(理科选修三)2.2.1动物细胞培养和核移植技术公开课.ppt

1、专题2动物细胞工程，植物组织培养，植物体细胞杂交，1。动物细胞培养，2。动物细胞融合，3。单克隆抗体的制备，4。核移植，综述：动物细胞工程的常用技术手段：植物细胞工程的常用技术手段是什么？(1)动物细胞培养是动物细胞工程的基础，即从动物体内取出相关组织，将其分散成单细胞，然后将其置于合适的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。1.动物细胞培养的概念：2。原理：细胞增殖。定义：人们通常称动物组织的原代培养为消化后培养。胰蛋白酶处理，取出幼小动物的组织、胚胎或器官和组织，切割，单细胞，细胞悬液，转移到培养瓶中培养(贴壁生长，生长成单层细胞。有接触抑制现象)。初级文化。过程，原代培养，增殖能力强，分裂旺盛

2、，分化程度低，易于培养。去除间质蛋白并加入培养基。强调一点：细胞粘附过程，细胞粘附：分散在培养瓶悬浮液中的细胞迅速粘附在瓶壁上，这就是所谓的细胞粘附。培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑，无毒，易于附着。当粘附细胞分裂和生长，直到它们的表面相互接触，细胞将停止分裂和增殖，这被称为细胞接触抑制。重点2:接触抑制，细胞接触抑制，定义：当原代培养细胞处于接触抑制状态时，用胰蛋白酶处理，使细胞与瓶壁分离，然后加入新的培养基，细胞被分离和稀释，然后从原始培养瓶转移到新的培养瓶。这个过程被称为亚文化。(瓶培养过程)、继代培养、4050代细胞(细胞株)分瓶继代培养、胰蛋白酶、原代培养、接触抑制、继代培养、细胞株：

3、继代培养细胞一般可传至40-50代，遗传物质一般不变，这称为细胞株。重点：细胞株，细胞系(你可以理解它，旧的教科书系统)，细胞系：经过50代的传代，细胞生长又停滞了，一些细胞遗传物质发生了变化，从而可以连续传代而获得永生，称为细胞系。细胞系与细胞系的区别：细胞系的遗传质量发生改变，具有癌细胞的特征，失去接触和抑制，易于传代培养。接触抑制，概述：动物细胞培养过程，动物胚胎或幼小动物组织和器官，制备细胞悬液，用胰蛋白酶切割和处理，10代细胞，转移到培养瓶中，40-50代细胞，传代培养，无限传代培养，单细胞，加入培养液稀释，在10代传代培养内，遗传物质保持不变和正常，传代约10-50代，生长缓慢以致

4、完全停止，并且一些核类型可能改变(遗传物质可能改变)。为什么用胰蛋白酶治疗？在单独的瓶中传代培养，原代培养特征：细胞粘附，接触抑制，持续传代培养少量细胞获得永生，细胞突变，遗传物质发生改变，相当于癌细胞。细胞系：一般来说，遗传物质没有改变，细胞系：遗传物质已经改变，原代培养、多细胞动物和人类细胞都生活在内部环境中。基于此，我们认为：1 .内部环境稳态包括哪些方面？适宜的温度、酸碱度、渗透压、营养和氧气。2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？无菌无毒的环境。想想吧。3.在体外培养细胞时应该提供什么物质？我们如何确保一个与内部环境相似的营养环境？介质应该是液体还是固体？充足的营养、适宜的温度、酸

5、碱度和气体环境。加入动物血清。介质应该是液体。思考：动物血清的作用？它主要提供有利于细胞生长和增殖的激素和生长因子，或者提供合成培养基中缺乏的营养。确保细胞的顺利生长和增殖。4.在动物细胞培养条件下，胃蛋白酶能代替胰蛋白酶吗？无菌、无毒环境，(加入一定量的抗生素，定期更换培养基)，营养，(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等。)、温度和酸碱度、温度36.50.5、酸碱度7.27.4、气体环境、O2和CO2(95%空气和5%CO2)等。为了保证细胞的顺利生长和增殖，动物细胞培养基的主要成分是葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清。(1)液体培养基和(2)动物血清。大多数动物体细

