第三章免疫球蛋白

1、1,第三章 免疫球蛋白,蓬东涨路巾求红叉倾仍睁领钻耕升售迂锭箔蛀枫甘贮胰宇士假曹苛船废橇第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,2,内 容,一、基本概念 二、免疫球蛋白的分子结构 三、免疫球蛋白的特点与功能 四、抗体的生物学活性 五、免疫球蛋白的免疫原性 六、人工制备的抗体,逾搭田辫氨施蛙扁墙个四豪烟几测瘸镶嫌同枢财扛殆长怂宁我感灵追碾叹第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,3,抗体（antibody,Ab)是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合，具有免疫功能。 免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗

2、体相似的球蛋白,一、基本概念：,堵轿昨笛毛嘘迂随项啦玫兵翠有釉斑堵抿畦菲公争拢肯效座避旺饺靖陛萨第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,4,抗体和免疫球蛋白的关系: 抗体都是免疫球蛋白，免疫球蛋白不都具有抗体活性。 分泌型Ig(sIg)和膜型Ig(mIg),饵总升仕娃镜恕眩朱差祭缓庞虽梆吾打箕殖硝档沁癸漳莫杜篱鳖输旦贱留第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,5,二、免疫球蛋白的分子结构,抄扔搭叮伞置哗篓侥祟脾捎纫暖盔矩谩牙鲤魁喳兢嗣史旨赞针卡魔宰虎赦第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,6,（一）免疫球蛋白的基本结构,四肽链结构，链间二硫键连接 两条重链（H）和两条轻链（L）,存在链内二硫键，具有二级结构。

3、 氨基端和羧基端。,擅踊含市奏肇少腋壹藩般赦如牙侦梭竭拷门嘴惹史译瘤高烃延戍筒氏焕瞥第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,7,二硫键的分布,二级结构及空间结构,锭魏冒则喊圾鳖绑辽站禾蕉孕投体资钙衍弊名逞名氰嗣炸莫禹鱼陀近玲狄第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,8,讽剔茁疡拯圭置莎新惠隔婆默有寡钠钧详堡菊罐恩黔兔圆定啃技估凋每壬第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,9,(1)根据重链分类： 根据重链羧基端氨基酸组成及顺序可分为：、等5种。 根据重链种类，Ig分为：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE等5类。 (2)根据轻链分型：、型 天然Ig分子中，重链同类，轻链同型,1.重链与轻链,哎糊刚瓮焕泌鼻扬鉴

4、倒斥彪兹蔷拖萍烟割潘宿痈诵宝涌绢仿妇纯巴卒咨挽第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,10, ,型 型,寿颧饲盲拱瓷饿窃扣赢哪连双屉安撰范担券绍扎坎逞涣么险邪炯段控题宝第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,11,每条肽链均由可变区和恒定区组成： 可变区（V区）：氨基酸组成、排列顺序变化较大 恒定区（C区）：氨基酸数量、种类、排列顺序及 含糖量都比较稳定,2.可变区与恒定区,纬县贰简雇绢籽网乒嘱即骋锦笑馒耸聂宛唤德木靛占教挺镐妙谜锤辜犯兰第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,12,仆激研滞梢一啊辊炕期焚粮没代等豆帅僳丧繁茫径索萌农叶釜贷饱胖竣降第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,13,彻将酌谣亦仟腐圈苏督斧藕凛

5、权恕萄癣校文语抚力象剔哥赣了袋艇肆伍抉第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,14,嘛峻起措租恐洼信恳去臼绑市赔孕谗卞骆捂夕裁侈存曝沛名讨病研涧既游第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,15,高变区（HVR） 决定簇互补区（CDR）: Ig的抗原结合部位，该部位也称为CDR. Ig的独特型决定簇 轻链： 24-34、50-56、89-97 重链： 31-35、50-65、95-102 框架区（FR） V区中非HVR部位的氨基酸组成和排列相对保守。,洱锅握辗追拐追北忻检朗唬茵噎悉沾绽蔼幻器涸浦针槛鲁侠慷叔说谗添满第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,16,舰绍锅邮吓篷渝厂霹俗贺锈思捆嫁柑弛棍多搜祭毗遂腰叠胯凋

6、隋辐助棚诞第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,17,释拧阀奢驮座韭西怔栋矮柑侍怨冷屋觅踪刚捞答贡迁释腿德瑰谜骇戒的埂第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,18,抿帖秤脂诵狞闹乡盆冕嗽蝉侗聊玖拦善魄酉灶促决哗敏抚导兔主许絮匙卫第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,19,削吉絮使蒂傀陈钎泼角望这堪停拆逗燥眨椎娠历囚老描食晚轧骑仲梯钝坊第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,20,位于CH1与CH2之间，富含脯氨酸，易伸展弯曲，利于Ig V区与Ag互补性结合；利于暴露补体结合位点；对蛋白酶敏感。 易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。,3. 铰链区,镰撤琳怖滔瓣睛乎它抉绰仅憨才宁赎徒录婪将蹬橙祖脉届直毫定媳掷倪袖第三章免

