第三章实验室生物安全

1、、微生物学检查、第三章实验室生物安全、本章内容、学习目的、学习目的：1.掌握：实验室生物安全和实验室生物安全保障的概念BSL-2实验室安全操作技术规范BSL-1、BSL-2在安全设备、个体保护方面有所不同。 2 .熟悉：致病微生物危害程度分类等级和实验室生物安全防护水平分类感染性物质的操作与处理。 3 .理解：临床微生物实验室的版结构、设置和建设要求。 本章重点：实验室生物安全概念、BSL-2实验室生物安全设备要求、实验室分布及安全防护措施。 实验室生物安全防护水平的等级。 感染性物质的操作和处理。 第一节实验室生物安全概述，一、实验室生物安全与保障，(一)实验室生物安全的概念和防护措施，一实

2、验室生物安全的概念：实验室生物安全是防止实验室中病原体和毒素意外暴露和释放的防护原则、技术和实践。 第一节实验室生物安全概要、安全设备和个人保护、(1)实验室生物安全的概念和保护措施、2实验室生物安全保护措施、实验室设施修订和建设、实验室生物安全管理规章制度、安全操作规章、生物安全柜、第一节实验室生物安全概要、1 .概念：单位和个人2 .措施：病原体和毒素的储存位置、接触人员资料； 使用记录、运输记录、材料失活和/或处置等情况的最新调查结果知情人员的作用和责任根据需要由公共卫生与安全保障管理部门调查并纠正发生违反安全保障事件时的干预程度、作用和责任等违反行为。 (二)实验室生物安全保障的概念和

3、措施，二、进行微生物危害评价微生物危害度评价的最有用工具之一是列举微生物的危险度等级。 根据需要，还必须考虑致病微生物的致病性和感染量暴露的潜在结果自然传播途径实验室操作对其他传染途径致病微生物环境的稳定性第一节实验室生物安全的概述， 从操作致病微生物浓度致病微生物的宿主动物研究和实验室感染报告或临床报告获得的信息能否扩大预定实验操作(超声处理、离心等)微生物的宿主范围，改变对致病微生物已知有效治疗方案的易感性，在所有基因技术现场有效地防治。 第一节实验室生物安全概要、三、致病微生物的分类管理、第一节实验室生物安全概要、国内外致病微生物危害程度分类比较、管理条例通用要求WHO安全手册、第一节实

4、验室生物安全概要、管理条例通用要求WHO安全手册、第一节实验室生物安全概要、 管理条例通用要求WHO安全手册第一节实验室生物安全概要，四、实验室生物安全的重要意义，第一节实验室生物安全概要，致病微生物研究安全平台需要建构生物保护(防卫) 的需要出入境检验检疫的需要动物防疫的需要医院感染控制特罗尔的需要GOARN监测环形网络不离开生物安全实验室第二节生物安全实验室和设备的要求，一、实验室生物安全防护水平等级实验室生物安全通用要求(GB19489-2008 ) 根据生物安全实验室操作的生物因子危害程度和采集的防护措施，将生物安全实验室生物安全防护水平分为4级。 第二节生物安全实验室和设备要求，一、

5、实验室生物安全防护水平等级、对应致病微生物危害水平的生物安全水平、实验室类型、实验室操作及主要安全设备要求。第二节生物安全实验室和设备要求，1 .清洁区：未经致病微生物污染的区域，包括办公室、休息室、培养基配制室和试剂储藏室等，该区域禁止携带细菌检验标本。 2 .半污染区：可能被致病微生物污染的区域，如缓冲室、工作服装存放室、走廊等。 3、污染区(操作区):在受致病微生物污染的区域，收集临床标本，并用于接种、分离培养、鉴定和药敏试验及结果报告等工作。 (1)临床微生物实验室版结构，二、临床微生物实验室版结构和基本要求，第二节生物安全实验室和设备要求，1BSL-1和BSL-2实验室设置修订的安全

