降压物质检查法-祝清芬.ppt

1、a，1，抗高血压物质检查法DEPRESSOR SUBSTANCES，山东省药物检查所，a，2，内容摘要，基本概念和原则2010年版增源内容检查法欧洲药典抗高血压物质检查法，a，3，基本概念和原则，检查目的动物或微生物发酵萃取物和生产过程中可能混合这种物质的原料，必须填写抗生素、氨基酸、多肽等降压物质检查项目。在动植物、微生物发酵提取物及生产过程中，应在可能与组胺类或组胺混合的注射(静脉)中制作抗高血压药物检查项目。抗生素，中药注射，氨基酸，多肽等。a，4，基本概念和原理，降压药检验法定义如下。根据组胺标准(s)和测试标准(t)对麻醉猫血压下降的程度进行比较，判定检测品中的抗高血压药是否满足限度

2、。该法是通过观察猫对组胺样物质的比较敏感的作用，通过静脉注射特定剂量的捐赠者，对麻醉猫血压的影响，判断检测品中包含的抗高血压药是否满足限度。a，5，2010年版修订增补，历史进化1985年版从药典开始，按照现行药典(2005年版)方式，2005年版动物狗(5公斤以上)2010版修订，a，6，2010版与2005版的差异，a，7，2010版，a，9，检测法-材料，1血压记录装置：生物功能实验系统(多道生理记录仪)，相应的传感器，血压计(固定用)2动脉插管(细颈塑料管)，静脉插管(10号或12号钝针)，以及3 1毫升、2毫升、5毫升、10毫升注射器(4号半针)、玻璃容器：吸管、容量瓶等4种适当准确

3、度的平衡(以1万分之一为准)、动物秤(秤)5试剂：试验产品、组胺控制组检验法-对照组溶液配制，精密取磷酸组胺对照组适量，根据组胺溶出水，将每毫升1.0毫克的溶液装入适当的容器，维持活动经验证符合要求的情况下，可在3个月内使用。 在制备对照组稀释剂之前，对组胺调节溶液的量进行了精密测定，并以每毫升0.5ug的组胺溶液配制氯化钠注射液。注：1对照组切割将玻璃屑用2折算0.362，1毫克磷酸组胺用灭菌水制造、储存、使用时在室温下去除，a，12，检验法-试验用溶液，试验用溶液，品种不同，按指定量适当浓度的试验用溶液配制。测试时，一般与试验用溶液相比，稀释剂的注射体积必须相同。注：试验用溶液一般重量为0

4、.2ml/kg，应等于注射用。例如，如果注射阿奇霉素，标准注射量为2000u/kg，则注射10000u/ml，0.2ml/kg，2000u/kg的检查用和比较用可以调整为补充生理盐水。a，13，检验法，健康资格，体重2公斤以上的猫，雌性不会怀孕。用适当的麻醉剂(如巴比妥)麻醉后，固定在保温手术台上，分离气管，插入插管，使呼吸顺畅，必要时可进行人工呼吸。在一侧颈动脉插入连接压力计的动脉导管，在管内装满适当的抗凝液，记录血压。其他合适的仪器也可以记录血压。为注射药液，在一侧大静脉插入静脉插管。实验要注意保持动物的体温。全部手术结束后，可以将托压系统调整到与动物血压相似的高度(通常为13.3 16.

5、0 kpa)，打开动脉夹，注射药物，直到血压稳定。每个注射速度必须相同。每次注射后立即注射一定量的氯化钠，相邻两次注射的间隔必须固定(3 5分钟)，每次注射都要在之前反应稳定后进行。a，14，动物要求，健康资格，体重2公斤以上的猫，没有女性怀孕。资料来源：市场上销售的国内猫一般3公斤以上，麻醉耐受，血压稳定未怀孕实验中的保温注意，a，15，检查法-麻醉，一般麻醉剂和剂量戊巴比妥钠：静脉注射或腹腔注射30-40毫克/千克，一般30-40毫克/千克，a，16，检查法-仪器连接，颈动脉-动脉插管-记录表股静脉-静脉插管-给药装置，a，17，检查法-动物性监察官，在自己的静脉中依次注射上对照组稀释剂，

6、容量根据动物体重每公斤组胺注：0.5千克/ml的组胺浓度为0.1，0.2，0.3毫升/千克，a，18，检查法-检查用，每动物体重1千克的组胺0.1ug (ds)的剂量(dT)然后分别比较第一次和第三次、第二次和第四次剂量引起的反应。DT引起的反应值不大于ds引起的反应值的一半。也就是说，试验性降压药检查被认为符合规定。a，19，检验法-再检验，否则继续按上述顺序注入4组剂量，比较两组中对dS，dT的最大反应值。DT引起的反应值不大于dS引起的反应值，对试验产品的降压物质检查被认为符合规定。DT引起的反应值大于dS引起的反应值。也就是说，试验性降压药检查被认为不符合规定。否则要进行动物再测试。复