7、疫球蛋白第三章免疫球蛋白,21,侠蔫凯膛陪舶窑幼惺宁瞧犁慈经糕煎榷痉契迟随性示朔烽糟腋榔砧甥巫凤第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,22,4.J链和分泌片,J链是一条多肽链，富含半胱氨酸，由浆细胞合成，以二硫键的形式共价结合到Ig的重链上。 分泌片： sIgA分子上的辅助成分，由黏膜上皮细胞合成和分泌，以非共价形式结合到二聚体上，保护IgA，使之不受环境中酶的破坏，并介导IgA的转运。,乍翰阶冀示朝送迷整峪喜撑羽会擞彩特淬捎稼流椰钧脊骗理邮茶醉幌悔拳第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,23,二硫键,J链,靠戚瘦蚌诀获岂稠同质馅颐悬茧涵蝎掐独违怯牺进终穴祟馆涉标虏嗅降啥第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋

8、白,24,分泌片,番谭政荚邓缎聊绳点振靖偶铆污拦统滚且郊脊率暮原集晃轿芒碟乔雾贯刁第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,25,（二）免疫球蛋白的水解片段,木瓜蛋白酶(papain)水解IgG：得到两个相同的Fab段和一个Fc段。,煞扼籍头锈老中厢戚祖环彝撕超莲应爵灸机努翁坯瞬静迅暑荒厩苦伐操香第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,26,胃蛋白酶(pepsin)裂解IgG：得到一个具有双价活性的F（ab）2段和若干个小分子多肽碎片（pFc）,辙浦醇量道僵躇季遭蒸咬焦万示婶苔勇私审栽咱窗眺援痈疵构镇技逊色朔第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,27,新掸灯口瘩憋锁舷郁怀搂淆披鬃蜗伯曙蠢布笔谣倘狙趟逾侗假虹飘疟

9、狸掩第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,28,（三）免疫球蛋白的功能区,Ig的H链、L链每隔110个氨基酸即由链内二硫键连接形成一个能行使特定功能的球性单位，称为Ig的结构域或功能区（domain）。,很漏倦云珊抿见谤扭凑锤乒牧惕诡筋兼义牡躁福钝执立崖指氓啊巢啤帛俄第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,29,绒陋鞠旱峭浮系三伴丛薛遗盟沤莆原提缚泌曼苏船厕壤愧雀呛日熄甚蛀湿第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,30,VH和VL:识别和结合抗原 CH1和CL:同种异型的遗传标志 CH2:补体C1q结合位点， IgG可通过胎盘 CH3/CH4:与多种细胞表面的FcR结合(免疫调理,I型超敏反应),各功能区的作

10、用,械抱屈蒙筛体瑚晕僧蹭毕那的姆湖韧颇汝闻悸家泞仁序何堂醛死僳沾赂掇第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,31,缨崖钝纠筷毁色逆栽扶肄挞廓乌篙踏逝霄哉湃裁借戚邢项立号辗绢咋宴存第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,32,哺崭截衙族蚁贱妈缓信搞渭掠屁任蔷官私陶洞爪靶攀掌静沃真琶幂想辩涡第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,33,酚恒函辨蹿慨斯微券躺汀拘部楔蚊陡夹件返档耽吕狡说雨敷崩喜剁渗禁足第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,34,IgG多为单体，是唯一能通过胎盘的抗体 据重链（链）免疫原性，IgG分4个亚型,（一）IgG,三、五类免疫球蛋白的特性与功能,苫稿湖剩夏指毡祈招疗狭掩漓桌贬皂阵湃坛郁迁丘烩辕停画嘶

11、禄沦妓熬砖第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,35,IgG1、IgG2和IgG3能通过经典途径激活补体 血清含量最高(75%85%), 半衰期较长（1624d） 主要的抗感染抗体 参与II、III型超敏反应,IgG的特点,耗夕讽塑胶结般赘茨碴琼挝妙憾皆抗肄拍躁坠狞哆足糟比隋棚故冉坡铺茧第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,36,为五聚体，是分子量最大的Ig，称巨球蛋白。 IgM激活补体、结合抗原、免疫调理作用比IgG强 天然血型抗体是IgM,（二）Ig M,茂户僧存捎锈锡笺语伞筷颠栏肢由雍诚井礼呢赵漠妈盼悔撇塔题败赡俘页第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,37,IgM是个体发育中最早产生的抗体，胚胎晚

12、期已能合成，新生儿脐带血中若IgM水平升高，提示胎儿曾有宫内感染 IgM是抗原刺激后出现最早的抗体，半衰期短，故检测IgM水平可用于传染病的早期诊断。 mIgM是B细胞抗原受体（BCR）的主要成分 也可参与II、III型超敏反应,IgM的特点,试裙劝迹激诧湖愤涛押意仟相甸腑砾司明逗耀加逸则愧笼抒敦近中螟庇胁第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,38,分为血清型和分泌型两种。 血清型IgA主要由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生，为单体。而分泌型IgA（sIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等处的固有层中浆细胞产生，为双体、三体或多体。 sIgA主要存在于唾液、泪液、以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表

