第十九章 平面色谱法1.ppt

1、，第19章平面色谱(planar Chromatography)，版权所有：新乡医学院基础医学院化学研究室版权所有2007 Xinxiang Medical college . all Rights Reserved。通过掌握演讲333吸附剂和展示剂的选择和性质，掌握薄层色谱法的定性和定量分析方法，掌握纸色谱的基本原理，掌握平面色谱分类和色谱参数，掌握高效薄层色谱法和薄层扫描法，平面色谱法：在组以平面为载体的固定相和流动相之间平衡或分配的色谱方法。优点：操作简单，分析速度快，结果直观，辨别力高，仪器便宜。应用：定性分析、定量分析。第一节平面色谱的分类和原理，第一节平面色谱的分类，薄层色谱(TL

2、C)，纸色谱(PC)，薄层电泳(TLE)，比值Rf:Rf值是分离组的特性常数，与固定相、流动相、运行条件相关。同一物质在不同的展开方式下得到的比例转移值不同。相对迁移值Rr:参考物是样品中的成分，也可能是单独添加的物质。Rr值可以大于1或小于1。Rr值可消除由于操作条件不同而产生的错误。设定，-，-，- 1-R在单位时间内一个分子在固定上出现的概率。保留率，当Rf为1时，k0表示固定上没有保留。如果Rf等于0，则K变为无穷大，表明该组保持完全固定。不同成分，不同k，不同Rf；测量Rf，知道Vm/Vs，就可以测量K。实验条件固定，Vs和Vm固定，Rf由K确定，K仅限于组属性。也就是说，Rf仅由组

3、属性确定，因此Rf是定性参数，2 .K，K和Rf的关系，(3)面效果参数，1。理论托盘数为n，2。W1W2、W1W2、A、B、D、平面色谱分离度图，TLC是将固定床平铺在玻璃板、塑料、铝等光泽表面，从而从这些薄层板中分离光谱的方法。第二节薄层色谱法(thin layer chromatography，TLC)通过比较用适当对照物等方法获得的色谱，可以测定药品的鉴别、杂质检验或含量。A B，UV，展开，分离力强，斑点集中灵敏度高，短样品预处理简单，操作方便，特点：1，薄层色谱的主要类型，(1)吸附薄层色谱常用固定相：硅：硅H、硅G、硅GF254氧化铝：氧化铝G、氧化铝H、氧化铝HF254聚酰胺等

4、，(1)吸附剂，1。硅，吸附力取决于硅基数，吸附活性取决于含水量。活性等级越高，水分量越大，吸附力越小，活性越小，活性等级为2。氧化铝在氢氧化铝高温下脱水。具有分离能力强，活性能控制等优点。根据制备条件，分为酸性中性碱性氧化铝。利用acidic :-al-oh中性：-al-oh-al-o-basic 3360-al-o酰胺基和化合物质子形成氢键，引起吸附。，3 .聚酰亚胺，吸附剂选择的基本原则：分离弱极性物质，一般使用活性强的吸附剂。分离强极性物质，一般使用活性弱的吸附剂。(b)助推器，常用流动相极性顺序：水；甲醇；乙醇；丙酮；乙酸正丁醇；三氯甲烷醚；苯；四氯化碳；环己烷；石油醚；流动相：单，

5、二元；多元助推器；选择原则：综合考虑分离成分的特性；增压极性；吸附剂活性，(1)薄层板的制备、软板、硬板、烧结玻璃板的制备：薄层板的选择薄层板的涂层薄层板的激活，3、薄层色操作方法，固定相厚度可根据常量的要求确定。越厚，容量越大，但分离效率越低。(b)点样、手动点样、将样品溶液滴在薄层上的操作；溶解样品的溶剂，点样品量，正确的点样品方法。自动点样计，(3)展开和展示剂的流速，1。展示剂的流速，经典TLC的流动相驱动力只是吸附剂的摩西作用。显然，用粗颗粒制成的薄板，展示剂的移动速度更快。颗粒均匀致密的薄层板，展示剂的移动速度慢。2 .展开，单向线性展开，双向线性展开，环形展开，中心展开，多次展开

6、，薄层的两边固定相为12厘米；刮牙。特别是使用狭窄的扩展室。消除方法：(4)斑点的测定，生物本身现象：光学检测方法：组本身有颜色或荧光(紫外线下观察)，蒸汽发色法：样品和一些物质的蒸汽产生斑点或产生荧光。试剂显色法：选择适当的显色剂，定性方法，斑点Rf和Rr值，显色特性，位置扫描，联合技术，4，定性和定量分析，(杂质比较品比较法2。主成分，1。溶利法样品通过薄层色谱分离，收集样品斑点上的吸附剂，用溶剂去除斑点的成分，然后用适当的方法定量测定。3 .薄层扫描法，5，高效薄层色谱法(HPTLC)，高效薄层色谱法是以薄层色谱为基础，用更细、均匀(粒度57m)吸附剂制成的薄层，是分离复杂物质的有效方法

7、之一。two-dimension HP TLC high-performance thin layer chromato graph y，c/m/NH 3 953360533600.8，c/a/m/m : chh；A: CH3COCH3，类固醇1。proge ster one 2.11-deoxycorticosterone 3.11-dehydrocorticosterone 4。estrone 5。estrasiol6 Ticosterone，(1)薄层色谱扫描法的基本原理是用一定强度的波长的光照射从薄层板上分离的成分的斑点，斑点测量光吸收的强度或释放荧光强度的定量分析方法。6，介绍薄层扫

8、描法，波长和基准波长选择测量波长：测量成分的最大吸收波长；基准波长：吸收棒靠近基准的波长。薄层扫描方法透射率空薄层透射率：T0i0/I0斑点透射率：Ti/I0测试组斑点吸光度：Alg(T/T0)=(T0/T)；特性：光强度大，但受薄层厚度、均匀性的影响；以及，选择散射参数非线性关系校正适当的散射参数定量分析方法外表1点法外表2点法，样品分析，饮料中咖啡因的测定谱，咖啡因信号为23.2 mm。正常是色谱，旁边是咖啡因的色谱。定性鉴定样品用量少，分离方便，分离时间短，检出灵敏度高。药品的质量控制及杂质检验，化学反应过程的控制，反应副产品的出库，中间体的分析。柱层析分离条件探索，7，薄层色谱的应用及

9、实例，硝基该隐，普鲁卡因，还原，测定合成反应的进展程度，1 2 3 4，硫酸根的杂质检查(中国药典2000版第2部分)，特殊杂质：是指在该药的生产或储存过程中，根据药物的性质、生产方法和工艺条件可以引入的杂质。也就是说，一般杂质是其他药物所共有的。不同的药物有不同的特殊杂质。我国药典2005年版中薄层色谱鉴别法1523段。我国药典2005年版中薄层色谱鉴别法1523段。1 .杂质对照品法适用于已知杂质和有杂质对照品的情况。方法根据杂质限制，将原型溶液和一定浓度的杂质对照品溶液分别在同一个薄层板上展开，定位，然后检查。药品中特殊杂质的检查，杂质的结构不确定或没有杂质的情况下，2 .试件自对比法(高低浓