开题泌尿外科研究生ppt课件

1、.,1,*医院 2011级泌尿外科研究生,开 题 报 告 2012-12,.,2,题目：,*,导 师：*教授 研 究 生：* 研究方向：泌尿外科学,.,3,目录,.,4,研究背景,一. 概况 1.膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤，其中90以上为移行细胞癌 2.膀胱癌具有易复发和晚期恶性加重的特点，给患者及其家庭带来沉重的心理压力及经济负担,.,5,研究背景,二.发病率 1.膀胱癌发病率在全球恶性肿瘤中位居第十一位,其中在男性恶性肿瘤中排名第七位 2.虽然在我国膀胱癌发病率远低于西方发达国家水平，但是近年我国部分城市报告膀胱癌发病率有增高趋势 3.城市居民膀胱癌死亡率明显较农村为高,.,6,研究背

2、景,膀胱癌中非肌层浸润性膀胱癌予: 经尿道膀胱肿瘤电切术后,+,膀胱内灌注化疗或免疫治疗,仍易复发,三.治疗,.,7,研究背景,四. 治疗 1.至今，术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段 2.但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性，从而使其疗效显著降低 3.近些年来，寻找安全、有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向,.,8,研究背景,四. 治疗 1.至今，术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段 2.但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性，从而使其疗效显著降低 3.近些年来，寻找安全、有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的

3、热点研究方向,.,9,研究背景,曲古抑菌素A（TSA）简介： 1.源自链霉菌代谢产物，最先作为抗真菌药物使用 2.一种氧肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂，近来研究表明其具有抑制组蛋白去乙酰化酶的活性,.,10,研究背景,曲古抑菌素A对肿瘤的作用： 1.其被证明可在小剂量，低浓度情况下导致肿瘤分化，并选择性地抑制肿瘤生长而对正常细胞无毒副作用 2.其日益受到临床医学界重视,而对TSA抑制膀胱癌生长的具体作用机制和途径尚未明确,.,11,研究背景,概念： PTEN（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten）: 为人第10号染色体缺

4、失的磷酸酶及张力蛋白同源的抑癌基因,.,12,研究背景,作用： 在体内、外均可使FAK 脱磷酸,从而阻碍整合素介导的肿瘤细胞扩散、转移、侵袭和骨架蛋白组装,.,13,研究背景,pten,特异性使PIP3脱3C磷酸,PI3K/AKt信号转导途径,细胞中Akt磷酸化水平显著,细胞生长周期关键激酶抑制因子P27kipl,干扰细胞生长信号,使细胞阻滞于G1期并增加细胞对凋亡的敏感性,.,14,研究背景,概念： RUNX3 (human runt2related transcription fac2 tor3) ： 人RUNT相关转录因子3，是属于 RUNT家族成员的肿瘤抑制基因,.,15,研究背景,作

5、用： 在Runx蛋白作用下Smad复合物从细胞质内转入特定的靶位点,当Runx基因表达受抑制时,影响TGF2信号通路的转导,从而诱导肿瘤的发生。,.,16,研究背景,现状： 已证实在胃癌等恶性肿瘤中都出现了Runx3基因转录和翻译水平的下调，但在泌尿系肿瘤尤其是膀胱癌中有关Runx3的研究报道相对较少,.,17,相关概念,半定量反转录聚合酶链反应 （SqRT-PCR） 是近年来常用的一种简捷、特异 的定量RNA测定方法,.,18,相关概念,SqRT-PCR基本原理： 1.通过mRNA反转录成cDNA，再进行PCR扩增，并测定PCR产物的数量可以推测样品中特异mRNA的相对数量 2.以半定量RT

6、-PCR为基础建立起来的mRNA含量测定技术，较含内标化的RT-PCR定量测定的mRNA的方法更为简便可行,.,19,研究目的和意义,TSA,膀胱移行细胞癌 BIU-87细胞株,PTEN 表达情况,Runx3 表达情况,作用于,探讨： TSA抗癌的可能的作用机制和途径,.,20,实验方案,RPMI-1640培养基,酶解并配成1x105/ml细胞悬液,.,21,可行性分析,1.本课题人员具备扎实的理论和实验技术基础，导师刘久华主任在膀胱癌研究领域具有较深造诣，其丰富的专业背景和知识将有助于指导本项目的顺利开展，保证该项目的顺利进行。 2.*科研中心实验室仪器配置保证了试验顺利进行及指标检测。 3

7、.大量阅读文献，加深对相关基因的作用机制的认识，跟随导师所习得的关于细胞培养和半定量RT-PCR技术让试验的进行更加有保障。,.,22,预期目标,1. SqRT-PCR结果可能显示TSA处理能明 显诱导PTEN和Runx3基因表达增加并呈现浓度与时间依赖性 2.故而可以得出：TSA体外抗膀胱癌作用机制可能与其诱导PTEN、Runx3 mRNA的表达上调有关,.,23,经费预算,试验细胞及培养 3500元 购买试剂 4500元 仪器使用及台租 2500元 科室协调费1500元 合计12000元,.,24,进度安排,第一阶段（2012.10-2013.3）查阅文献、选题开题、掌握实验基本步骤。按课题设计申购实验用的各种试剂（盒）及实验细胞株 第二阶段 （20