《免疫分析法进展》PPT课件

1、免疫分析法的进展、制作：由庄目德、六十年代的竞争分析原理提出，定量免疫取得了巨大进展。 一、抗体与免疫分析、免疫分析实际上是一种特殊的试剂分析，起点是抗体分析试剂。 1 .抗体结构和功能抗体是指与被测分子特异性结合的蛋白质分子，包括免疫球蛋白、接纳体和其他结合蛋白质，主要为免疫球蛋白，通常为IgG分子。 抗体在Fab区结合抗原分子的同时，根据hi区的旋转适应不同距离的抗原决定级星空卫视。 和抗原结合后，IgG分子的构象变化，Fc上的活性部位露出，表达了补体的固定和活性化及单核细胞的结合等亲细胞球反应的功能。 另外，当进行分析试剂的评估时，抗体的专一性可以仅需要无与伦比的预处理或简单的预处理。

2、有很高的稳定性。 这两点为分析免疫高度灵敏和高度专一性奠定了基础。 此外，抗体具有独特的性质。 每个抗体分子有两个抗原的结合点，即多元性。 但是，抗体缺乏的了高灵敏度试剂应该具备的分析信号的康托拉斯。 3传统的免疫分析和标识牌免疫分析，传统的免疫分析可以通过激活抗体的多元性和补体反应特性，建立免疫沉淀分析(沉淀法和凝聚法)和脂质体溶解分析法。 另一方面，标识牌分析法通过筛选抗体自身具有的分析性能，并在分析系统中导入探针系统进行检测。 灵敏度和检测范围提高了，但带来了检测相和过剩的标识牌试剂的分离问题。 因此，分为均匀免疫分析和非均匀免疫分析。 目前，一个成绩显着的发展方向是传统与标识牌的结合.

3、4标识牌分析的原理：三方式和四环节，a非竞争方式(标识牌抗体) b . 标识牌抗体的竞争方式c。 标识牌抗原的竞争方式。 不均匀相可以是任意方式。 均相目前采用标识牌抗原的分析方式，四个环节为抗体生产、标识牌试剂制备、分析方式修订、分析信号检测。 免疫分析按标记可分为放射免疫分析(RIA )、酶催化剂免疫分析(EIA )、荧光免疫分析(FIA )、发光免疫分析(LIA )等。 标记的生产，二，现代免疫分析概要，1抗体。 多克隆抗体是第一代应用的抗体。 目前应用广泛的是第二代单克隆抗体，性能更好，且来源连续稳定。 近年来，第三代抗体基因工程抗体使人们能够在基因水平上建立和改造抗体。 2标记和标记

4、方法。 如下表所示。 放射性同位素元素体、酶催化剂及其基质、荧光分子、化学和生物发光系统常用。 从80年代开始放射性同位素标识牌的比例下降，酶催化剂标识牌占主导地位，生物素亲和素的多标识牌法被广泛应用。 3信号检测。 对应相应的标记。 主要为吸光光度法、荧光(包括时间分解荧光)光度法、发光检测法。 三是免疫分析的特点和趋势，一是基因工程抗体(1)由免疫动物血清得出的是多克霍尔抗体，缺点是抗体不均匀，来源间断。 单克霍尔克服上述缺点。 (2)抗特异性抗体。 其特点是结合位置为特异型抗体的抗原结合点，反应性与抗原相似。 可以替代抗原，且来源丰富，容易标识牌，水溶性好。 (3)双专一性抗体。 具有两

5、个不同的抗原结合点。 一端的Fab端可以结合代测抗原，另一端可以结合标记。 使用2 -生物亲和素类的多重标识牌小分子探针没有空阻效应，能够增加抗体和抗原的标识牌率，提高灵敏度。 由来容易广泛提取，生物分子容易活化。 该标识牌系统分别采用了标识牌方法(生物素抗体、探针亲和性素)。 3时间分解荧光免疫分析用超短脉冲光激发样品，样品中荧光分子被激发，但背景荧光寿命短，很快衰减为零，只剩下长寿命的铕螯合标识牌荧光。这克服了背景荧光的影响。 目前，较好的时间分解荧光免疫分析方法是，四价免疫分析和环境成分免疫分析应从抗体的专一性中，在进行多元分析时将多种抗体用于云同步。 有两种设定修正方法。 第一种是多探针标记法。 比较成功的是双镁标识牌法和双荧光探针标识牌分析法。 要求是与兼容的分析条件有显着的信号差。 二是多成分定位包空间极限分辨率分析法。 固相不均匀免疫分析是指仅用一种探针，不同的受试对象分别位于不同的分析点，经过常规免疫分析程序，通过扫描测定完成理论，进行任意多组分的云同步分析。 缺点是在固相上进行检测，定位封装和检测技术困难。 双探针标记多环境成分免疫分析云同步使用两种探针，浓度测定与样品体积无关. 5自动和实用免疫分