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文档简介
1、掌握胶体金试纸条诊断技术、肖书奇动物医学院预防兽压电石英系电话:E-mail:实验目的、胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方法及结果判定,简单介绍一下,胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析法技术研制的, 该技术建立于9.0年代初基于免疫渗滤技术的简易快速免疫学检测技术,最初用于人绒毛膜促性腺激素(HCG )的检测和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg )等的检测。 胶体金(Colloidal gold )是盐酸(HAuCl4)的水溶胶,利用HAuCl4在还原剂(柠檬酸钠)的作用下聚合为特定大小的金粒子,形成带负电的疏水胶体溶液,形成静电作用稳定的胶体状态,因此称为胶体金。
2、简单介绍一下,质量好的金胶体:溶液为红色,金胶体颗粒为球形,大小均匀,无棱角。 质量差的金胶体:溶液呈紫色,大小不同,形状不同。胶体金的质量标准、简单、胶体金标识牌原理:胶体金在碱性条件下带负电荷,并与蛋白质分子的正电荷化学基电吸引,形成牢固的结合。 胶体金标识牌技术(Immunogold labeling technique )是将胶体金作为示踪物标识牌物应用于抗原抗体反应的新型免疫标识牌技术。 简单介绍一下,胶体金试纸的诊断技术原理是以硝酸电池里肌肉膜为载体,利用微孔膜的毛细作用,滴到膜一端的液体逐渐渗透到另一端,通过抗原抗体结合,在胶体金上发生颜色(红色)反应,检测抗原/抗体。 最常用的
3、是双抗穿山鼠开关法检测抗原,胶体金试纸的模式图是,、测定时将试纸的下端浸入液体标本中,下端的吸水材料吸取液体移动到上端,流过c处时溶解干板上的免疫金复合体,使之浸透到薄膜中。 经测定,如果不测定标本中的特异抗原,就可以与免疫金复合体中的抗体结合,该抗原抗体复合体在试验区流通后,就会被固相抗体捕获,在膜上出现红色反应线(t )。 经测定,过量的免疫金复合物继续与固相抗小鼠IgG结合(免疫金复合物中的单克隆抗体为小鼠IgG ),显示红色的联合蛋白(r )。 测定、阴性标本无反应线,仅显示质量控制线。 测定,胶体金快速诊断技术的特点,简单快速:操作简单,一般以5-10min得出结果,但其他方法如ELISA需要1-2h,PCR更费时间。 结果很容易判断:阴、阳性呈色明显,肉眼容易判断。 专一性好:由于该技术多以单克隆抗体标识牌,被判定为专一性好。 细小病毒性疾病:传染病、禽流感细小病毒、新城疫、犬小细小病毒、猪流感等。 寄生虫病:血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙虫病。 细菌性疾病:霍乱弧菌,类鼻坏疽。胶体金快速诊断技术的应用、H5亚型AIV尿液阳性结果
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