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文档简介
1、新型壳聚糖衍生物作为基因给药系统载体的研究,主持人:段文佳 成 员:朱思艳 罗 芮 刘 倩 潘 晶,2015年中国药科大学创新实验中期汇报,项目进展情况,下阶段计划,实验方案,实验方案案,1.溶解度,2.稳定性,3.内涵体逃逸功能,4.连接主动靶向配基,使载体具有主动靶向性,两个方案,方案一:以2-氯乙胺盐酸盐为连接物,修饰4-咪唑甲醛于壳聚糖季铵盐的氨基,方案二:将4-咪唑甲醛直接修饰于羧甲基壳聚糖的氨基,再通过静电作用结合壳聚糖季铵盐,合成方法,取代度测定方法,实验条件的优化,载体 合成,项目进展情况,合成方法,+,0.5g OCMCS溶于15ml去离子水(溶液1),0.192g 4-咪唑
2、甲醛溶于15ml去离子水(溶液2),溶液2逐滴滴入溶液1中(用时20min),加热搅拌反应4h,过量无水乙醇提取,将提取物过滤、洗涤、干燥,用一定量水溶解,257nm下测其吸光度,合成方法,预实验测得吸光度值为0.427判断此方案可行,,,紫外分光光度法,以去离子水作溶剂,配制适宜浓度的4咪唑甲醛溶液,以去离子水做空白,在200400nm范围扫描测定最大波长。 4咪唑甲醛水溶液在257nm处有最大吸收,检测波长的选择,取代度计算,取代度测定方法,DS=100*(m1/M1)/(m-m1)/Mcs单元) m1:测得4-咪唑甲醛含量 M1:4-咪唑甲醛相对分子质量 m:称取偶联物的质量 Mcs单元
3、:羧甲基壳聚糖的单元分子量,标曲绘制,(g/ml),方程式: y=0.11969x+0.01898 R2=0.9989,线性范围: 0.20.7 1.56g/ml6.14 g/ml,最佳时间的确定,最佳配比的确定,最佳温度的确定,实验条件的优化,实验条件的优化,经过实验初步确定 在OCMCS:4-咪唑甲醛=1:2、在55摄氏度下反应5小时可得到最大取代度,问题,温度和时间设置的范围不够宽,最佳时间和最佳温度测定并不准确还需要增加实验确定这两个最佳条件,纳米粒的制备,正交设计法,下阶段计划,继续优化新型载体的合成条件,测定合成壳聚糖衍生物的理化性质(结构确证、缓冲容量、溶解度等) 将连有咪唑基的羧甲基壳聚糖(带负电)和壳聚糖季铵盐(带正电)通过静电力结合,并做成纳米粒载体 小组
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