室通风模式A,.,理想的PCR实验室通风模式B,.,通风方式,.,临床实验室设计总则 GB/T 20469-2006,.,生物安全实验室建筑技术规范 GB 50346-2011,.,微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 WS 233-2002,？,.,什么是上送下排？,排风口要求？,地面,吊顶,.,排风口要求？,.,微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 WS 233-2002,.,如何控制送排风系统？,.,实验室气密性如何检测评价？,临床实验室设计总则 GB/T 20469-2006,.,实验室 生物安全通用要求GB 19489-2008,.,水电、

7、设备装备,三.PCR实验室配置,.,1.PCR实验室配置依据,依据医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则,.,试剂储存和准备区,主要功能 试剂的制备和贮存 试剂的分装 主反应混合液的制备 设备配置 2-8和-15冰箱 混匀器 微量加样器（覆盖1-1000ul） 移动紫外灯（近工作台面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、 耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品,2.工作区域仪器设备配置标准,.,标本制备区,主要功能 核酸(RNA、DNA)提取、贮存 扩增反应管的制作 设备配置 2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 高速台式冷冻离心机 混匀器 水浴箱或加热模块

8、 微量加样器（覆盖1-1000ul） 可移动紫外灯（近工作台面） 生物安全柜 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理 的离心管和加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品 如需处理大分子DNA，应具有超声波水浴仪,.,扩增反应混合物配置和扩增区,主要功能 DNA或cDNA扩增 设备配置 核酸扩增仪 微量加样器（覆盖1-1000ul） 可移动紫外灯（近工作台面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理 的离心管和加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品,.,扩增产物分析区,主要功能 扩增片段的测定 设备配置 视检验方法不同而定。基本仪器设备如下： 微量加样器（覆盖1-1000ul） 可移动紫外灯（近工作台面）