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1、生物工程前沿讲义已上传至Ftp:/61/pub/生物讲义/生物工程前沿 目录下,可直接登录,无密码,欢迎大家下载。 Enjoy it by yourself!,酶的化学修饰,生物工程前沿,化学修饰的分类及意义 几种侧链基团的重要反应 化学修饰的定量处理 化学修饰应用举例,酶的化学修饰,化学修饰的作用,探测蛋白质必需基团的性质和数目 用于蛋白质纯度鉴定 用于蛋白质一级结构的测定 用于蛋白质分子构象变化及运动性,利用亲和标记探测活性部位局部构象变化 利用交联反应研究寡聚蛋白质亚基之间的排列及受体与激素的相互作用 蛋白质单晶的同晶置换: X晶体衍射 固定化酶 改造蛋白质的性质
2、,化学修饰的专一性,1.巯基的化学修饰,几种重要的化学修饰反应,2.二硫键的化学修饰,3.咪唑基的化学修饰,4.酚羟基的化学修饰,5.胍基的化学修饰,6.色氨酸吲哚基的化学修饰,7.甲硫醚基的化学修饰,8.氨基的化学修饰,9.羧基的化学修饰,化学修饰反应的定量处理,1.RayKoshland方法 2.Tsou作图法,化学修饰反应 的应用举例,ATP合成酶亚基排列的确定,酶活性部位构象变化的探测,1.荧光标记 在活性部位引入荧光发色基团 Zhou H M, Zhang X H, Yin Y, Tsou C L. Biochem J. 1993, 291:103107 2.自旋标记 在活性部位引入顺磁性探测基团 Liu Z J, Zhou J M. Biochem Biophys Acta, 199
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