实验六植物细胞骨架的光学显微镜观察_第1页
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文档简介

1、实验六：用光学显微镜观察植物细胞骨架；实验一：通过对洋葱内皮细胞的处理，掌握植物细胞骨架的制备方法和显微观察。2.掌握考马斯亮蓝R250染色植物细胞骨架的方法。(2)实验原理：细胞骨架是由微丝、微管和中间纤维组成的复杂网络结构。Triton X-100可以溶解和提取细胞中的蛋白质和脂质，但不破坏细胞骨架系统。戊二醛固定，考马斯亮蓝R250染色，光学显微镜下观察微丝组成的网状细胞骨架。3台实验仪器、材料和试剂、1台仪器、用具：普通光学显微镜等。2种材料：洋葱鳞茎3种试剂：(1) m缓冲液(2) 6 mmol/l磷酸盐缓冲液(3) 1% triton x-100 (4) 0.2%考马斯亮蓝R250

2、，3种实验仪器、材料和试剂，3种试剂：5%戊二醛5%，70%，95%乙醇5%叔丁醇、正丁醇、二甲苯、中性树胶，4种实验方法(1)，1个洋葱鳞茎内表皮(1厘米大小)50毫升烧杯(磷酸盐缓冲液)下沉2，吸收缓冲液加入1 吸收triton x-100 3次用m-缓冲液洗涤3次/10分钟，用4-3%戊二醛固定0.5-1小时，四种实验方法。 5磷酸盐缓冲液洗涤3次/10分钟，6 0.2%考马斯亮蓝R250染色2030分钟，7蒸馏水洗涤1 2次加载观察8制作永久切片，四种实验方法()，取约1cm洋葱内皮置于含PBS溶液的载玻片上润湿，然后吸收PBS并加入2滴1%Triton X-100/M缓冲液。吸收缓冲

3、液5min，加入3%戊二醛-聚对苯二甲酸乙二酯溶液，固定30分钟，用聚对苯二甲酸乙二酯洗涤2次，加入0.2%考马斯亮蓝R250洗涤3分钟，用聚对苯二甲酸乙二酯洗涤2次，吸干进行显微镜检查，绘制细胞骨架标本的制备过程，5项作业，1绘制植物细胞骨架微丝结构图。2.分析和讨论光学显微镜下观察到的细胞骨架的形态特征。为什么使用TritonX-100缓冲液处理材料？植物细胞骨架微丝结构图、植物细胞骨架微丝结构图、植物细胞骨架微丝结构图、植物细胞骨架微丝结构图、植物细胞骨架形态特征、细胞骨架观察结果光学显微镜下洋葱内表皮细胞轮廓清晰可见(如图所示)，细胞壁及其边界明显。在1010倍显微镜下，可以粗略观察到细胞内不同厚度的蓝色纤维和团块形成的网状结构。同一细胞内的骨骼密度不均匀，核区的纤维较密，蓝色较厚，甚至连网络结构都无法分辨。此外，散在的蓝色纤维分布在细胞壁区域。相邻细胞的密度基本相同，但少数细胞差异很大。植物细胞骨架的形态特征，细胞骨架的观察结果可以清楚地观察到，蓝色网状结构确实是由线状纤维交织而成，纤维之间的连接处稍有扩大。细胞边缘的骨架稀疏，但可以看到由与细胞壁方向相同的纤维形成的细胞质膜的轮廓，其通过纵向纤维与细胞内的纤维相连。相邻的细胞有穿过细胞间细

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