（医学课件）CML中染色体分析技术的应用进展

1、CML中染色体分析技术的应用进展,1,染色体分析技术的发展,非显带时期(70s前) 显带时期(70s) 分子细胞遗传学时期-FISH(80s中期): 间(中)期FISH 多色FISH(M-FISH/SKY/M-band) CGH aCGH,R带,G带,Q带,C带,高分辨显带,2,Ph染色体,Nowell发现(1960 Philadelphia) Rowley证实t(9;22)(q34;q11)(1973) Prakash用高分辨定在9q34.1和22q11.21(1984) Ph染色体系获得性畸变 Ph染色体起源于多能干细胞。,3,该易位导致bcr/abl融合 bcr/abl融合蛋白,BCR/

2、ABL(+)-CML,BCR/ABL(-)-非CML,Ph+,Ph-,4,Ph易位类型,典型t(9;22)(q34;q11),变异易位 隐匿易位,涉及9,不涉及9,(BCR-ABL+),5,典型t(9;22)(q34;q11),6,变异易位t(1;22)(不涉及9号),7,变异易位t(X;9;22;12)(涉及9号),8,隐匿易位t(X;11;22),9,CML-CP,10-12% 额外异常,88-90% 46,t(9;22),10,45,X,-Y,t(9;22),11,CML-AP/BC,20% 46,t(9;22),80%额外异常,+Ph、+8、i(17q)、+19、+21等 Ph+t(8

3、;21)/t(15;17)/inv(16)/inv(3)同时存在,12,47,XY,+8,t(8;21),t(9;22),+Ph,13,46, XY, der(9)t(9;22)inv(9)(p22q34) ,der(22)t(9;22),14,46,XY, der(8) t(8;10)(p23;q25), t(9;22)(q34;q11), der(10) t(8;10) t(10;16) (p13;q22), der(16) inv(16) (p13q22) t(10;16),15,额外染色体异常意义 Fabarius A et al. Blood 2011;118(26):6760-8.

4、 Germany,1151例初诊CML 5yPFS 5yOS t(9;22)(1003/87.1%) 90% 92% t(v;22)(69/6%) 81% 87% ACA-+Ph,+8,i(17q),+19 50% 53% (16/1.4%AP/BC/CP预后一致major-route) -Y(38/3.3%) 88% 91% 其它ACA (25/2.2%minor-route) 96% 96%,16,Cumulative incidence of CCR,17,Cumulative incidence of MMR,18,CC-FISH,用于Ph+ CML的确诊(核型分析失败-初诊高白/治疗

5、后复查、断裂位点不常见PCR阴性、证实变异、继发性易位) MRD(10-3) 用于检测der(9q)部分序列(ABL、BCR)缺失,19,变异易位中缺失发生率30-45% 典型t(9;22)10-15% 该异常与Ph+细胞同时存在,20,羟基脲/干扰素时代：一个不良的预后指标：较短的慢性期，较快的疾病进展速度和较短的生存期 格列卫时代:del-der(9)有无在血液学反应、CC反应、分子反应无影响。 (Kim DH et al. Cancer 2008 15;113(4):772-81. Canada ) (Castagnetti F et al. J Clin Oncol. 2010 Jun

6、 1;28(16):2748-54. Italy),21,我所对105例Ph(+)CML进行了FISH研究，结果发现16例(15.2%)有der(9)缺失，该类患者中数生存期较无缺失者明显缩短(36 vs.76个月，P0.005)。(2005年以前病例),22,der(9)部分序列缺失,23,t(9;22;11),24,BCR-ABL+/CBFB+,CBFB基因重排,BCR/ABL+,25,细胞遗传学缓解标准,Ph+ 0% 完全CC缓解(CCR) Ph+ 1-34% 主要CC缓解(MCR) Ph+ 35-95% 较小CC缓解(minor CR) Ph+ 96-100% 无CC缓解(no CR)

7、,26,格列卫治 疗,格列卫治疗后,Ph消失,+8/-7/20q-/-5(6%),多数无影响 少数MDS,大剂量,无此异常,64%十年以上 87%长期CC完全缓解 80%分子缓解,中位时间：6Ms,800mg,快速消除Ph+/有效降低Ph-,27,Rea D et al France(Leukemia. 2012 Mar 30 ),格列卫一线治疗 单纯血液学AP-t(9;22) 93.7%主要CC缓解 单纯核型AP-t(9;22)+ACA 75%主要CC缓解 血液学AP+核型AP 40%主要CC缓解,28,Defina M et al Italy (Cancer. 2012 Apr 19 ),

8、CML 尼罗替尼一线治疗 CCyR CD34+ Ph+细胞比例。(1/20例,1Ph+/140个CD34+ ) CML 格列卫治疗 CCyR CD34+ Ph+细胞比例。(45%CD34+Ph+),FISH,FISH,29,EVI1与CML,EVI1表达 为独立预测OS指标 EVI1表达 无突变 不出现于初诊期(格列卫有效/耐药)，出现于诊断后31Ms(CML-CP/BC)。 CML-CP对格列卫耐药，且EVI1，则二代药物无效，尽早移植。 (Mustafa D et al. Blood,2010;116:6014-6017. UK),30,病例介绍,女性，46岁。2009.5.19初诊 格列

9、卫(无效) 同年10月加速 尼罗替尼(无效) 急变 化疗(无效) 2010.7.11死亡(14Ms-),31,Inv(3)/t(9;22)(CML-BC病例),32,BCR/ABL+,33,EVI1重排/扩增,34,ABL突变(CML-BC),1439T-G,丝氨酸-颉氨酸,35,细胞株,核型均一Inv(3)/t(9;22) EVI1高表达，无突变 aCGH,36,37,本院1777例CML简介,985/80%t(9;22),126/10%+ACA,17/1%t(v;22),48/4%t(9;22;v),13/1% +ACA,20/2%N,24/2%其它,24/2%其它,38,4-9 10-19 20-29 30-39 40-49 50-59 60-