高中生物基因工程的基本操作程序试题

1、会话跟踪检测(b)基因工程的基本操作程序满分：50分钟：25分钟)一、选择题(每个问题2分，共20分)以下有关基因工程的说明是正确的()A.目的基因和受体细胞都可以来自自动、植物或微生物B.限制性内切酶和DNA连接酶都可以识别特定的碱基序列，这是两种常用的工具酶C.在大肠杆菌中表达人类胰岛素基因的胰岛素具有生物活性D.载体的抵抗基因有利于筛选含有重组DNA的细胞，促进目的基因的表达2.外源基因在受体细胞中表达，可以产生人类需要的产品。以下项目表明，目标基因在受体细胞中表达()A.棉花二倍体细胞中检测出细菌的抗虫基因B.人胰岛素基因和mRNA在大肠杆菌中检测C.山羊乳腺细胞中检测出人生长激素DN

2、A序列D.从酵母细胞中提取人干扰素蛋白PCR技术的以下说明是正确的()A.PCR技术是扩增目的基因序列的充分已知基础B.这项技术需要降解酶和热稳定性DNA聚合酶C.此技术需要一对特定的底漆，一对底漆必须是互补的D.这项技术适用于身体的DNA双链复制原理，还需要模板、原料、能量、酶等条件以下对基因表达载体的叙述不准确()A.基因表达载体的构建是基因工程的核心B.上面的启动子和终结器是具有特殊结构的DNA片段C.一般使用抗生素耐药基因作为标记基因D.基因工程中的受体细胞不同，但生成的基因表达载体都是相同的5.右图是基因工程中基因表达载体的模式，如果结构x需要表达载体，则x最有可能()A.荧光蛋白基

3、因B.启动子C.限制性内切酶D.DNA连接酶6.在以下叙述中，基因表达载体被引入微生物细胞，但不准确。()A.一般来说，使用原核生物作为受体细胞是因为原核生物迅速繁殖，多单细胞的遗传物质比较少B.在受体细胞所在的周围环境中能吸收DNA分子的生理状态称为易感状态C.受体细胞需要适当的温度和ph才能吸收DNA分子D.受体细胞如果将吸收重组表达载体DNA分子的液体调节到适当的pH值，就不需要使用缓冲液7.(广东高考)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的过程如下图所示。以下叙述正确(双重选择) ()A.过程需要逆转录酶B.工艺为了获得目标基因，需要分解酶和PCRC.过程 NaCl溶液制备的受

4、体细胞D.过程利用DNA分子杂交，可以确认目标基因是否被引入受体细胞8.以下甲、乙两图显示了从细菌细胞获得目的基因的两种方法，以下表达中错误的是()A.a方法可以建立细菌的基因组文库。B.b方法可以建立细菌的cDNA文库。C.a方法以脱氧核苷酸为原料D.b方法需要反转录酶参与9.右图表示细胞膜上乙酰胆碱(神经递质)受体基因克隆技术的操作，在以下相关分析中是正确的()A.获得mRNA的最佳材料是受精卵B.最常用于制作基因表达载体的载体是大肠杆菌C.完成过程必需酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶D.探针筛选的目的是去除感染的细菌，获得未感染的细菌10.蓝藻拟核DNA具有控制叶绿素合成的ch1L基因。一

5、位科学家在这种生物中制造了缺少ch1L基因的变种细胞，研究ch1L基因对叶绿素合成的控制，技术途径如下图所示()A.过程要使用不同的限制性内切酶B.过程使用DNA连接酶。密码子终止是基因表达载体的重要组成部分。D.如果操作成功，可以使用包含红霉素的培养基筛选突变二、选择题(共30分)11.(10分钟) (江苏省高考)图1表示包含目标基因d的DNA片段的长度(BP，即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp、BamH、Mbo、SMA 碱基序列和酶切部位分别识别cCGG、g、GATC、CCCGGG的四种限制性核酸内切酶。请回答以下问题：(1)图1中的一个脱氧核苷酸链

