实验三切花保鲜和采后生理.ppt

1、厦门大学生命科学学院开设切花保鲜与采后生理实验，一是实验的目的和意义，要求学生运用所学知识自主设计实验，根据自己的设计独立解决实验中的问题，合理解释实验现象和结果，科学分析实验数据，提高学生自主科研能力，二是实验原理，1。切花保鲜技术1.1采收：花期和蕾期采收(康乃馨、玫瑰、唐菖蒲、郁金香、菊花)采收期：花枝留高在清晨或傍晚：取决于吸水性，强、高、弱、低1。2在水中浸泡4小时后收获前，在5厘米的捆绑预处理溶液中切断花梗，处理不透明塑料袋，用穿孔纸盒包装，运输和储存预处理溶液：康乃馨：10蔗糖，在1000微克/升硝酸银溶液中浸泡玫瑰10分钟：2蔗糖，300微克/升8-羟基喹啉溶液(或其硫酸盐和柠

2、檬酸盐溶液)10分钟；唐菖蒲、郁金香和菊花用1000微克/升硝酸银溶液处理10分钟。1.3催花液：蔗糖、杀菌剂、植物激素(或生长调节剂):康乃馨：7蔗糖、25微克/升赤霉素、300微克/升8-羟基喹啉柠檬酸盐溶液：玫瑰：2蔗糖、25微克/升赤霉素、300微克/升8-羟基喹啉柠檬酸盐溶液：唐菖蒲、郁金香：5蔗糖、25微克将厚花枝或木本花卉切割成十字形或打开更多裂缝或将其打碎，将其燃烧，浸泡在温水中，最后将其打碎，冷藏并消毒。1.5营养保存方法营养素：蔗糖、果糖、葡萄糖、无机盐等杀菌防腐剂：VitC、阿司匹林、水杨酸、高锰酸钾、硫酸铜、食盐、硫磺、明矾、琥珀酸、丁醇、酒精、苯甲酸等乙烯抑制剂：硝酸

3、银、硫代硫酸银、醋酸银、硝酸钴、氨基乙酸、硝酸钾(钙)、高锰酸钾的PH 34等。用柠檬酸调节，适当添加激素和氨基酸。日常营养液的配方：(水应存放过夜或用蒸馏水)阿司匹林3片，维生素C2片，糖20克溶于1L水，8-羟基喹啉020.3克，糖10克溶于1L水，盐10克，糖20克溶于1L水，硫酸铜5克，溶于1L水1.6日常管理：叶子不能浸在水中，每23天换水一次，切下茎的新鲜切段，放在：不要放在成熟的水果附近，阳光直射和烟熏的地方，2。超氧化物歧化酶测定原理，间接化学方法常用于检测反应体系中的超氧化物歧化酶。有可检测的物质(如NBT、Cytc、邻苯三酚、肾上腺素等。)后的产O2系统(如核黄素光照或黄嘌

4、呤-黄嘌呤氧化酶等。)被氧化或还原，并通过光谱吸收测量氧化或还原后物质的变化，从而计算超氧化物歧化酶活性。NBT光化学还原法常用于测定植物组织中的超氧化物歧化酶活性和显示超氧化物歧化酶同工酶谱带。酶单位/样品量=，3。丙二醛的测定原理。丙二醛(MDA)是一种常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温条件下能与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色三甲基川(3，5，5-三甲基唑2，4-二酮)，最大吸收波长为532 nm。丙二醛含量可用分光光度法计算。线性回归法：Y5320.001980.088D450双组分分光光度计法：C1(mmol/l)=11.71d 450 C2(umol/l)=6.45(d532-

5、d600)-0.56d 450.3 .实验设计、选择和配制营养液进行材料选择(药物提前打开和交递)实验操作设计和注意事项材料选择和处理实验组和对照组的设计生理指标(超氧化物歧化酶和丙二醛)的测定(SOD)实验安排，四组自组装，设计，选择材料(保鲜液更换，形态学观察，超氧化物歧化酶和丙二醛测定)。实验总结的课堂报告根据建议修改实验总结，并写出实验报告。5.结果和分析，并定期记录花瓣的形状和颜色的变化。应对测得的生理指标进行科学计算和统计分析。对比总结实验结果，确定保鲜效果。6.注意事项，6.1保存过程中的注意事项：选择新鲜健康的材料，注意试剂的理化特性和试剂之间是否有化学反应，准确计算试剂用量，

6、避免浪费仪器，注意正确操作，定期更换保存液，注意保存液的酸碱度变化和细菌污染，测量生理指标时注意科学取样，6.2超氧化物歧化酶测定注意事项。 用PBS研磨样品(其他样品储存在冰箱中)，离心后的上清液为粗酶溶液(储存在冰箱中)。 研磨时，PBS不应超过4.5毫升。研磨后，制备反应溶液。样品添加过程中请远离光线。做一个预实验来确定酶溶液的添加量。酶溶液的添加量应为35%-65%，以便分装反应溶液。在每个试管中加入适量的粗酶溶液(5-200微升)。在316处照明10-30分钟。注意空白控制和最大灯管的设置。6.3测量丙二醛时的注意事项。测定丙二醛时，会受到许多物质的干扰，其中最重要的是可溶性糖。糖与

7、三丁基锡化合物显色反应产物的最大吸收波长为450纳米，在532纳米也有吸收。植物受到干旱、高温和低温胁迫时，可溶性糖增加，因此在测定植物组织中丙二醛-三丁基锡化合物活性物质含量时，必须消除可溶性糖的干扰。在532和450纳米处，低浓度的铁离子可以显著提高三丁基锡化合物与蔗糖或丙二醛的显色反应的消光值，因此蔗糖、三丁基锡化合物和丙二醛的显色反应需要一定量的铁离子。通常，植物组织中铁离子的含量为100，300微克/千克干重，根据植物样品的数量和提取物的体积，Fe3的最终浓度为0.5毫摩尔/升。7.想想考试题，你从这个实验中学到了什么？你从中学到了什么？你对开放式实验有什么好的建议吗？8.开放式实验总结；1.检查数据和设计实验(确定材料和选择保鲜液)。2.取材料(新鲜、健壮、具有相似生理状态)3。配制保鲜液试剂：溶解度、反应沉淀、禁止称量母液：保持桌面和天平清洁，注意腐蚀性4。日常管理中保持实验室整洁，注意仪器的开关，并正常使用和维护。确定5的确定原则。超氧化物歧化酶和丙二醛。取样时，取0.1-0.5g，注意取样的科学性。6.保鲜效果，7。实验报告的