如何撰写国家自然科学基金申请书.ppt

1、国家自然科学基金申请书的填写方法，李明涛中山大学蛋白质组织学中心中山大学中山医科大学，基金殷铁生，填写选拔申请书的答复，申请的填写是成功申请的关键心情，良好的身体好想法重写3h/1阅读指南，熟悉阅读通知截止期限，殷铁生过程，相关规定阅读表，阅读高手，同行阅读，自我选择卖点细胞凋亡时，SP1对BH3-only蛋白Bim的转录控制神经元凋亡时，SP1对BH3-only蛋白Bim的转录控制SP1对BH3-only蛋白Bim的转录控制SP1对神经元凋亡的调节关键字：SP1/Bim工作基础继续，没有深入发表和发表的革新2。科学问题很重要！不可或缺的渡边杏！适当的3。前期实验“问题”的前期实验结果4。工作

2、假设思想性，革新5。主要方法可靠性第一先进性第二6。研究目标明确，具体7。研究的意义理论性和应用性，神经元凋亡时SP1对BH3-only蛋白Bim的转录调控，我们证明了撤退，那么Bim向上调节的转录机制是什么呢？启动子5端序列连续还原分析建立了诱导Bim表达的启动子核心区域，发现典型转录因子SP1结合序列在其中。进一步的实验表明，当神经元凋亡时，SP1被激活。负显式SP1和SP1-DNA结合抑制剂mithramycin A抑制Bim上调和神经元凋亡。因此，我们首次提出了提高Bim的新机制。也就是说，当神经元凋亡时，转录因子SP1被激活，激活的SP1直接调节Bim的诱导表达。本项目旨在通过采用腺

3、病毒表达技术和启动点突变、EMSA和CHIP方法，获得SP1可以直接控制Bim基因的确凿证据。本项目将阐明SP1对凋亡蛋白Bim的调节作用和机制，并为将SP1确立为神经退行性疾病治疗的新目标提供更充分的科学依据。、50%的文笔流畅，层次分明，逻辑强。2.列举事实，理我所能做的理由(不是别人)的原因，意义，思想性，摘要呼应3研究内容，研究目标和要解决的核心问题，要求：明确、具体地解决学术问题，与题目相对应。神经元凋亡时，SP1对BH3-only蛋白BIM的转录调控，目的是获得SP1直接调控Bim基因表达的确凿证据，揭示凋亡蛋白Bim由SP1调控的新机制，将SP1确立为神经退行性疾病。研究目标，研

4、究内容(紧密围绕研究目标)1。为了证明BIM启动子核心区域的SP1结合序列是否诱导BIM基因的增加，为了确定BIM启动子核心区域的SP1结合序列是否诱导BIM基因的增加，使SP1结合序列稍微突变，不能与SP1结合。判断该突变能否消除BIM启动子的钾撤离反应。2.SP1与BIM子核心区域的SP1结合序列一起应用电子移动空间(EMSA)技术，分析BIM子核心区域的SP1结合序列是否可以与SP1结合。通过使用chip(Chromatin Immuno Precipitation)方法，可以获得SP1和BIM子核心区域在细胞内结合的证据。3.在BIM的mRNA和蛋白质水平上，观察负显性SP1是否能撤回

5、钾诱导的BIM基因的印象粒子，传播到CGNs的感染率为0.1 1.0%，腺病毒感染率为7080%。因此，通过构建dnSP1的腺病毒载体Ad-dnSP1，可以可靠地分析BIM中mRNA和蛋白质表达水平的变化，从而感染CGNs。4.分析了SP1诱导BIM的机制对神经元凋亡的调节作用，建立了SP1激活Bim的机制，然后进一步分析了该机制对神经元凋亡的调节作用。需要解决的主要问题为SP1直接控制BIM基因表达提供了可靠的依据。重要的问题是什么？在研究过程中，对达到预期目标有重要影响的一些研究内容或因素。为了达到期望的目标而必须掌握的核心技术或研究手段。制定要求：确定主要问题，明确问题，透彻分析，合理解

6、决方案。前提是研究方案项目要求；可靠性第一、先进性第二参考文献没有主张对主要技术的说明使用流程图，建议：“方法、技术途径、实验手段、主要技术的概述如下。”，可行性分析是从学术思维的角度提出的。1.工作基础(学术思想)2。科学研究阶段3。实验条件4。实验技术5。交流与合作思想创新是新理论、新方法、新体系、新规律的源泉创新：原始性的唯一性袁泉：进一步的发展前景、革新、这个项目的特点和创新：申请人第一次凋亡时，依赖凋亡蛋白质Bim的上调，这是JNK/c-Jun途径(Leyu Shi，Leyu)(Neurosci Lett .2005)观察表明，PI3K/Akt/FKHRL1信号路径也不参与BIM提升