7、试结果表明，如果dT引起的反应值大于dS引起的反应值，即试验性降压药检查不符合规定。a，20，使用的动物可以通过敏感度检查，按照规定继续用于抗高血压物质检查。a，21，初步记录，组胺基准溶液和稀释剂准备测试动物类型和性别，体重(许可证号)麻醉剂名称，准备和容量抗凝剂名称和剂量记录血压仪名称和模型动物基准血压，动物敏感度测量测试溶液和基准稀释剂注射体积测量和结果判断完成地图，a，22，组胺检查根据处方、工序、用途和使用情况设置相应的检验项目，然后进行适宜性研究。a、23、4。组胺检测法是将特定浓度的试验用产品和组胺调节剂依次注入分离的豚鼠回肠浴缸，分别观察和比较收缩反应宽度，判断试验用物质是否符

8、合规定的方法之一。不合格的测试产品表明含有组胺和组胺物质。临床上可能会引起血压下降或过敏反应等严重的副作用。检查方法见本附录组胺检查法，设置a，24，在确定界限之前，应调查试验品对抗组胺对照组引起的隔离豚鼠回肠收缩反应的干扰(抑制或加强)，以获取最大收缩干扰浓度。如果测试材料、生产工艺等可能影响测试结果的条件发生变化，则必须重新进行干涉测试。a，25、干涉测试按以下顺序正确注射：组胺和基准稀释剂低容量、基准稀释剂低容量、测试和基准稀释剂高容量、基准稀释剂高容量、基准稀释剂高容量(dS T、dS、dSH T、dSH)、dS T和dSH引起的反应值否则，该品种不适合设置组胺物质检查项目，建议设置抗

9、高血压物质检查项目。a，26，限制除了特殊要求外，原则上与抗高血压药检查限制一致，按临床一次剂量的1/5 5倍和每公斤体重0.1g组胺剂量计算注射药含组胺的检查限制，其中K值为每公斤体重收到的组胺量测试剂量必须低于最大收缩干涉剂量。抗癌剂、心血管疾病药等重症疾病要使用高限度。a，27，组胺检测法，定义：组胺控制剂(s)和检测剂(t)在豚鼠中收缩分离回肠的程度比较，判断检测产品中的组胺类限制是否符合规定。a，28，对照组溶液的制备，精密，磷酸组胺调节剂适量，用水溶解和定量稀释剂每毫升制造1.0毫克溶液，将其分成适当的容器，储存在4 8 ，并在3个月内使用，确保收缩活性满足要求。a，29，对照组稀

10、释剂的制备，试验当天服用正确量的组胺调节溶液，用两种浓度的稀释剂(dSH，dS)注入氯化钠，大剂量dSH不要将回肠收缩率达到极限，低剂量dS的反应值可以重复为高用量的一半左右，调节量。一般组胺高低容量的最终浓度为10-6 10-8g/ml，注射体积0.2 1.0 ml为宜。a，30，试验溶液配制，按品种抗量基准稀释液低容量(dS)以适当浓度制备。测试时，一般测试用溶液和对比用稀释剂的注射体积必须相同。a，31，回肠肌肉营养液准备，a液体：试验当天氯化钠160.0g，氯化钾4.0g，氯化钙(无水计算)2.0g，氯化镁(无水计算)1.0g和磷酸氢钠(包含12个结晶水)0.100b液体：硫酸阿托品，

11、碳酸氢钠1.0g，葡萄糖(含一个结晶水)0.5g，加入适量注射液溶解，a溶液50.0ml，混合注入水1000ml。b液体使用前必须制造，并在24小时内应用。a，32，检查法，取健康合格的成年豚鼠，雌雄均可，无怀孕，体重250-350g，24小时禁食，迅速处死，排出血液。立即解剖，取出回肠(选择最敏感的远端肠)，注意不要因拉而损伤回肠，必要时小心地分离肠系膜。长度为2 3厘米，用注射器抽取上述溶液b，注意冲洗肠道部分的内容物。将撑杆底部固定在分离机构恒温水箱装置的浴缸底部，顶部用线连接到肌肉张力转换器。在浴缸中预先放入一定量的b-液体(约10-30毫升)，通过95% O2和5% CO2的混合气体

12、，保持恒温(34-36c)，用适当的方法记录回肠收缩曲线。使用杠杆时，长度应能使章节段收缩约为20倍。根据灵敏度选择要调整的1g预负荷。将会长放入浴缸后，要静置15 30分钟左右，才能注射药液。每次注射药液之前，用b溶液洗3次浴缸(最好不要排空浴缸，溢出)。相邻两种给药的间隔必须固定(约2分钟)，每次给药前，前一种反应稳定后进行。如果dSH引起的反应值大于dS引起的反应值(例如dS、dT、dT、DS、dSH)，请使用您认为测试结果有效的基准稀释剂和试验溶液，并正确地注入浴缸。如果测试溶液发生回肠收缩，则分别计算dS，dT引起的反应的平均值。如果DT反应的平均值不大于dS反应的平均值，则认为测试对象组胺分类物质检查符合规定。如果DT反应的平均值大于dS反应的平均值，则被测试对象组胺类型检查认为不符合规定。如果试验用产品没有引起