6、中的两个相邻碱基依次为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(2)使用限制性内切酶SmaI完全切除了图1中的DNA片段，结果端为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)图1虚线框内的碱基对替换成t-a碱基对后，基因d就会突变成基因d。1和相应的DNA片段从合子中分离出来，限制性酶Sma完全切除的产物中有总_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _物种长度不同的DNA片段。(4)如果将图2中的质

7、粒和目的基因d进行同种限制酶处理后结合，形成重组质粒，则可选择的限制酶为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。导入重组质粒后，要筛选包含重组质粒的大肠杆菌，通常需要使用添加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _的培养基进行培养。在某些包含重组质粒的大肠杆菌菌株中，检测出目的基因d未正确表达的最可能原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

8、 _。12.(10分钟)以下是口蹄疫疫苗生产过程的示意图，根据图回答以下问题。(1)口蹄疫病毒的全部RNA，而不是口蹄疫病毒的全部RNA，首先由口蹄疫病毒合成的病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _合成病毒蛋白的RNA，产生病毒蛋白DNA所需的工具酶是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)制造基因表达载体所需的同工酶_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

9、 _ _ _。除了目标基因外，基因表达矢量还必须包含_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)在导入Escherichia coli之前，必须先将Escherichia coli视为_ _ _ _ _ _ _ _ _细胞。(4)为了检测目标基因是否被引入受体细胞，更精确的方法是利用矢量中的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _最后，用于检测目标基因是否翻译成病毒蛋白的技术是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _13.

10、(10分钟)菊花是菊花的主要害虫之一。研究人员将抗虫基因转移到菊花中，培育了抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。根据图片，请按以下方式回答。注：卡那霉素耐药基因(KanR)是标记基因，菊花的叶子对卡那霉素很敏感。(1)为了促进重组质粒对土壤亚基帕的吸收，(_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _)可以处理土壤亚基帕，使其处于易感状态。(2)将重组质粒引入土壤农杆菌的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)将愈伤组织转移到特定浓度的植物激素和添加_ _ _ _

11、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的培养基上，在适当条件下筛选转基因菊花(PCR方法检测转基因菊花是否有目标基因时，根据_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的核苷酸序列设计特定引物(5)转基因菊花的软茎、叶和人工饲料以适当比例混合后饲喂天牛二代幼虫的实验结果见下表。组死亡率(%)实验组转基因植物160.00转基因植物253.33对照组13.33对照组是等量的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _根据表格分析，_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

12、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _回答案件1.目标基因和受体细胞都可以来自自动，植物或微生物。基因工程中常用的工具酶有识别特定碱基序列的限制性酶和DNA连接酶；大肠杆菌是原核生物，不含内质网和高尔基等小器官，不能加工蛋白质，其合成胰岛素原生没有生物活性。载体上的抵抗基因是标记基因，有利于筛选包含重组DNA的细胞，不促进目的基因的表达。2.只有控制d基因表达选择，即蛋白质的合成，合成相应的蛋白质，才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达。3.用D PCR技术扩增的目的基因序列不一定是已知的。a错误；PCR技术是通过高温破译DNA，不需要降解酶，b错误。这项技术所

13、需的一对引物与模板DNA双链末端的碱基配对，顺序不是互补的，c是错误的。4.选择d受体细胞有植物、动物、微生物的区分，目的基因导入受体细胞的方法不同，因此表达载体的构建也有差异。5.b完整的基因表达载体选择应包括启动子、终止者、目的基因和标记基因。6.选择d将基因表达载体引入微生物细胞时，在特定条件下(如适当的温度、pH等)，混合培养基因表达载体和易感微生物细胞。在培养过程中会影响pH的变化，因此添加缓冲液以保持适当的pH。7.广告选择过程是反转录过程，需要反转录酶催化。从CDNA中获得必要的目的基因是基于基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置或基因翻译产物蛋白等特性的，如解毒酶或

