实验四 胶体金试纸条检测技术_第1页
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文档简介

1、实验4:胶体金试纸诊断技术。首先，胶体金试纸条诊断是由胶体金免疫层析技术发展起来的，它是20世纪90年代初基于免疫过滤技术的一种简单、快速的免疫检测技术。首次用于人绒毛膜促性腺激素的测定和乙型肝炎病毒表面抗原的检测。胶体金是氯金酸的水溶胶。在还原剂的作用下，氯金酸聚合成特定大小的金颗粒，由于静电作用，金颗粒变成稳定的胶体状态。优质胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒呈球形，大小均匀，无棱角。胶体金质量差：溶液呈紫色，有不同的大小和形状。胶体金的质量标准，胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带负电荷，并通过静电引力与带正电荷的蛋白质分子基团形成牢固的结合。胶体金标记技术是一种新的免疫标记技术，它利用胶

2、体金作为抗原抗体反应的示踪标记。第二，胶体金试纸诊断技术的原理，以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔膜的毛细作用，使滴在膜一端的液体缓慢渗透到另一端，通过抗原-抗体结合，并利用胶体金显色(红色)反应来检测抗原/抗体。最常用的方法是双抗体夹心法检测抗原。胶体金试纸条示意图、测定时，将试纸条下端浸入液体样品中，下端吸水材料吸收液体向上端移动。当流经c时，干燥片上的免疫金复合物被再溶解，并被驱使渗透到膜条中。可以确定的是，如果样本中待检测的特定抗原可以与免疫金复合物中的抗体结合，则抗原-抗体复合物将在流到测试区域后被固相抗体捕获，并且在膜上出现红色反应线(t)。测定，测定，过量的免疫金复合物继续向前移动，直到参考区域与固体抗小鼠igg结合(免疫金复合物中的单克隆抗体是小鼠igg)，显示红色质控线(r)。测定，阴性标本没有反应线，但只显示质量控制线。胶体金快速诊断技术的特点是简单快速：操作简单，通常只需5-10分钟即可产生结果，而其他方法如酶联免疫吸附试验需要1-2小时，聚合酶链反应需要更长的时间。结果很容易判断：负片和正片的颜色很明显，肉眼很容易判断。良好的特异性：该技术大多用单克隆抗体标记，这决定了它具有良好的特异性。病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。寄生虫病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病和恙虫病。细菌性疾病：霍乱弧菌，坏疽。应用胶体金快速诊断

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