胚胎工程常用技术

1、.体外受精，胚胎移植，胚胎分割，胚胎冷冻保存性别控制胚胎干细胞，胚胎工程：研究的重要内容： (技术手段)，研究对象：生殖细胞，受精卵和早期胚胎，理论基础：胚胎发育学：体外受精，1，概念：哺乳动物精子和卵子在体外人工控制环境中完成受精过程的技术。 2、过程： (1)提取精子；(2)提取卵母细胞；(3)提取受精；(1)提取精子；1 )提取方法：2):(牛、羊)一定浓度的肝素、A23187溶液(钙离子载体)溶液猪等一般用吸引法)小型动物： (小鼠、兔子等一般用机械破碎法)阅读教科书P82，采集不同动物、卵母细胞的方法各有什么，采集的方法：吸引法，机械破碎法，(三)用受精、收获能溶液或专用受精溶液完成

2、受精过程。胚胎体外培养、概念：在人工环境下将受精卵培养成早期胚胎。 培养液：(根据时期成分不同)水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、动物血清等。 胚胎培养比组织和细胞培养难。 目前只能对少数动物进行不同阶段的胚胎培养，还没有接受新生儿的整体外培养技术。胚胎移植，1 .概念：也称为“腹怀胎”，是将优良品种的雌畜类杂交后，从其生殖器中取出受精卵和早期胚胎，移植到生理状态相同的同种雌畜类，使其成长为新的个体的技术。 捐赠者：提供胚胎的个体。 受体：接收胚胎的个体。 优质雌性动物。 是一般种类的雌性动物。选择、供体母牛、受体母牛、同期发情处理、超数排卵、供体公牛、交配、早期胚胎的取出、品

3、质检查、培养、胚胎移植、妊娠检查、分娩(胚胎移植的小牛)、2、胚胎移植的过程：未交配、同期发情技术：主要是外来激素引起的卵巢刺激，应预定的要求为什么胚胎移植会成功？ 移动到哪个动物的子宫内都能发育吗？ 同种动物发情排卵后，在一段时间内施主受体具有相同的生理环境。 为什么我们能收集胚胎呢？ 早期胚胎在一定时间内处于游离状态。 捐赠者和受体不会被拒绝吗？ 同种动物之间几乎不拒绝。 移植的胚胎能保持捐赠者父母的特性吗？ 遗传特性不受受体的影响。 胚胎与受体有生理组织关系，与受体的遗传物质无关，3 .胚胎移植能否成功有两个条件。 (1)胚胎移植通常在同种手术刀供体和受体之间进行。 (2)进行胚胎移植的

4、供体和受体的生理状态相同。胚胎移植优势：充分发挥雌性个体的繁殖潜力，缩短供体自身的繁殖周期，维持供体的优异特性，维持大规模繁殖节约成本，费用可用于保护稀少动物、胚胎分割、1 .概念：2 .优势：用显微手术的方法将一个胚胎分为两个通过在体内或体外培养后移植受体，获得了一卵双胞胎或一卵多生后代的技术。 子孙有同样的遗传物质。 可以增加数倍的胚数，可以迅速繁殖优良品种的家畜。 3 .特征：1，分割哪个时期的胚胎？ 发育良好，形态正常的32细胞期或胚. 2，用哪种机器分割？显微镜和显微镜切针、讨论、时期、4，胚胎分割被植入培养液的胚胎(机械法、酶处理)。胚胎穿上移植到受体的床生孩子。胚胎干细胞，1 .

5、概念： (ES细胞)是从早期胚胎(胚)的内细胞块中分离出来的一种细胞。2 .特征： 1 )形态：体积小，核大，核清晰。 2 )功能：具有发育的全能性，能分化成成年动物体内的任何组织细胞。 3 )体外培养ES细胞不分化就能增殖。 可以冷冻保存它，也可以进行遗传改造。加图、总结.特征、胚胎干细胞：内细胞团细胞；胚胎干细胞的培养、培养要点：促进胚胎干细胞生长，但需要一种抑制分化的培养体系。 培养过程： 1、制备饲养层(胚胎成纤维细胞)2.在培养液中培养胚胎使饲养层突出于内细胞团3 .酶消化或机械剥离内细胞团； 4 .分成单一细胞。 5 .加入饲养层进行培养。胚胎干细胞核移植，概念：将胚胎干细胞核移植

6、到脱核的卵泡中，经胚胎活化、胚胎培养、胚胎移植由直接受体完成克隆动物的技术。 过程：核移植胚胎培养胚胎移植。胚胎干细胞的主要用途：可用于研究哺乳动物个体的发生和发育规律是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质，可诱导ES细胞向不同种类的组织细胞分化， 为弄清细胞分化和细胞凋亡机制提供了有效手段移植可以用于治疗帕金森病、少年糖尿病等人类顽固疾病es细胞可以修复坏死或退化部位，恢复正常功能组织工程技术的发展， 在ES细胞体外诱导分化，定向培养人工组织器官，用于器官移植，解决供体器官短缺和器官移植后免疫排斥的问题。胚胎干细胞的应用前景、优点、可分化性别： (1)全能干细胞：有形成完整个体的分化可能性。 胚胎干细胞等。 (2)多能干细胞：能分化多种细胞组织，失去成长为完整个体的能力。 (3)专业干细胞：只能分化为一种类型或密切相关的两种类型的细胞。 骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等。 来源不同