基因诊断与治疗ppt课件

1、.,1,膀胱癌组织中TERE1/UBIAD1表达及Ras-MAPK信号通路分析,殷享亮、刘文彬、韩学超、 许小兵、刘长涛,.,2,膀胱癌介绍,据国际癌症组织机构统计，膀胱肿瘤作为泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，是目前导致人类因肿瘤死亡的第四大原因。,在中国，膀胱癌是排列第十位的常见肿瘤。 膀胱癌具有多发性、复发性的特点。,.,3,TERE1/UBIAD1简介,移行上皮反应基因(Tansitional epithelial response gene，TERE1)是人类一类新的直接与前列腺癌、膀胱癌有关的基因。该基因编码一个含338个氨基酸，分子量约为36.skDa的蛋白质，广泛表达于人类各种正常

2、组织的基因，特别是泌尿系统上皮如前列腺、膀胱、肾脏等,TERE1具有多个疏水结构域，因其编码UbiA类异戊系转移酶，又称之为UBIAD1,.,4,研究表明在前列腺癌、肾癌及癌细胞系中，TERE1基因和蛋白表达水平显著下降，而通过基因转染在前列腺癌细胞中过表达TEREI，能显著减少肿瘤的增殖和维持基因组的稳定,推测TERE1/UBIAD1基因可能是一类新的抑癌基因,.,5,目的,检测分析临床膀胱癌组织和正常膀胱组织TERE1/UBIAD1表达及Ras-MAPK信号通路的变化。,.,6,方法,采用免疫组化检测分析人正常膀胱组织及膀胱癌组织中TERE1和端粒逆转录酶(hTERT)的蛋白表达水平:用R

3、T-PCR及 westemblotting检测膀胱癌组织中TEREI和hTERT的表达水平及Ras-MAPK信号通路关键分子的变化,hTERT作为端粒酶活化的限速酶，在正常组织的增生和肿瘤的发生中起着至关重要的作用。研究表明人类多种肿瘤组织中均可检测到hTERT的活性表达，而在正常膀胱组织中却未检测到。,.,7,膀胱癌及正常膀胱组织标本中TEREI与hTERT免疫组化结果,.,8,结果-免疫组织化学染色分析 HE染色,Normal bladder Bladder carcinoma,9,.,TERE1(正常膀胱组织) （膀胱癌组织）,10,.,hTERT正常膀胱组织 膀胱癌组织,11,.,膀胱

4、癌及正常膀胱组织标本中TERE1与 hTERTmRNA水平,Lanel:200bpMarker: Lane2:正常膀胱TERE1(500bp)mRNA水平; Lane3:膀胱癌标本中TERE1mRNA水平; Lane4:正常膀胱组织hTERT(182bP)mRNA水平; Lane5:膀胱癌标本中hTETmRNA水平。下方胶图:对应组织中内参 GAPDHmRNA水平。,12,.,膀胱癌组织中TERE1表达水平相对于正常膀胱组织明显降低， TEREI表达水平与癌组织的分级分期密切相关，随着肿瘤恶性程度增加，癌组织TEREI表达下降越明显。 膀胱癌组织中检测到hTERT明显表达，而正常膀胱组织未检测

5、到hTERT表达。,13,.,膀胱癌及正常膀胱标本中TERE1与hTERT蛋白表达,14,.,相对正常组织，膀胱癌中TERE1蛋白表达明显下降，统计分析具有显著性差异，P0.01，高恶性度膀胱组织中未检测到TERE1蛋白表达。 正常膀胱组织没有检测到hTERT蛋白表达水平，而膀胱癌组织中hTERT明显高表达。,15,.,Ras-MAPK信号通路中关键分子在组织中蛋白表达水平,16,.,与正常膀胱组织相对比，膀胱癌组织中磷酸化ERK、磷酸化MEK(1/2)、磷酸化B-Raf(Ser455)及磷酸化C-Raf(Ser338)蛋白表达水平明显增加，有显著性差异(P0.05); 而膀胱癌组织与正常膀胱

6、组织中总的ERK、MEK(1/2)、A一Raf、B一Raf、C一Raf及磷酸化A一Raf(Ser299)蛋白表达水平没有明显差异。 未检测到膀胱癌组织中磷酸化的C-Raf(Ser259)和磷酸化的C-Raf(Ser289/296)蛋白表达。,17,.,讨论,为探讨TEREI与膀胱癌的关系， 我们的免疫组化实验结果显示:膀胱癌T2、T3一4期TEREI染色阳性率与Ta、TI期阳性率相比，具有显著性差异。 根据组织学分级，G3一4期TEREI染色阳性率与G2期TEREI相比具有显著性，与GI期阳性率相比差异具有极显著性。,18,.,讨论,根据逆转录PCR和免疫印迹结果显示：膀胱癌组织中TEREI核

7、酸转录与蛋白翻译水平与正常膀胱组织相比明显下降。 提示TERE1与膀胱癌相关。随着肿瘤恶性程度增加，癌组织TERE1表达下降越明显，呈负相关。,19,.,TERE1与膀胱癌的关系,我们采用免疫印迹分析了膀胱癌组织中Ras-MAPK信号通路中一系列关键分子的变化。发现: 膀胱癌组织中磷酸化ERK、磷酸化MEK(1/2)、磷酸化B-Raf(Ser455)及磷酸化e-Raf(Ser338)蛋白表达水平明显增加，有显著性差(P0.05);,20,.,TERE1与膀胱癌的关系,而膀胱癌组织与正常膀胱组织中总的ERK、MEK(1/2)、A-Raf、B-Raf、e-Raf及磷酸化A-Raf(Ser299)蛋白表达没有明显差异，提示膀胱癌中Ras-MAPK信号通路明显被激活,.,21,Thank you,22,.,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,23,.,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！,24,.,致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求,25,.,感谢您的观看和下载,The user