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文档简介

1、实验九：Vc含量的测定（紫外快速测定法）,1. 实验原理 紫外测定法是维生素C快速测定的方法，操作简单，不受其它还原性物质等成分的干扰。其原理是根据维生素C具有对紫外光产生吸收、对碱不稳定的特性，在243nm处测定样品液与碱处理样品液两者吸光度值之差，并通过标准曲线，即可计算出维生素C的含量。,2. 实验仪器及设备 实验材料：青椒 实验器材：紫外可见分光光度计，容量瓶、比色管。,实验试剂： 10%HCl：取133mL浓盐酸，加水稀释至500mL 1% HCl：取22mL浓盐酸，加水稀释至100mL 1mol/LNaOH：称取40g 氢氧化钠，加蒸馏水，不断搅拌至溶解，然后定容至1000mL。

2、100g/mL维生素C标准溶液：准确称量10mg维生素C于100mL容量瓶中，加2mL10%盐酸溶解，再用蒸馏水定容至刻度。,3. 实验步骤 （1）样品溶液的制备：称取5g左右的青椒于研钵中，加入2-5mL1%盐酸，匀浆后转移到50mL容量瓶中，稀释至刻度。静置5min后过滤备用。,（2）标准曲线的制作：,测定波长：243nm,（3）样品溶液的测定： a：样品提取液的测定：取0.10.2mL提取液，放入盛有0.20.4mL10%HCl的10mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在243nm处测定吸光度。 b：待测碱处理液的制备与测定：分别吸取0.10.2mL提取液、2mL蒸馏水和0.60.8mL1mol/LNaOH溶液依次放入10mL容量瓶中，混匀，15min后加入0.60.8 mL10%HCl，混匀，加蒸馏水定容至刻度。以蒸馏水为空白，在243nm处测定吸光度。也可以碱处理待测液为空白，在243nm处测定样品提取液的吸光度。,4. 结果计算 1、由待测液及碱处理待测液的A243值之差，查标准曲线，计算样品中维生素C的含量； 2、或者直接以碱处理待测液作空白测得的样品提取液的吸光度值查标准曲线，计算样品中维生素C的含量。,式中：C由标准曲线查得的维生素C含量（g）； V样品提取

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