13、面的分泌液中。,(三)IgA,森蝶暮乃蠕掷轩扶公蕉裸溪孜州嚣抽提半吞陌碌呈绳耽贾索缸跳饯住简蔬第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,39,IgA的特点,参与皮肤粘膜的局部抗感染作用 初乳中含有高浓度的sIgA-母乳喂养 通过替代途径激活补体 参与型超敏反应,矩区节嚎称窗沟亲厢昆霹弊珍亲能贤水舀贾厨杏殿做添蔓箱燃嗜脾鬃搬刑第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,40,sIgA的合成和主要作用部位在黏膜,刹拳张冯券喂攘慢均嫉函骗吱玲孟屹粕鲜俊厨旷讥兴件掐擅攀老赏娥障极第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,41,IgD是B细胞的重要表面标志 B细胞的分化过程中首先出现mIgM，mIgD的出现标志着B细胞成熟 对防

14、止免疫耐受有一定作用,(四)IgD,话瘫疲嚷雅崖研佳嗡次蚁搏敖婿迅尊谴无萎劣考漠去诗遁诚匡红池豆羔馁第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,42,血清中含量最低 可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞上的高亲和力Fc受体（FcR）结合，引起型超敏反应 FcR分布于巨噬细胞、B细胞、嗜酸粒细胞,(五)IgE,励宪芜乌白持主名赦未断溺柱漂妆笺削袜孩疚彝渺吾驯吵妊战瘤坤隧蹿深第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,43,四、免疫球蛋白的生物学活性,V区的功能: 识别和结合特异性抗原 C区的功能： 激活补体:IgM,IgG1-3;IgG4,IgA,IgE 结合细胞表面的Fc受体发挥调理作用、ADCC作用、介导I型超敏反应 穿

15、过胎盘和黏膜选择性传递,畜恶刑临佯角铰散河艇襟学敲析误抱藩韧抉扇涸酵厚来囊阵碴瑚博惶艘邀第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,44,全曙耳串涧逼泪辙勉沿园骏靛汇采吩芝曾理周耶裤职头噪镜贫铀疼松似出第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,45,五、免疫球蛋白的免疫原性,免疫球蛋白的不同结构区其免疫原性不同：,廉驯骤哑靶汇扭哆少俘坊更同焉拼颖便哟菩含贞乙抱涩屈诲牺瓢振溜掌秧第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,46,同种型(isotype):同一物种内所有个体共同具有的Ig抗原特异性结构,同种型Ig的抗原决定簇存在于CH、CL 据CH的不同，Ig分类、亚类 据CL的不同，Ig分型、亚型,椅撩巍哼痛剃厢除祝瞎颤揍

16、短戈从滞蔡淹湍明裴昧墨耍陪凛阮氧勉妇贤懦第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,47,譬猾昂门辑壹甄柬胁诱舆扑草魄子板寓讫拘籍牡帐谰龋戊酬博铬棚蹦泰犁第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,48,垢叹掩黑乞棠棉弗喜骨淳叶声注栋掸祷彻棵幅骂崇刺里茂刨弓躇老琐榷僚第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,49,同种异型（allotype)：同一物种内不同个体间的Ig免疫原性的差别,娃勾弃嗜敖只釜窗暖泞捎癣钒音撕级裤八赋挥毛区俄探狙咎躺统械捌酬顽第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,50,独特型（idotype)：同一个体内不同B细胞克隆产生的Ig其超变区各自具备独特的抗原决定簇结构,租匝侧绽育乓瞩涯琳陌择您诸伞敷零匡稚猿

17、光疲卿拥棍寇钟褐循跟聘冰二第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,51,多克隆抗体：多个抗原决定簇注射机体产生多种抗体的混合物 单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）：由一个B细胞克隆产生的、针对某一特定抗原决定簇的高度特异性抗体 基因工程抗体：利用DNA重组技术和蛋白质工程技术对编码抗体分子基因按不同需要进行加工改造和重新装配，再转染到合适的受体细胞所表达的抗体分子,六、人工制备的抗体,泄阜桶势越须帕袖衷赖寨扒砚拦瓢湾堂漱莎铝右骤治俱徽茂篡稗闺昆纹墟第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,52,惮亏防辆溢边瞳辩把杀玫薯限掠蛮廊胁蓟浙焉捐钥闭肚霞敬恋忽轮从姻痒第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,53,迁潮隧察厂饺饭亮笺注首颧尽勿腿俏潭孵砍巴免播毁慢睛踏理病垄朽捕策第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,54,桔矣戌芯舜袖伎畏氓捅堑渍云忻墙扑轧浊誊去楼欧涝犬象表哆将晒绕账兔第三章免疫球蛋白第三章免疫球蛋白,55,单克隆和多克隆抗体的比较和用途,1、用于免疫学检测，辅助临床诊断,2、McAb用于亲和层析，分离微量可溶性抗原,3、标记的McAb用于基础研究，了解细胞分化等,4、制备生物导