7、(请参阅入港标准)。Bim向上调整的转录机制是什么？我们首先对BIM启动子进行了5末连续减法分析，建立了诱导BIM表达的启动子核心区域，发现典型转录因子SP1结合序列在其中。(莎士比亚，北方表达式，成功)额外的实验表明，当神经元枯萎时，SP1会被激活。负显性SP1突变和SP1-DNA结合抑制剂mithramycin A抑制BIM的上升。根据上述生物信息学分析和实验观察，我们首次提出了一种新的BIM转录机制：SP1介导的BIM上调。也就是说，当神经元凋亡时，转录因子SP1激活，激活的SP1与BIM子核心区域的SP1结合，转录激活BIM的表达。本项目计划进一步采用负显式SP1突变的腺病毒表达技术和

8、启动点突变、EMSA、CHIP方法。目的获得SP1直接控制BIM基因的确凿证据。明确SP1对凋亡蛋白Bim的调节作用和机制，为进一步确立SP1作为神经退行性疾病治疗的新目标提供了更充分的科学依据。，2.Bim转录机制的前期工作我们报道了第一次神经元凋亡时JNK/c-Jun没有参与BIM的向上调整，接着提出了PI3K/Akt/FKHRL1也没有诱导BIM向上调整的确凿证据。这些研究改变了过去的观点，也是本项目的重要入港基础之一。3 .Bim启动子核心区建立了启动子5端序列连续还原分析，建立了诱导Bim表达的启动子核心区，发现了典型的转录因子SP1结合序列。进一步的实验表明，当神经元凋亡时，SP1

9、被激活。负显式SP1突变和SP1-DNA结合抑制剂都可以抑制Bim的上升。这些实验资料揭示了SP1诱导BIM转录调控的新机制，为申请本项目提供了最根本的实验依据。4.转录因子调节神经细胞凋亡工作基础的另一转录因子MEF2抗神经细胞凋亡工作也显示了申请者与本项目相关的比较坚实的研究工作积累。本人已确认(Mingtaoli，Etal，J of Neuro Sci.2001，21:6544-6552)，随后被其他人确认(Shu-Ichi Okamoto，Etal，)，5 .信号传导的肌间快速cAMP/PKA抗神经细胞凋亡机制的研究也反映了本人对神经细胞凋亡信号传导的研究中较厚的工作积累。申请者首次发

10、现枯萎的激酶GSK- 3和GSK-3是PKA的天然气质。表明CAMP/PKA通过磷酸化抑制GSK-3，起到促进神经细胞生存的作用，发表在分子细胞生物学(Mingtaoli，Etal，Molcell Biol.2000，2033 360 9356-9363)上。6.JNK/c-Jun路径的工作基础我们首次以JNK/c-Jun为直接目标，用小分子JNK抑制剂(SP600125)治疗帕金森病动物，证明了JNK是有效的治疗目标。此作业发布后(Neuroscience Research，2004；48:195-202)，得到了国际同行的认可。SCI杂志Drug News Perspectives邀请我写

11、一篇关于“以JNK为目标治疗帕金森病”的专题摘要“JNK inhibition as a potential strategy in treating parkinsons disease”，工作条件，2001年回国，获得211基金180万韩元，组成了一流的分子细胞生物学实验室。2002年作为负责人，取得了第一期985学科建设经费700万韩元，成立了一流的蛋白质组学实验室，主管蛋白质科学的开展。近三年来，从事分子神经生物学和蛋白质组学研究的科学研究组得到了培养和聚集。这些建设性的工作为细胞信号传递、基因调控和解决本项目的核心问题奠定了坚实的基础。项目负责人晓涛所在的单位中山大学中山医科大学药理

12、系，是211项目支持系国家重点学科。人才济济，科研设备精良。近三年，药理研究室取得了学科建设资金3000万韩元，购买了质谱仪、激光共聚焦显微镜、超速离心机、流式细胞仪、高效液相、蛋白质分离纯化系统等大型仪器。这是申请者认为很宝贵的研究工作环境。申请人的简历、申请人及项目组主要成员学历研究简历最近发表了与本项目相关的文章清单，发表了在获得学术奖励情况的本项目中承担的任务。凌晨黄子韬项目负责人，中山大学中山医科大学药理系教授，博士导师，中山医科大学蛋白质组学研究室主任。1984年，1989年，1996年分别获得了医学学士、硕士和博士学位。主要研究领域包括神经元凋亡的信号传导、基因调控、蛋白质组学等

13、。他在美国Department of Pharmacology，University of Colorado健康科学中心进行了两年的博士后研究(1999-2001)，主修枯萎的信号传导、基因调控、蛋白质组学等最近5年发表了14篇SCI论文，其中作为第一作者的国际核心杂志Molecular and Cellular Biology(Impact Factor，10.03)和Journal of Neuroscience (IF通信作家，最近J Biol ccience)最近5年(19982004)作为第一主持人，获得了13项基金，其中包括4项国家自然科学基金。5个省自然科学基金；3个市基金教育部

14、基金1个。发表的相关论文1。leyu Shi、shoufang gong、zhongmin yuan、chi ma、Yanling Liu、chuan fu Wang、Wenming Li、Rong Biao piYifan Han、Zixu Mao、And Mingtao Li。activity deprivation-dependent induction of the pro apoptotic bh3-only protein BIM is independent of JNK C-jun activation during appling，皮永表2002年毕业于中山大学，获得了神经药理学博士。同年去香港科技大学生