抗氨苄青霉素大肠杆菌的分离、培养及计数实验报告 许佳泉

1、实验1抗氨苄青霉素大肠菌群的分离、培养及订正数姓名等级实验原理如何进行分离、培养和修正1实验需要配制和使用选择性培养基：选择性培养基是指根据对某些微生物特殊营养要求或化学、物理因素的抗逆性进行化学基修订的培养基。 其功能是使混合菌样劣势菌成为优势菌，提高该菌的筛选效率。双分离单克隆菌落采用平板划线法，其原理是通过接种环连续划线操作琼脂固体培养基表面，使收集的菌种逐渐稀释分散在培养基表面，经过数次划线后培养，形成从一个细胞球繁殖的肉眼可见的子细胞球群，即菌落采用3lb液体培养基，放入恒温孵化机中培养单克隆菌落，达到了扩大培养的目的。4稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后在琼脂固体培养基

2、表面分别涂布不同稀释度的菌液(105、106、107 )进行培养。 在稀释度高的菌液中，聚集的微生物分散在各个细胞球中，可以在培养基表面形成各个菌落。用5无菌水稀释菌液：取1毫升液体培养基基本液，加入9ml无菌水，振荡使液体扩散到一盏茶。 取出振动后溶液中的1ml液体，放入另一瓶无菌水中振荡，重复该操作，进行梯度稀释，每步浓度稀释至前十分之一。6计数时，选择没有被污染的培养基计数。 用标记在培养基表面做标记，用计数器计数菌落数。实验的目的1掌握选择培养基的使用方法用2液体培养基掌握扩大培养用三平板划线法练习分离单克隆菌落4练习用平板涂布法计数5实践无菌操作技术。实验材料和药品要分离的大肠菌群液

3、、高压蒸汽灭菌锅、lb固体培养基、lb液体培养基、接种环、玻璃三角刮削器、培养皿、恒温孵化机、摇床、洁净台、酒精灯、无菌水、移液器9ml实验步骤(用简单的程序流程图表示)实验资料(划线平板的摄影图片、放大培养的摄影图片、平板涂布计数摄影图片及表等)平板划线后培养得到的单克隆的积累数只有1个。涂在平板上的9个平板中有7个污染严重，一个是轻度污染，一个没有污染。 其中轻度污染稀释浓度为106，菌落个数： 84个未污染稀释浓度为105，菌落个数： 559个实验结果和讨论平板划痕操作的错误探讨：第一次划痕用力过猛，培养基破裂严重，接种环经酒精灯灼烧后，蒸发制冷时间过短，佝温灼烧了部分菌液中的细菌。污染

4、的严重原因探讨：涂抹平板操作时与酒精灯火焰的距离不一盏茶，不起到高温杀菌的作用，杂菌侵入。抗氨苄青霉素大肠菌群的分离培养修订数实验评价标准个人参与参考标准分数维度1 :参加解题报告书中有一盏茶证据表明，这个学生在实验的实行、交流等环节高度参与。10报告中有几个证据表明，该学生在实验的实行、交流等环节中的参与。5报告书中没有证据表明这个学生在实验的实行、交流等环节中的参与。0执行项目工程参考标准分数维度1 :完善程度项目工程由一盏茶执行(可根据情况合理调整)10修改项目工程的计划基本上已经实行了5修订项目工程计划没有有效展开0维度2 :真实性保持所有可靠的原始数据记录和工作记录10原始数据的记录

5、或作业记录有点遗漏5没有原始数据、工作记录或严重缺失。 (这种情况下，项目工程执行0点)0维度3 :数据的综合性收集了一盏茶全面的数据来解决提议的问题10收集的数据可以解决大部分提出的问题5收集的数据几乎不能解决问题0维度4 :资料的可靠性对数据进行了合理的一盏茶分析10分析了数据5没有分析数据。0维度5 :安全性、修订计划合理实验操作安全、规范、有序、效率高。10实验操作的安全、规范。5实验操作存在安全隐患。 (这种情况下，项目工程执行0点)0分析反省参考标准分数维度1 :分析数据，得出结论得出了对得到的数据进行明确处理、分析和解决研究问题的结论10对得到的数据进行处理、分析，得出可以部分解决研究问题的结论5数据处理、分析不当，结论存在明显的科学错误0维度2 :结论得到的结论说明清楚，有可靠的数据通讯端口，较好地解决了问题10得出的结论有几个漏洞，但基本上可以解决问题5得出的结论与研究的问题无关或有明显的科学错误。0交流参考标准分数维度1 :一致性项目工程成果结构清晰，内容完整，表达研究问题、原理、执行过程、分析过程、结论、反思等内容10项目工程的成果内容完整，表现了项目工程的问题、原理、设定、执行、分析、反省等内容5项目工程成果的内容不完整或表现不清楚。0维度2 :科