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文档简介
1、实验一、几种光学显微镜的使用,一、实验目的:,了解几种光学显微镜的结构、使用方法、工作原理等。 掌握使用普通光学显微镜提高分辨率的方法。,二、实验原理,1、基本原理,一般光学显微镜主要是由目镜、物镜、聚光器以及反光镜等构成。 各种光学显微镜的放大原理基本相同,各种特殊用途的显微镜只是在主要器件上进行了稍微改动而已。,2、几种光学显微镜,1、普通复式光学显微镜:其重要的性能参数是分辨率。,2、暗视野显微镜:具有特殊的聚光器。光源中心束不直入物镜,所以视野灰暗。而被检测细胞由于光的衍射及反射而较亮,3、相差显微镜:利用光的干涉原理。在物镜与聚光器上做了改动。把肉眼看不见的相位差改为可见的振幅差,使
2、人能够看清楚。 4、荧光显微镜:是在光镜水平上对细胞内特异的蛋白质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定位研究的有利工具。,普通复氏显微镜,暗视野显微镜,相差显微镜,荧光显微镜,3、如何提高显微镜分辨率,1、数片孔径:孔径愈大,显微镜能力俞强。 2、分辨率:分辨率以分辨俩点之间的最小距离表示。目镜与显微镜的分辨率无关,物镜的分辨率即为显微镜的分辨率,照明光线波长越短,物镜的数值孔径越大显微镜的分辨率的越大。 3、放大率:总放大率超过物镜数值孔径的1000倍时,细微结构分辨不清,为空的放大, 低于500倍时由于放大率过低,肉眼难以分辨。 4、焦点深度:焦深加大,总放大率提高。,三、实验器材,观察材料(草履虫,洋葱内表皮,紫鸭趾草等花粉,菠菜叶),普通光学显微镜,暗视野显微镜,相差显微镜,荧光显微镜,载玻片,盖玻片,吸管,镊子,剪刀等。,四、实验方法,1观察草履虫的外形、运动、纤毛、食物泡等。取少许棉花纤维或擦镜纸纤维,放于载玻片上,在其上滴一滴草履虫悬液,然后加盖玻片观察。 2洋葱表皮细胞和菠菜叶的细胞核、叶绿体的观察在载玻片上滴一滴水,撕洋葱鳞茎内表皮或菠菜下表皮一小块放于其中,使其展开,然后加盖玻片观察。 3紫鸭趾草花
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