6、胞生活在液体环境中。植物组织培养怎么样？无机盐，蔗糖，维生素，生长调节物质，植物激素，成分比较：5。动物细胞培养技术：1的应用。生产蛋白质生物制品如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体2。在基因工程中的应用主要作为受体细胞3。检测有毒物质，判断某些物质的毒性。细胞的生理、药理和病理研究，如筛选抗癌药物，1。动物细胞培养过程中遗传物质发生变化的细胞有(a)细胞系，b细胞系，c原代细胞，d传代细胞，2。动物细胞工程技术的基础是：a .动物细胞融合，b .单克隆抗体，c .胚胎移植，d. 3 .用于动物细胞培养的组织和细胞大多取自胚胎或出生不久的小动物的器官或组织。主要原因是这种组织细胞很容易产生各种变异。

7、b有更强的通用性。获得材料非常方便。d具有很强的分裂和增殖能力。D. 4 .动物细胞工程中的下列工具是：(一)限制性内切酶BDNA连接酶胰蛋白酶果胶酶。c，9。下图显示了动物细胞培养。请根据图片回答：(1)动物器官或组织放在容器a中，一般取自_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)先处理容器A中的动物器官或组织，然后用酶处理，使细胞分散。这样做的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

8、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _在此瓶中培养一段时间后，许多细胞因老化而死亡，此时的培养称为_ _ _ _ _ _ _ _。 (4)为了将瓶B中的细胞装入瓶C中，用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _处理它们。(5)在C瓶中正常培养一段时间后，发现所有细胞均死亡。原因是_ _ _

9、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。幼小动物的器官或组织、动物胚胎、用剪刀切割的胰腺蛋白，使每个细胞都能与培养液接触，这便于获得营养和排出代谢废物、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清、原代培养物、胰蛋白酶、细胞悬液、无癌变细胞、细胞全能性、细胞株、细胞系、植物或组织、培养结果、快速繁殖和培养。葡萄糖、动物血清、蔗糖、植物激素、培养基的特定成分、液体培养基、固体培养基、培养基性质、细胞增殖、原理、动物细胞培养、植物组织培养、比较项目、植物组织培养和动物细胞培养之间的比较、细胞分化程度、全能性恢复。第三，动物体细胞核移植技术，胚胎细胞核移植，体细胞核移植，细胞

10、分化程度，全能性恢复。通过核移植获得的动物被称为克隆动物。1.概念：动物细胞的细胞核被转移到去核的卵母细胞中，从而重组并发育成新的胚胎，最终发育成动物个体。、低、易、高、难、卵母细胞、黑面母羊、白面母羊、乳腺细胞、核移植、早期胚胎、母羊子宫、胚胎移植、多利羊、分娩、妊娠、融合卵母细胞、2。体细胞核移植过程、使用去核的减数分裂第二中期细胞(中期M)。为什么？激活方法：激活目的：融合促进方法：电刺激，胚胎移植到代孕受体，妊娠，分娩，体细胞核移植过程，供体：优质高产奶牛，受体：普通奶牛(卵母细胞收集和培养)，1。体积大，操作方便。2.含有促进细胞核全能性表达的物质和营养条件。有人说它有三个母亲，对吗

11、？核移植、胚胎移植、体细胞核移植过程(体细胞克隆动物)，以及在核移植之前，为什么要去除受体卵母细胞的细胞核？为了使细胞核遗传物质的细胞核转移，动物全部来自有价值的动物提供的细胞。用于核移植的供体细胞通常选择10代以内的细胞。为什么？10代以内的细胞保持正常的二倍体核型。3.核移植产生的克隆动物能100%复制体细胞供体动物吗？为什么？不，克隆动物的大部分脱氧核糖核酸来自供体细胞核，但细胞核外的少量脱氧核糖核酸(如线粒体脱氧核糖核酸)来自受体卵母细胞。在克隆羊多莉成功繁育之前，胚胎核移植技术已经取得了很大进展。事实上，多莉的克隆遵循了核移植技术中胚胎核移植的整个过程，但这并没有降低多莉的意义，因为

12、她是世界上第一个通过体细胞核移植出生的动物，这是克隆技术研究的一大突破。这一重大进展意味着，像植物细胞一样，分化的动物细胞核在理论上也是全能的。4.动物克隆有很多例子。为什么多莉闻名于世？2.体细胞核移植的应用前景，你还担心被禁用吗？你还担心找不到合适的器官移植捐赠者吗？我们不能再这样下去了。看看我们的体细胞核移植技术。我们只需要从你身上取一小块体细胞，通过核移植培养胚胎干细胞，然后用胚胎干细胞诱导分化成各种组织和器官。这些器官的组织相容性抗原和你的完全一样。如果我们用这种器官进行器官移植，根本不会有免疫排斥。毫不夸张地说，如果这项技术研究成熟了，改变胳膊和腿就像在未来为汽车换轮胎一样。你明白

