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文档简介

1、间接凝集反应,基本概念,凝集反应：颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应抗体在一定电解质存在的条件下发生特异性结合并出现肉眼可见的凝集块的现象。 分类：一种是颗粒性抗原与抗体直接结合出现的凝集现象，称为直接凝集反应；另一种是将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的载体颗粒表面，再与相应的抗体结合而出现的凝集反应，称为间接凝集反应。根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应的方式，间接凝集反应又可以分为正向间接凝集反应，反向间接凝集反应，间接凝集抑制反应和协同凝集反应。,基本概念,常用的载体颗粒有人 O 型红细胞、绵羊红细胞、乳胶颗粒等。如载体颗粒是红细胞，称间接血凝试验；若为乳胶颗粒，则称为乳胶凝集试验；若

2、为明胶颗粒则为明胶凝集试验。,间接凝集反应的分类,1 （正向）间接凝集反应 抗原致敏载体检测抗体 2 反向间接凝集反应 抗体致敏载体检测抗原 3 间接凝集抑制试验 抗原(抗体)致敏的颗粒载体及相应的抗体（抗原），检测标本中是否存在与致敏抗原（抗体）相同的抗原（ 抗体） 4 协同凝集反应 载体为金葡菌 A蛋白（反向）,应用,适用于各种抗体和可溶性抗原的检测，敏感度高于沉淀反应，在临床检验中广泛应用,类风湿因子（RF）诊断,实验原理 RF是一种抗变性IgG的抗体。聚苯乙烯胶乳颗粒具有很强的吸附蛋白质的能力，借此将抗原（IgG）与胶乳颗粒结合成致敏颗粒，直接与待测标本中的抗体（RF）发生凝集反应。,

3、试剂和器材,1 人IgG致敏胶乳试剂 类风湿因子检测试剂盒。 2类风湿因子阳性血清和阴性血清。 3加样枪，黑色方格反应板，牙签等。,操作方法,1 用加样枪吸取阳性血清、阴性血清50L，然后加入人IgG致敏的胶乳试剂1滴。 2 在反应板上用牙签充分混匀后，连续摇动2-3min后，观察比较结果。,结果判断,胶乳颗粒凝集且液体澄清者为阳性反应；胶乳颗粒不凝集仍保持均匀胶乳状者为阴性反应。,实验讨论,1胶乳凝集试验方法简便快速，但易发生非特异凝集反应，试分析如何判定实验的非特异凝集反应？ 2利用本法是否可以进行定量或半定量分析？如何进行？ 3发生凝集或凝集程度是否都是目测得出的结果，是否还有其他测定凝集发生或凝集程度的方法？,1.利用间接凝集抑制试验可以确证呈阳性反应的间接凝集试验是否是非特异凝集反应。以本次试验检测的RF为例：首先用待测血清与IgG反应，再加入RF致敏的胶乳颗粒，如果出现凝集则说明间接凝集为非特异凝集（待测血清中无RF）；反之为特异凝集。,2.利用胶乳凝集实验可进行半定量分析。检测试剂盒具有一个检测灵敏度。如CRP检测试剂盒，其校正灵敏度为 6mg/L,超过上述含量即出现肉眼可见的凝集颗粒。据此可将待检血清进行倍比稀释来进行半定量分析。如稀释两倍后阳性，则浓度 12mg

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