月季的花药培养(复习).ppt

1、、花(宋-朱淑贞)只有一个谢一个妍，是因为春天的不和。 牡丹虽称艳艳，但毕竟繁荣。 花中的皇后月季也被称为“月月红”，自然的开花期从5月持续到1.1月，通常扦插就能成活。 采用植物组织培养技术，将在一定阶段发育的花药通过无菌操作技术接种人工培养基，改变花药内花药颗粒的发育过程，诱导分化，形成细胞球团，形成愈伤组织，然后将愈伤组织分化成完整株的技术。 花药的培养是什么花药： (1)被子植物的花粉发育，一，基础知识，花丝，花药：囊状构造，内有很多花粉，(1)被子植物的花粉发育，一.雄蕊，一，基础知识，雄蕊，一，基础知识，二.花粉的概念：花粉母细胞球经过减数分裂形成的单小孢子母细胞球(花粉母细胞球)

2、， 减数分裂4个小孢子(小孢子四分体时期)、1个小孢子(单核位于中期)核位于细胞球的中央(四分体的4个单倍体细胞球相互分离，形成分别具有1个单核的花粉粒)、3 .花粉发育过程：有丝分裂、1个小孢子(单倍体)、花粉管核、生殖核、营养细胞、 2个精子(基因型相同)、双核期，细胞球生长，核从中央向细胞球侧移动，历时：四分期、单核期、二核期，3 .花粉发育过程、花粉粒种类，一个成熟的花粉粒为雄配子体，两个时：二核花粉粒：成熟的花粉粒仅包含花粉管核和生殖核。 (精子形成花粉管)，三核花粉：的一部分植物花粉，成熟前生精细胞一次有丝分裂，形成两个精子。 这种花粉成熟时含有一个营养核和两个精子。 (二)花粉株

3、产生的两个途径、资料、胚状体又称体细胞球胚，该体细胞球在形态上可以转变为与合子发育的胚非常类似的结构，而且他的发育过程也与合子胚类似，胚芽、胚根、下胚轴胚状体和愈伤组织为什么称为分化和再分化？ 想来，胚状体就像种子，有胚芽、下胚轴、胚根等结构。 从胚状体到群芽从原始的分化状态持续成长和分化。 愈伤组织形成群芽的过程是从脱分化状态再分化形成群芽的过程。 一、基础知识，(三)影响花药培养的因素，一、材料选择、从花粉看、花蕾看、月季初花期、单核期、未完全开放的花蕾、盛开的一些花和开放的花很难被选为实验材料，为什么不选择单核期在先和随后的花药接种？ 请考虑一下。 到单核期的花药，质地柔软，容易坏。单核

4、期以后花药、花瓣稍微松弛，给材料消毒带来困难。 为什么花瓣松弛会给材料的消毒带来困难？ 请考虑一下。 为了选择单核期的花药，选择什么材料？这份资料有什么优点？花瓣一松弛，微生物就会侵入花药，给材料的消毒带来困难。 细菌少，容易消毒。 蕾、一、基础知识一窍不通，(三)影响花药培养的因素，二、培养基组成，三、其他因素，亲本株生长条件，材料低温预处理，接种密度等，(一)材料选择；(二)材料消毒；(三)接种和培养；二)实验操作，有些植物花粉核不易着色，焙花蓝最常用的方法是冰乙酸洋红色法，2、镜检对适当的发育期判断有木有。1、从花药来看，月季的初花期从花粉来看，单核期从花蕾来看，完全不开放的花蕾，(1)

5、材料的选择，焙花蓝-绿矾法(把花粉核染成蓝黑色)，冰乙酸品红法(把染色体染成红)，2、镜检查判断有木有为合适的发育期。 (1)材料的选择，一滴花药(在载玻片上)的冰乙酸品红色用大头针定径套粉碎花药，取出玻璃盖片检查(花粉粒的核染成红色)，花药(在卡诺固定液中进行20min处理)，将放置在载玻片上烧制的蓝铬矾溶液染色材料消毒5，无菌水洗涤3.5外有萼、花瓣保护，通常处于无菌状态，1、花蕾用体积分数70%的酒精浸泡3.0秒钟，2、无菌水洗涤，3、无菌吸水纸吸取花蕾表面的水分，4、 在质量分数为0.1%的氯化汞溶液中加入2.4分钟(质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白剂溶液)，剥离、花药接种花药，

6、培养分化培养基进行培养、鉴定和筛选，不要损伤花药，完全除去花药。 染色体倍性变化时有出现，1个培养瓶中接种(710 )个花药形成愈伤组织，温度控制在2.5程度，无需光照。 小植物长出来以后需要光。 主要原因是营养核与生殖核的融合，(3)接种和培养、灭菌后的花蕾，在无菌条件下去除叶片和花瓣，立即将花药接种培养基中剥离花药时，应尽量避免损伤花药(否则接种后，从受伤部位形成二倍体的愈伤组织) 花药破裂释放胚状体时，一个花药内会产生很多幼株，花药破裂后，必须尽快分离幼株，移植到新的培养基中。 不这样做的话，这些个的股票很难分开。 在花药培养中，特别是通过愈伤组织化形成的花粉株，常常会出现染色体倍性的变

7、化。 (主要原因是营养核与生殖核的融合。 因此，有必要对培养的植株进行进一步鉴定和筛选。 1、选材是否合适2、无菌技术是否合格3、接种是否成功，选材是花药培养成功的关键。 如出现污染现象，说明培养基灭菌、花蕾消毒、接种等操作顺序存在问题。 当接种的花药愈伤组织化或释放胚状体时，花药培养的第一一头地成功。 必须及时转换培养基，使愈伤组织和胚状体进一步分化为再生株。 三、结果分析评价、植物组织培养技术与花药培养技术比较、植物组织培养技术与花药培养技术的共同点，都在培养基的制备方法、无菌技术及接种操作等基本相同。 不同之处在于花药培养的选择非常重要，需要探索适时花蕾，花药裂开后释放的愈伤组织和胚状体也必须立即更换培养基，花药培养对培养基配方的要求更加严格。 这些个大大增加了花药培养的难度。 课题成果评价，选材合适与否是花药培养成功的关键。 必须学习用显微镜观察合适的发育期中的花粉。 对课题成果的评价、