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文档简介

1、背景资料,显微镜的发明和发展: 伽利略自己制造出了望远镜,也着手设计显微镜。并对小动物的感觉器官进行了观察。 真正用显微镜发现有机体内部世界的是马尔比基、列文虎克、胡克和斯旺麦丹。 1660年,马尔比基用显微镜发现了毛细血管,观察了许多动物呼吸系统,还发展了胚胎学研究。 1675年,列文虎克用自制的只有一个透镜的显微镜观察到了原生动物。他还最早发现了红血球的存在。1683年,他还发现了细菌。 1665年,物理学家胡克用自己制造了复式的显微镜,观察软木塞薄片,将软木上的那些小孔称为“细胞”。 电子显微镜是利用高速运动的电子束代替光波的一种显微镜。大大提高了显微镜的分辨本领,能观察物质极为微细的结

2、构形态。,显微镜技术,光学显微镜: -普通光学显微镜:分辨力0.2m,必须染色 -相差显微镜:利用细胞内非均一性造成的光相位差,将其转变为亮度差,可观察活细胞结构及其内部运动 -荧光显微镜:利用细胞内不同物质对紫外线产生不同颜色荧光的现象,可利用荧光染料 -暗视野显微镜:利用侧向斜射光线,使之在物体上散射进入物镜,可提高显微镜的分辨力达到0.20.04 m -偏光显微镜:利用偏振光对一定方向的物体照明,可观察丝状标本的细微结构和鉴别细胞中化学成分,显微镜技术(2),电子显微镜 扫描电子显微镜:电子枪产生的电子在电磁透镜中汇聚成电子束,由扫描线圈控制扫描样品表面,分辨力610nm,立体感强,样品

3、可移动,便于多向观察 透射电子显微镜:分辨力0.20.25nm(见P11图) 超高压电子显微镜:电子束电压500V,穿透力强,分辨力高可观察较厚样品 扫描隧道电子显微镜:利用真空隧道中的量子现象,显示物体表面的原子结构,了解显微镜 的基本结构,1,10,11,4,2,3,7,6,9,8,5,目镜,物镜,镜筒,镜臂,镜座,载物台,压片夹,反光镜,遮光器,粗准焦螺旋,细准焦螺旋,转换器,12,安装 装配适当的物镜和目镜。 低倍镜的使用 必须先用低倍镜,视野大,容易发现目标和确定观察部位。 (1)检查 有无损坏。 (2)准备 前方略偏左侧。将载物台下降。再旋转物镜转换器,将低倍镜对准载物台中央的通光

4、孔(可听到“咔哒”声)。 (3)对光 打开光圈,上升聚光器;用内置光源时,使用光亮调节器调光。 (4)放标本片 标本片的盖片朝上,观察部分对准光孔的正中央。 (5)调节焦距 侧面注视物镜镜头,粗调节钮,镜台上升,低倍镜头与玻片间的距离约5mm,从目镜里观察视野,左手慢慢转动粗调节钮,镜台缓缓下降,视野中出现物像。细调节钮至物像清晰。 (6)计算倍数,显微镜的安装和使用,高倍镜的用法,(1)低倍镜找到清晰物像。 (2)将需要观察的部分移到视野的中央。 (3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜。 (4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰的物像为止。,油镜的使用

5、方法,(1) 先用低倍物镜观察标本的概况。 (2) 更换高倍物镜,视野中央。 (3) 镜台缓缓下降约1.5 cm,再把油镜转到工作位置。 (4) 在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油,细心拧动粗调螺旋,使镜台上升。从侧面观察物镜前端与标本的距离,油滴接触,慢慢提升镜台,至物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏油镜(油镜的工作距离约0.2 mm)。 (5) 眼睛从目镜中观察,拧动细调螺旋,使镜台慢慢下降到能看清标本。这步操作要特别注意不要把细调螺旋的方向拧错,以防压碎标本。 (6) 观察完毕后,下降镜台约1 cm,把油镜转离光轴,及时清洁。擦镜纸擦12次,

6、去油,二甲苯滴湿的擦镜纸擦2次,擦镜纸擦1次。顺镜头直径方向,不圆周擦。 (7) 复原 聚光器下降约1 cm 。把物镜转离光轴。下降载物台,载物台上标本移动器移到适当位置,关闭内置光源。,是低倍镜还是高倍镜的视野大、视野明亮?为什么? 低倍镜的视野大,通过的光多,教亮,放大的倍数小; 高倍镜的视野小,通过的光少,较暗,放大的倍数大。 为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察? 如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。 用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺

7、旋行不行? 不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。 如何判断细胞和气泡?,(一)显微镜的使用 1. 观察前的准备工作 (1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双 眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。 (2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。 (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整 和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透 镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。,瞳 距 调 节,2. 显微镜的调节,屈 光 度 调 节,粗 调 松 紧 调 节 旋 钮,聚 光 镜 中 心 调 节,孔径光栏调节,N.A聚=(0.6-0.8)N.A

8、物,操作步骤如下: (1)可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水平是固定的,则装配时已保证它与聚光镜合轴,不必调整;如果可变光栏的水平位置可以移动,则应把可变光栏关到最小,使它的中心孔对准聚光镜下方的透镜中心。 (2)载物台上放置观察标本,把聚光器上升到它上端透镜平面稍低于载物台平面的高度,并将它的可变光栏开到最大,用低倍物镜,进行调焦到能看见标本,可调反射镜使视野得到最亮和最均匀 的照明,或把光栏关小,最亮的照明区正处在视野的中央。 (3)转到高倍镜,并调焦到看清标本,然后去掉标本,拔出目镜,眼睛直接向镜筒观察,并把可变 光栏关小,看其亮点是否在视野中心,如果不是,就要转动聚光器的

9、调节螺旋,把亮点调到视野中 央,再慢慢开启可变光栏,使视野看到光栏边缘和聚光镜的边缘相接为止。,3. 观察操作: (1) 低、高倍镜的使用: 先把低倍的物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片0.5cm处,然后一边观察视野一边上升物镜,直至看到图像,再将标本移到视野中心,用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处,若要用高倍镜观察时,把所要进一步放大观察的部位移至视野中央,直接顺时针转换成高倍物镜,然后用细调焦螺旋调焦,至看清物像。,其他常用的探究器具,观察器具:放大镜等,其他常用的探究器具,解剖工具: 解剖盘 解剖剪 镊 子 刀 片,其他常用的探究器具,计量器具: 量筒 天平,其他常用的探究器具,加热器具: 酒精灯 三脚架 石棉网,其他常用的探究器具,通用器具: 烧杯 试管 试剂瓶 培养皿 研钵 滴管 药匙,使用常用探究器具注意事项,1、要注意安全,不要用手触摸刀口,也不要碰到他人; 2、不要用手直接接触被称量的物体; 3、加热时,不要离开加热装置,加热结束后要及时、正确地切断热源,不要用手直接接触被加热的玻璃器具。; 4、实验结束后,要及时作清理工作。,临时装片的制作,玻片标本,按保存时间长短 临时玻片标本 永久玻片标本,按取材方式 切片 涂片 装片,制作临时装片时,取了材料再滴清

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