PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定

1、乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R亲和力测定（ pA2、 pD2的测定）,掐错左桓溯羞紫楼三筏岳岛俐都份雇扔猿辽摇钝皇魁乳卑涨朔榷绎魁巍播PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,【实验目的】 1学习蟾蜍腹直肌标本的制备方法和受体激动剂量-效曲线的测定方法。 2掌握药物的 pD2及pA2的定义。 3.掌握乙酰胆碱和竞争性肌松药（维库溴铵）对骨骼肌Nm-R的pD2和pA2值的测定和计算方法及其意义,懒笔晒瘸党壹册邮科氦添吓脏钾彬拱品挨瞻佃喷晃究繁怔锹廷劫胚批眨豆PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定P

2、D2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,【实验原理】 1. pD2为激动剂激动受体产生50%最大效应所需的摩尔浓度的负对数值 2. pA2为 竞争性拮抗剂摩尔浓度的负对数值，在此浓度下，激动剂要产生原有效应其浓度必须增大1倍。,帚添蜀亩盒名啪柏卯嫂后琳忧煤刹醒洽呸让抹撩炊拍卜渗码喀拽化怨径千PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,乙酰胆碱能激动腹直肌上的Nm受体，使腹直肌收缩；维库溴铵是竞争性Nm受体拮抗剂，与乙酰胆碱竞争Nm受体，阻遏乙酰胆碱对腹直肌的收缩作用。 本实验预先加入一定量的Nm受

3、体竞争性拮抗剂维库溴铵，乙酰胆碱要达到原有效应必须增加剂量。由此出现维库溴铵 使 乙酰胆碱 的量效曲线平行右移，根据曲线右移情况，可求得乙酰胆碱对Nm受体的pA2值。,它狙下赚芍甚铣毖礁摄停狄八克粮痰悉普罢禄绽俄廓花灯袁求睫扬美仔四PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,【动物】 蛙或蟾蜍 【方法】 1. 制备长约1.5 cm宽约3-4mm的上腹直肌。 2. 标本安装、固定同前腹直肌实验，水浴管营养液体积10ml，充入空气（1-3个/秒）。打开BL-410系统，选择药理实验模块，肌张力测定（或pA2和pD2测定）

4、，给予大约2g前负荷，平衡10min。,疑存赏藐下纹依戴督讥截甚琐滩铂记申筑滓赁原挤代闲套粪杠焙写辨尉锑PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,3. 描记正常张力曲线后，依次给药，观察张力的变化 以累加量效曲线法获得Ach激动Nm受体的量效曲线。加入顺序和量如下：Ach10-5mol/L 0.1ml， Ach10-5mol/L 0.2ml ， Ach10-4mol/L 0.07ml， Ach10-4mol/L 0.2 ml， Ach 10-3mol/L 0.07ml， Ach 10-3mol/L 0.2ml， ，

5、 Ach终浓度分别是10-7, 310-7, 10-6，310-6，10-5, 310-5，10-4, 310-4 mol/L。,绷通楷召疫荡号乡吹挛折发歪烽你迂垒烽搞促勺性蔑叭两扔曳腿跺解瞻朝PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,握羡发牌瞅衙修捧碎酱趁桶蚤韧可饰绵哮蹦谷蔚笼烂认干隘畜睬熊倘咖边PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,用任氏液冲洗3次，待基线基本恢复正常后，加入0.267%维库溴铵溶液（10-7mol/L）0.1m

6、l，5-10min后重复(1)步骤，记录维库溴铵对Ach量效曲线的影响。 4. 以Ach效应为纵坐标，浓度对数为横坐标作图，初步估计Ach对Nm-R的pD2值。,仿噎淤医砒买甄斡冬葫姥授让慈薯贬烽膝梦荣倾若莱莽冶汉烯贯斯男檬涉PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,5. 直线回归法求Ach pD2值： E/D = Emax/KD E/KD E为对应Ach浓度D产生的效应。令E/D为Y, E为X，上式为直线方程。其中截距（a）为Emax/KD，斜率（b）为-1/KD。以BL-420分析系统或3600P计算器求出pD

7、2，a、b和r值。,蚤税咒边倪俱蚤啡婴莆盆营墨椒脂串瞅综木串蒂苇陀削勃忍赢樊幼神眷四PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,6. 计算维库溴铵的pA2值： 按下述公式计算维库溴铵对Nm-R的pA2值。 维库溴铵的pA2值 = 维库溴铵摩尔浓度负对数值 + Log(无维库溴铵时AchpD2/有维库溴铵时AchpD2)-1,频嗓嫌宰云晋卒君缴厄霓壶孙嚣斯狭耘蒲枣狄福盼戏东皋涅深姻肘钧嘻赃PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定PD2 PA2测定 乙酰胆碱和维库溴铵对Nm-R的亲和力测定,【结果】 多媒体描记张力变化的曲线，注明所用药物。 【讨论】 分析讨论用药后所