公开课 分解纤维素的微生物的分离.ppt

1、1，JLSSYBYH，2，纤维素和纤维素酶，1。纤维素，纤维素是连接葡萄糖末端和末端的聚合物化合物，是最丰富的多糖物质。一、基础、植物的根、茎、叶和其他器官包括很多纤维素。其中棉花是自然界纤维素含量最高的天然产物。3，土壤中的某些微生物生产纤维素酶，将纤维素分解成葡萄糖后利用。4，纤维素是地球上最丰富的多糖，植物每年产生超过70亿吨的纤维素。其中40%-60%可被土壤中生产纤维素酶的微生物利用，不大量积累。食草动物等消化道内也有分解纤维素的微生物共生的原理是制造纤维素酶分解纤维素，但人类没有分解纤维素的能力。人类可以利用分解纤维素的微生物将稻草等废弃物转化为酒精，用纤维素酶处理服装面料等。5，

2、2。纤维素酶纤维素酶一般被称为C1酶(外体酶)、CX酶(内体酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶将纤维素分解成纤维二糖，第三种酶分解成纤维二糖的复合酶。6，C1酶：外体酶在糖链末端切割两个葡萄糖分子，形成纤维素酶，使纤维素碎成碎片。葡萄糖苷酶：将纤维二糖分解成葡萄糖。2个7，20毫升试管，实验：1个纤维素酶降解纤维素，1个滤纸，1个pH4.8，0.1毫升/L的醋酸钠缓冲液11毫升和10毫升，a，b试管中的1毫升纤维素酶，2个试管，固定在锥形瓶中，0.1毫升/L考官的作用是什么？8、提示：本实验的收购是关于是否有纤维素酶。自变量在一个试管中添加适量(1毫升)的纤维素酶溶液，其他试管不添加纤维素酶，但要添加

3、等量的缓冲液，不要加入蒸馏水。否则会影响溶液的pH值。实验分析：P27中的小实验如何构成对比？9、刚果红染色法，刚果红在水解后可以形成纤维素和红色复合物，而不是纤维二糖和葡萄糖。(b)纤维素细菌的筛选，在包含纤维素的培养基中添加刚果红，刚果红形成培养基中的纤维素和红色复合物。纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物不会形成，以纤维素酶分解细菌为中心，透明环出现在培养基上，因此可以通过是否产生透明环来筛选纤维素分解细菌。10，11，2，实验设计，您可以根据实验流程图和提供的3种资料及“操作提示”，根据问题的想法，设计详细的实验方案。12，分布环境，1，土壤取样：在纤维素丰富的环境中工作阶段

4、，生物与环境的相互依赖性，纤维素丰富的环境中纤维素细菌的含量比较高，在这种土壤中获取目的微生物的概率比一般环境高。原因，13，如森林中多年落叶形成的腐殖土，积累多年的枯枝败叶等。如果找不到合适的环境，如果把滤纸埋在土壤里问土壤，会有什么效果呢？你认为滤纸应该埋在土壤里多深？将滤纸埋在土壤中可以实现纤维素细菌的相对集中，实际上是适合纤维素细菌生存的环境。滤纸一般要埋在约10厘米深的土壤里。14，2，选择培养，增加纤维素细菌的浓度，使所需的微生物可以从样品中分离。目的：准备选择培养基：工作：将土样品放在带30ml选择培养基的锥形瓶里，将容器固定在摇动上，在一定温度下振动12天，直到培养液浑浊为止。

5、也可以重复选择培养。15，培养基成分分析，16，提示：收购是培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可以与牛肉软膏蛋白胨培养基比较，也可以将纤维素转变为葡萄糖。a，旁列的公式是液体培养基还是固体培养基？怎么了？因为公式中没有凝固剂(琼脂)，液体培养基，b，这个培养基对微生物有选择效果吗？如果有，如何选择？有选择作用，在本配方中，纤维素用作主要碳源，只有能分解纤维素的微生物才能大量繁殖。c，你能设计对比实验来说明选择培养基的作用吗，17，说明：“纤维素分解菌的选择培养基配方分析”，其配方的酵母膏也能提供少量碳源，因此其他微生物也能在培养基中生长繁殖。但是因为酵母膏的含量少，只有以纤维素为碳源的微

6、生物才能大量繁殖。18、在选择培养的条件下，可以迅速繁殖能适应这种营养条件的微生物，不能适应这种营养条件的微生物的繁殖受到抑制，因此可以起到“富集”的作用。为什么我们选择培养可以“富集”的微生物？19.以尿素为氮源的选择培养基上涂有细菌，以纤维素为碳源的选择培养基，固体培养基，液体培养基，筛选菌株，培养选择，20，考察：这个实验过程和主题2的实验过程有什么相似之处？本实验过程与主题2的区别如下：主题2将土样制成的细菌悬浮液直接涂在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离群体。本课题是通过选择培养，使纤维素细菌增殖，并将该菌液涂在选择培养基上。其他步骤基本相同。第21，根据主题1的稀释法，稀释培

7、养的培养基选择等的101107倍。3 .渐变稀释，22，4。将样品涂在纤维素细菌的鉴定培养基上，(1)准备鉴定培养基：(2)涂在培养基上：将稀释度为10466的细菌悬浮液分别涂在扁平培养基上，30倒培养。23，纤维素细菌的识别培养基，(水溶性羧甲基纤维素钠)，24，方法1:先添加刚果红的颜色反应。方法2:加入刚果红。微生物培养，背板，5。刚果红染色法，选择制作透明胶片的殖民地，一般是分解纤维素的殖民地。25、这两种方法的优点和缺点是什么？颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。麻烦的刚果红的操作可能会在殖民地之间混合，操作简单，没有军殖民地混合问题。1.生产淀粉酶的微生物也制造出模糊的透明源。2.

8、有些微生物分解色素，形成明显的透明源。26，在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，氨会增加培养基的碱性，提高pH值。将酚红指示剂添加到培养基中后，pH会变成红色，刚果红可以形成纤维素和红色复合物，纤维素被纤维素酶催化分解时，如果红色复合物不能形成，则以纤维素分解细菌为中心出现透明环，观察菌落周围是否出现彩色环，了解脲酶检测方法，刚果红染色法，27，方法中NaCl溶液的作用？想：冲洗作用，与纤维素结合的刚果红，透明圈不够明确。通过这种方法可以知道酶活性的大小，实际上刚果红是结合在培养基上的多糖基质，但分解纤维素的细菌可以制造纤维素酶，分解这种多糖基质，使其成为单糖，使刚果红不

9、能结合，氯化钠溶液不能凝固的刚果红洗净，留下大大小小的透明圈，还可以分解纤维素！28、在产生明显透明源的斗兽场中，可以选择纤维素分解菌的选择培养基，在300C370C中培养，获得精制的培养。，6，纯化培养，29，4，结果分析和评价，1。说明在培养基的培养过程中，如果没有菌落生长，培养基的生产合格，选择培养基是否被制造以及培养基的菌落控制筛选。如果观察产生透明环的殖民地，就可能获得了分解纤维素的微生物。2.分离的结果是否一致，因为土壤中的细菌数远远多于真菌或放线菌数，最容易分离的是细菌。但是，根据采集土壤的环境，不同的学生可以得到真菌和放线菌等不同的分离结果。30，为了确认分离是纤维素分解菌，还需要_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _实验。纤维素酶的发酵方法有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _发酵和_ _ _