13、吗？这不是幻想。伟大的前景就在眼前。你还在等什么？现在，是的，现在，加入生命科学的研究！4.体细胞核移植技术的应用前景。加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群的培育。保护濒危物种，增加幸存动物的数量。克隆动物作为生物反应器来生产医用蛋白质。可作为异种移植供体移植组织和器官。体细胞核移植技术存在的问题胚胎移植动物幼体的产率概率为10。克隆动物存在健康问题。克隆动物的食品安全是有争议的。1.(浙江李忠，2009)动物和植物成体的体细胞用于体外培养。以下陈述是正确的： (一)需要CO2培养箱，乙需要液体培养基，丙需要在无菌条件下进行，丁可以反映细胞的全能性。动物和植物成体体细胞的体外培养必须在无菌条件下

14、进行。体外培养植物成体体细胞获得新个体体现了细胞的全能性，而体外培养动物体细胞主要是获得细胞代谢产物。答：C，7，(2008年宁夏高考)回答以下关于动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞停止分裂和增殖，称为细胞。此时，瓶壁上形成的细胞数为_ _ _ _ _ _ _ _ _。为了将贴壁细胞从瓶壁上分离，需要进行酶处理，可用的酶是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)随着细胞传代次数的增加，大部分细胞停止分裂，出现_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _现象。然而，很少有细胞能够持续增殖， 其中一些将变成_ _ _

15、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，相互接触，接触抑制，胰岛蛋白酶，单层，还原，不朽，还原，衰老，甚至死亡。 (3)当使用一些大分子染料染色细胞时，观察到死亡细胞被染色，而活细胞未被染色。原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(5)在细胞培养过程中，细胞通常在_ _ _ _ _ _的条件下保存。在这种情况下， _ _ _ _

16、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (6)将细胞培养形成的皮肤组织移植给患者后，由于身体以_ _ _ _ _ _ _ _ _的形式攻击移植的皮肤组织而发生排斥反应。酶，因为死亡细胞的细胞膜已经失去了它的选择性渗透性，大分子染料可以进入死亡细胞并染色，中低温，代谢，抗原，6(海南高考)当一个研究小组进行药物试验时，动物肝细胞被用作材料来确定药物对体外培养细胞的毒

17、性。有两种细胞可供培养：一种是肝肿瘤细胞，另一种是正常肝细胞。请回答以下关于动物细胞培养的问题：(1)在相同的培养基和其他培养条件下，将等量的甲细胞和乙细胞放入培养瓶中。一段时间后，观察到细胞数量为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)在动物细胞培养中，通常向合成培养基中加入适量的血清。原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行。血清可以补充合成培养基中缺乏的物质，维持培养基的酸碱度。(3)在两种细胞的生长过程中，当B细胞铺满瓶壁时，它们就生长了。药物试验需要大

18、量细胞，两种细胞经常传代，A细胞的传代次数为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。如果肝细胞悬液是由动物肝组织块制成的，则需要用_ _ _ _ _ _消化。(4)为了防止细胞培养过程中的细菌污染，可以在培养基中加入适量的_ _ _ _ _ _ _ _。(5)已知癌基因X的过表达与肝肿瘤的发生密切相关。为了测试抗肿瘤药物Y对A细胞生长的影响，可将A细胞分为两组：A组和B组，其中_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _胰蛋白酶、聚、抗生素、终止剂、基因、蛋白质、药物Y、2.2.2动物细胞融合物和单克隆抗体1。定义：指通过自然或人工方法将两个或多个不同细胞融合成一个细胞的过程。1.动物细胞融合(也称为细胞杂交)，2。原理：细胞膜流动性，细胞a，细胞b，杂交细胞，灭活病毒，物理和化学方法，用灭活病毒诱导动物细胞融合过程，病毒颗粒粘附于细胞表面，细胞膜被病毒颗粒穿透，细胞膜连接，细胞融合和杂交细胞形成，意义：细胞融合技术的突破人们获得抗体的传统方式是什么？将抗原注射到动物体内