6、原则应考虑在设置修订实验室时可能引起实验室安全问题的情况。 主要是气溶胶传播形成处理高浓度微生物节脚丫子动物和啮齿动物入侵仪器设备过多，不行政许可过度拥挤的知情人员进入实验室的特殊样品和试剂使用工作流程，(二)实验室建设修订和建设的特殊要求，第二节生物安全实验室和设备要求， 2BSL-1的修订和建设要求无需特别选择出口附近的实验室应设置的墙壁、天花板和地面平坦的实验台是防水的，耐腐蚀、耐热实验室的柜台和实验台如果有坚固的实验室打开的窗户，设置网门在实验室的工作场所外保管大衣和私人物品的设施的实验室的门就可以进出进入实验室保证作业照明，避免不必要的反射和强光(二)实验室建设和建设的特殊要求，第二

7、节生物安全实验室和设备要求，3BSL-2的建设和建设要求除了BSL-1实验室建设和建设要求外，高压灭菌器安全系统除了消防、应急供电、 洗眼器和应急淋浴装置实验室门应包括实验室门在窗实验室出口不需要发光指示标志特殊通风设备，可以取窗自然通风，云同步装有纱窗，有易于使用、可靠、一盏茶的供电和紧急照明，(2)实验室修建和建设的特殊要求， 第二节生物安全实验室和设备要求，第一节生物安全水平实验室形象第二级生物安全水平实验室形象，BSL-1实验室和BSL-2实验室安全设备和个人保护要求的区别：三、安全设备和个人保护，第二节生物安全实验室和设备要求，第三节生物安全实验室操作技术规范，一、实验室准入要求1

8、.非员工的实践观察学习实验室等特殊情况，请在得到实验室负责人的批准后再进入。 2 .实验室的门应保持关闭状态。 3.BSL-2实验室门口应贴国际通用生物危害预警标识牌，在其下标明实验室生物安全等级、实验室名称、负责人姓名和联络人电话等有关信息4 .进入动物实验室须获得特殊行政许可，禁止将无关动物带入实验室。 第三节生物安全实验室操作技术规范，二、实验室操作要求1 .所有实验操作应尽可能减少微小液滴和气溶胶传播的产生。 2 .禁止用移液器吸取液体，舔标签条。 3 .必须限制皮下注射针和注射器的使用。 4 .尽量使用一次性物品注射器，禁止使用的针尖弯曲、切断、折断、再盖上，禁止用手从注射器上取下针

9、尖。 用过的针必须放入防止贯通用的尖溜溜器箱中。 非一次性物品的刀具必须放入尖溜溜器箱，运送到特定的区域进行高压灭菌。 5 .禁止用手处理打碎的玻璃器具。 装有污染针、刀具、破碎玻璃的容器在废弃前需要高压灭菌。 第三节生物安全实验室操作技术规范，二、实验室操作要求6 .实验室应当制定并严格执行处理向上溢出物的标准操作规程。7、感染性试验材料与动物及其他有害物质处理后，在脱手套后及离开实验室前，应洗手。 禁止在实验室工作场所饮食、饮用水、吸烟、处理联系性镜片、化妆及贮藏食品。 9 .每天工作结束后必须消毒桌面，有潜在危害性的材料洒落后必须随时消毒。 第三节生物安全实验室操作技术规范，二、实验室操

10、作要求10 .所有培养物、废弃物在商品发货实验室前必须进行高压灭菌。 在运出实验室灭菌的物品，必须放入专用的密闭防漏的容器中保管、输送。 11 .只有保证实验室的文件没有被污染，才能带出实验室。 12、将生物安全计程仪程序列入标准操作规范或生物安全手册，由实验室责任者专门保管，职工在进入实验室前必须阅读规范，并按照规范操作。 13 .工作人员应接受有关潜在危险知识的培训，掌握暴露及暴露预防后的处理程序。 你必须每年接受最新的训练。 第三节生物安全实验室的操作技术规范、三、感染性物质的操作与处理(一)感染性物质的操作1 .标本采集：由掌握有关职业知识与操作技能的工作人员采集，根据采集的标本可能含