14、PCR不需要这个；大肠杆菌可以用CaCl2溶液处理，制成感觉细胞。确认是否将目标基因导入受体细胞可以使用DNA分子杂交技术。8.选择c a的方法可以直接从细菌的DNA中提取，并建立该细菌的基因组库；该细菌的cDNA库可以由信使RNA逆转的目标基因建立。b方法需要逆转录酶和脱氧核苷酸作为原料。9.这个受体基因在神经细胞中表达，获得这个mRNA的最好物质是神经细胞。在基因表达载体的构建中，最可能的载体是质粒。探针筛选的目的是检测是否存在cDNA。10.c选择限制性内切酶具有特异性。过程DNA序列不同，应使用不同的限制性内切酶。DNA连接酶连接切断的磷酸二酯连接，起到ch1L基因、红霉素耐药基因及质

15、粒结合的作用；基因表达载体由目标基因、启动子、终止者、标记基因组成，终止密码子是mRNA中密码子的一种，表示一种翻译的结束。在这个变种中，ch1L基因被重组基因取代，重组基因有红霉素耐药基因，所以这个变种可以从包含红霉素的培养基中筛选出来。11.分析：(1)在一条脱氧核苷酸链中，两个相邻的碱基以“-脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖-”连接在一起。(2)从SMA 识别序列和酶切部位可以看出，切割后产生的是平端，图1的DNA片段具有两个SMA 识别序列，因此切割后产生的产物长度为534 3=537 (BP)，796-3-3=790 (BP)(3)在图形体内发生碱基对替代而形成的d基因失去了1个SMA 识别

16、序列，因此将d基因、d基因完全切割到SMA 的结果，不仅是产物中原始d基因切割后出现的3个DNA片段，而且切割d基因后出现的长度537 790=1 327 (BP)的DNA片段也增加了。(4)目的基因两端有BamH识别序列，质粒启动子后抗生素a耐药基因也有BamH识别序列，因此可选择的限制性酶为BamH。此时，因为使用抗生素b抵抗基因作为标记基因，所以筛选时在培养基中添加抗生素b。切割同种限制酶产生相同的端，部分目的基因和质粒相反连接，基因不能正常表达。答案：(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平版537 BP、790 BP、661 BP (3)4(4) bamh 类抗生素b同种限制酶切割形成

17、端相同，部分目的基因d与质粒反向连接12.分析：(1)病毒由核酸和蛋白质组成，蛋白质盒具有免疫特性，因此在口蹄疫疫苗生产过程中，口蹄疫病毒只提取控制合成病毒蛋白质的RNA部分。以RNA为模板合成DNA的过程属于逆转录，需要逆转录酶。(2)基因表达载体的构成：目的基因、启动子、终止者、标记基因。基因表达载体构建用一定的限制酶切割质粒，使其具有粘性末端的切口，然后用同种限制酶切割目标基因，产生相同的粘性末端。将切割的目标基因片段插入质粒的切口，在DNA连接酶的作用下，质粒与目标基因结合，形成重组质粒。(3)在将目标基因注入微生物细胞之前，经常使Ca2+处理成为易感细胞。(4)标记基因的表达可以检测目标基因是否被引入受体细胞，此外，还可以用DNA杂交法和抗原抗体杂交技术进行检测。答案：(1)抗原逆转录酶(2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶启动子、终止符、标记基因(3)受体(4)标记基因病毒蛋白基因(目的基因)抗原抗体杂交技术13.分析：(1)通常用Ca2+处理细菌，使其进入感官状态。(。(2)农杆菌的蒂质粒TDNA可以整合到受体细胞的染色体DNA中，根据这些特征，通常利用亚基帕修饰法将目标基因注入受体细胞。(。(3)在基因表达载体的构建过程中，基因需要标签。标题表明，该基因是卡那霉素耐药基因，因此要从卡那霉素添加的培养基中