多肽合成中的具体问题

1、探讨 Methacrylic acid 在多肽合成中出现的问题,-吴辉,Methacrylic acid,中文名：2-甲基丙烯酸 结构简式：,原料性质 ： 甲基丙烯酸为无色结晶或透明液体，有刺激性气味。可溶于乙醇、乙醚等多数有机溶剂。易聚合成水溶性聚合物。可燃,遇高热、明火有燃烧危险,受热分解能产生有毒气体。,20168:（methylacryamide)-GGGGRGDS 这条序列在合成过程中并不困难，卢经理建议我在这条肽的切割过程中注意切割液的酸浓度不要太高，我猜想有可能是因为酸浓度过高会影响2-甲基丙烯酸的性质，从而影响多肽的合成效果。 所以在这条肽的切割过程中主要以改变切割液酸的浓度的

2、方法来观察对序列产物效果的影响。,1、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 90/5/3/2 2、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 85/8/4/3 3、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 80/10/6/4 保持切割时间相同，都为2.5h。,1、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 90/5/3/2 （粗品分析图）,2、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 85/8/4/3 （粗品分析图）,3、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 80/10/6/4 （粗品分析图）,结论,从上面三个切割方法得到的粗品分析图可以看出，各种切割途径下得到的粗品效果都比较好，没有多大的区别。所以得出的结论是在切割过程中改变酸的浓度

3、对序列产物效果的影响并不大。,之前季海建做过一条C端侧链接2-甲基丙烯酸的多肽：19545 HSNGLPLGGGGK(methylacryamide) 考虑到这条肽与20168有些相似，所以拿这两条肽来比较一下。,20168纯品分析 19545纯品分析,从两条肽的纯品分析情况来看，在19545中将2-甲基丙烯酸接在侧链时得到的多肽产物比较杂，纯度也较差；而20168中将2-甲基丙烯酸接在主链上时得到的多肽产物纯品纯度较高。并且19545在合成过程中，难度也较大。 两条肽纯品分析结果差异较大可能是因为2-甲基丙烯酸的连接位置不同，也有可能是两条肽的主链有较大的差异（19545在接2-甲基丙烯酸前

4、没有对直线进行分析，有可能是直线效果不好）.,对19545（HSNGLPLGGGGK(methylacryamide)）进行分析，首先从主链看，序列最后接上的是组氨酸，由于组氨酸较于其他氨基酸稳定性较差，在合成过程中特别容易产生消旋。（查阅相关文献：多肽合成过程中，部分氨基酸在活化的过程中会导致不同程度的消旋，特别容易消旋的氨基酸有：Cys，His，Phe）由于消旋化对于多肽合成和纯化工艺具有很大的重要性，对于一个10肽,如果每个氨基酸仅发生1%的差向异构化,则合成终产物的光学纯度就只有90.4%,而对于一个50肽,其光学纯度则仅有60.5%。最后可能导致纯化的分析结果很差。 目前已经将19545重新合成，在合成过程中可以通过采用高效缩合试剂，减少反应时间，来减少消旋的比例。,还有在切割过程中，切割液里的EDT可能会对2-甲基丙烯酸产生影响，所以在切割重新合成的19545时要注意控制EDT的量，尽量减少对2-甲基丙烯酸的影响。,最后猜想可能是将2-甲基丙烯酸接到侧链上时，有可能会降低序列产物的效果，而将2-甲基丙烯酸接到序列主链上时序列产物的效果会好很多。,由于造成多肽合成产物分析结果不同的其他因素还