11、有致病微生物的危害程度采取相应的个人保护。 2 .标本的运送：采集的标本必须在医疗机构内运送，避免污染职工、患者和环境。 第三节生物安全实验室的操作技术规范，(一)感染性物质的操作3 .标本的接纳与开放：接纳大量标本的实验室应设置专门的房间或空间。 标本的内层容器请在生物安全柜内打开，准备好消毒剂。 第三节生物安全实验室的操作技术规范；(1)感染性物质的操作4 .血清分离：操作时应戴手套，注意眼睛和黏膜的防护。 5 .感染性物质冷冻干燥管的开放和储藏：冷冻干燥管的开放在生物安全罐进行。 首先漂亮地外表面，在管子上沾上接近棉或纤维塞的中央部锉纹，用浸在酒精中的棉包裹管子保护双手，然后从锉纹处打开

12、。 小心清除上部，用污染物处理。 将液体慢慢放入软管中，悬挂冷冻干燥物，以免冒泡。 第三节生物安全实验室的操作技术规范，(二)暴露处理1尖溜溜器和其他损伤：伤员应立即停止工作，脱掉防护服清洗双手和受伤部位，有伤口时，在伤口旁边轻轻按压，尽量挤出损伤部位的血液，用洗手液和流动水冲洗， 必须禁止伤口局部挤出的伤口清洗后，用皮肤消毒剂如75%乙醇或0.5%碘伏消毒，必要时记录经医学处理的受伤原因及相关微生物，应保留完整的医疗记录。 第三节生物安全实验室的操作技术规范，(二)暴露处理2潜在感染性物质的进食：应立即脱防护服进行医学处理，报告进食材料的特性和暴露的详细情况，并保留完整的医疗记录。 3释放潜

13、在危险性气溶胶传播：全体人员应立即撤出现场，及时通知实验室责任者和生物安全责任者，暴露者应接受医学咨询。 贴上“禁止进入”的标记，排出气溶胶传播，粒子沉降(约1小时)后进入。 去除污染时，请穿戴适当的防护设备。 第三节生物安全实验室的操作技术规范，(二)暴露处理4 .潜在感染性物质溢出：溢出处理者必须戴防护服，戴手套，必要时保护脸部和眼睛。 首先用布或纸巾，从外周到中心注入消毒剂，经一定时间(一炷香)作用后，去掉布、纸巾和破损品，玻璃东鳞西爪用大头针定径套和硬纸板等工具去掉，放入尖溜溜器箱，直接用手不要撕破皮肤。 再用消毒剂擦去污染区域。清扫时使用的布、纸巾、抹布和厚纸放入装有污染性废弃物的容

14、器，复印污染文件(包括记录)后，将原件放入装有污染性废弃物的容器。 第三节生物安全实验室的操作技术规范；(二)暴露处理5离心管破碎：运行中非封闭离心槽的离心管内潜在感染性物质破裂时，切断机械电源，停止后密闭一炷香间离心槽，气溶胶传播沉降后再打开盖子。 离心机停止时发现离心管破碎的情况下，请立即盖上离心机，密闭30分钟。 之后的操作都要戴上结实的手套。 将玻璃东鳞西爪用大头针定径套等工具清除，破碎的离心管、玻璃东鳞西爪、离心槽、十字轴和转子均无腐食性，装入已知相关微生物具有杀菌活性的消毒剂中消毒30分钟。 未破损的带盖离心管请放入装有消毒剂的其他容器中回收。 离心机内腔用适当浓度的同种消毒剂反复擦拭后，水洗干燥。 第三节生物安全实验室的操作技术规范；(三)感染性物质的输送、感染性物质的输送要求由内层、中层、外层三层包装。 第三节生物安全实验室操作技术规范、(4)感染性废弃物的处理、感染性废弃物处理的第一原则应当在实验室内去除污染处理。 高压蒸汽灭菌是清除污染的最佳方法。 感染性废弃物全部放进能够高压灭菌的黄色塑料包装袋，放入防泄漏容器进行高压灭菌后，