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文档简介
1、通过对兔急性肾功能衰竭、实验目的、急性中毒性肾衰动物模型克隆、肾功能指标检测及肾脏形态变化的观察,了解中毒兔肾功能的变化。判断和分析致病因素和可能导致急性肾脏衰退的发病机制。实验原理,肾脏是多功能器官,其主要功能之一是泌尿功能。肾脏通过肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泄和重吸收、体内代斯物质排泄,维持机体内环境的稳定。肾血流减少,肾小球滤过率下降,或肾小管排泄中发生吸收功能障碍时,肾脏的泌尿功能受到影响,导致肾功能衰竭。ARF发病机制的中心部分是GFR的减少。肾血流减少,肾小管堵塞,肾小管的原尿漏或肾细胞损伤等都会导致GFR的减少。本实验通过皮下注射1HgCl2引起兔急性肾小惯性坏死。通过牙齿实
2、验,学习复制急性中毒性肾衰动物模型。观察肾衰兔的一般状态、酚红排泄率、肌酐清除率等变化。观察急性肾功能衰竭肾脏的一般形态。根据实验指标判断和分析急性肾衰的发病机制和病理生理变化。对急性肾衰的原因、发病机制、功能代斯变化的认识加深了。实验对象,兔子23公斤。实验药品和器材,1HgCl2,生理盐水,25氨基甲酸酯,06酚红,20葡萄糖,10纳米奥h,手术器械套装,注射器,试管,取样器,721分光光度计,水浴锅,离心机。实验阶段,复制肾功能衰竭模型:实验前一天,取两只兔子,称重,皮下或肌肉注射1HgCl2(o810mlkg),用1 HGCL2 (O810MLKG)进行急性肾功能衰竭,使实验组兔。另一
3、种皮下或肌肉注射等量的生理盐水(10mlkg)作为对照组兔。实验阶段,观察:24小时后比较两组动物的一般状态、活动情况和尿液量。兔子称重,向耳浅静脉注射25氨基甲酸酯40毫克,动物麻醉后固定在兔架上。实验程序,将兔心脏采血35毫升放在干燥管(非抗凝剂)中,放置10毫升后,小心吸收3000r/min离心15min,将血清放在其他干燥管中,准备进行血液肌酐检查,实验程序,心脏采血失败的话,将颈动脉采血颈静置中剪毛,忧虑团。输液速度必须在下腹部正中剪下毛发,在耻骨联合处切割约15厘米,长约4厘米,暴露膀胱,用注射器将2毫升尿液收集到试管中,进行尿肌症检查。实验阶段,在膀胱底部找到两侧的输尿管,将其分
4、离。威廉莎士比亚、膀胱、膀胱、膀胱、膀胱、膀胱、膀胱、膀胱)在肌膀胱末端绑上输尿管,等一会儿,再切一口进眼科,放入肾方向的塑料管(塑料管事先用肝素冲洗,或装满肝素),结扎固定,用来收集尿液。(。实验阶段,酚红排泄率测定:1)两组兔子分别在耳浅静脉注射了o6酚红溶液(1mlkg),然后在外静脉注射所注射了20葡萄糖溶液(30mlkg)。从酚红注射开始收集15min或30min的尿液。转换为单位时间的小便量(mlmin)。将实验阶段,收集的尿液倒入500毫升的量桶,加入10NaOH lOml,用自来水补充500毫升,搅拌后,取出适当的量,放入比色管口径等试管,与标准比色管比较,得出15min或30
5、min内肾酚红排泄率。实验阶段,肾酚红排泄率:反映肾血流和肾小管排泄功能的指标。正常情况下,静脉注射酚红后,15min或30min,肾脏酚红排泄率分别为30%和45%。,实验阶段,测定血清和尿肌硫含量,苦味酸沉淀蛋白原理:在碱性条件下苦味酸和(血,尿中)肌酐作用,产生黄红苦味酸肌酐,溶液上色后进行颜色测定;然后添加乙酸。酸性环境中,黄红色的苦味酸肌酐清除,非肌酸物质(假肌酐)牙齿着色,两种牙齿的色差是血和尿中的肌酐。按照表1,表2的操作步骤测定血清和尿液近况。表1血清肌酐测定,实验阶段,混合,37OC水浴30 min,510nm波长比色法,空管零曹征,ODA读取,各管加2滴50%醋酸液,放置6
6、min后测定ODM值。计算:Crp(mg%)=OD度量OD度量/OD显示OD显示0.01/0.2100正常33600.70.8mg%(1mg%=88.4mol/L)。表2尿肌症测定,实验程序,搅拌,加入10min,然后加入蒸馏水6。0ml,摇晃,530nm波长比色,空管零曹征,ODM读取。计算:Cru(mg%)=OD测定/OD标准0.05mg100ml/0.1ml,实验阶段,功能性肾功能衰竭时比率40。内生肌酐清除率(Ccr):肾小球滤过率(GFR) Ccr=Cr尿量(ML/MIN)/肌酐可以在肾小球中自由过滤,很少被肾小管吸收,但少量在根曲小管中分泌。内生肌酐在血浆中浓度相当低,因此根曲小管分泌的肌酐可以忽略,因此Ccr与局部清除率相似,可以显示肾小球滤过率。实验程序,肾脏形态学观察:处死兔子,取出肾脏,测量肾脏重量,计算肾脏比例,比较两组家兔肾脏外形,纵向切开肾脏,观察血髓质条纹,颜色等。事故测试问题,1测试分析氯
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