高中生物《第二章 第二节 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课件2 新人教版选修1

1、课题2土壤中降解尿素的细菌的分离和数量，专题2微生物的培养和应用，1，课题背景，1，尿素的利用，尿素是重要的农业氮肥。乙醚不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌只有把尿素分解成氨后才能被植物利用。2，细菌利用尿素的原因，土壤中的细菌分解尿素的原因是可以合成尿素酶。3、常见的降解尿素的微生物、孢子菌、牛球菌、假单胞菌、克罗西菌、棒杆菌、放线菌也能降解尿素。4，主题的目的，从土壤中分离出可降解乙醚的细菌，并对每个土壤样品中含有多少细菌进行统计。1.研究事故，菌株筛选，统计群落数，控制设定，1，案例：启示：在寻找目的菌种时，根据对生存环境的要求，原因：热泉温度为70800C，淘汰了大部分微生物，因此只筛

2、选了Taq细菌。DNA聚合酶链式反应是体外大量复制少量DNA的技术，需要耐高温(930C)的DNA聚合酶。要分离微生物，必须根据营养、生理学、生长条件等微生物的特性进行分离。方法：抑制大部分微生物生长，创造有利于牙齿细菌生长的环境，培养一段时间后牙齿细菌数量增加，通过平板稀释等分离纯化培养。2，实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。3，从土壤中分解尿素的细菌的分离和计算所需的培养基：从物理性质来看，牙齿培养基属于什么种类？固体培养基、牙齿培养基中哪个用作碳源、氮源？碳源：葡萄糖，尿素氮源：尿素，培养基中的氮源只有能够

3、合成脲酶的微生物才能分解尿素，将尿素用作氮源。尿素酶不足的微生物不能分解尿素，氮源不足，不能生长和繁殖，因此使用牙齿培养基可以选择分解尿素的微生物。5，培养基选择分解尿素的微生物的原理，1，显微镜直接计算：利用血细胞计数板用显微镜计算一定容积内样品中的微生物数量。统计菌落数：无法区分死细菌和活细菌。不适合运动细菌的数量。需要相对高的细菌浓度。个人的小细菌很难用显微镜观察。缺点，2 .间接计数法(生菌计数法)原则：稀释度足够高时，微生物在固体培养基中形成的菌落是由单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表了原来的一个单细胞。一般方法：稀释涂层板法。每个样本的菌落数(CV)M，其中C表示特定稀释度也在下板中

4、生长的平均菌落数，V表示涂板时所用稀释液的体积(ml)，M表示稀释倍数。为了确保准确的结果，通常在30300的平板电脑上计算菌类的数量。为了使结果接近实际值，可以将相同的稀释度添加到3个以上的平板上进行涂层，计算出均线的平均值。统计殖民地往往低于活细菌的实际数量。涂层板法选择的稀释度很重要，一般三种茄子稀释度中出现在第二种稀释度的平均菌群数为50左右。计算方法、直接计算方法、板计算方法、浊度法、膜过滤法、例句：统计菌群数的方法包括()、A. B. C. D .D、图波板法重量法直接计算方法、拓扑法生理指标法膜过滤法、设置、设定对照组：例如，在实验分解乙醚的细菌的筛选和统计菌的数量时，A学生在相

5、应的106倍稀释培养基中筛选了约150个菌群，而其他学生在相同稀释度中仅选择了约50个菌群。分析其原因。，原因：土壤不同，培养基污染或操作失误(或掺有其他含氮物质)，摘要：通过牙齿实例，可以看出实验结果必须具有说服力，对比设置必须。方案1:其他同学用与A同学相同的土样进行实验，方案2: A同学准备的培养基不放土样，培养，空白对照，证明培养基是否污染。结果预测：结果与A同学一致，证明A没错。结果不同，证明A同学在操作失误或培养基的配制上有问题。2 .实验的具体操作土壤取样从肥沃湿润的土壤中取样。先去除表土3厘米左右，然后取样，放在事先准备好的信封里。采土的小铲子和装土的信封在使用前要灭菌。准备培

6、养基：准备以尿素为唯一氮源的选择性培养基。在火焰旁应该叫土壤10g。在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行，每一个微生物都要使用不同的稀释度。也就是说，根据微生物，土壤的含量不同的目的菌群的数量在30300之间，要保证适于计数的板，三个茄子样品的稀释，为什么要分离不同的微生物，使用不同的稀释度呢？(威廉莎士比亚、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物)测定土壤中细菌总量和测定土壤中可分解乙醚的细菌数量，所选择的稀释范围是否相同呢？原因：土壤中各种微生物的数量(单位：周/公斤)不同。例如，在干燥土壤的上层样本中，好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万人，放线菌数约为4

7、77万人，真菌数约为23.1万人。结论：为了获得多种微生物，必须徐璐根据不同的稀释度进行分离，选择培养的条件也要根据用途提供。样品涂层，实验时要在培养皿上做标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。如果得到2个以上的群落数在30300的板块，稀释工作就比较成功，如果同一稀释倍数的3个茄子重复群落数大不相同，实验就不正确，需要重新实验。、在计算微生物的培养和观察、菌落数时，每24h计算菌落数。选择殖民地数量稳定时的记录作为结果，防止培养时间不足而丢失的群落数量。培养其他微生物往往需要不同的培养温度。细菌：3037培养12d放线菌：2528培养57d真菌：在2528的温度下培养34d。微生

8、物的培养和观察，3 .结果分析和评估1。通过对比实验，培养物有杂菌污染的话，菌群数高。培养物混入不同的氮源，菌落形态多样，菌落数量高，难以选择分解尿素的微生物。2.提示：选择每板生长30300个菌的稀释梨，计算每个样品的细菌数最合适。相同稀释倍数的三个茄子重复殖民地数不能有很大差异。差异大意味着实验不准确。4，操作提示，无菌操作，标记，计划时间，5。课外扩展将酚红指示剂放在以尿素为唯一氮源的培养基中。培养某种细菌后PH值升高，指示剂会变红，表示细菌可以分解尿素。测定饮用水中大肠杆菌数量的方法是用细菌过滤器过滤一定量的水，然后在李红米蓝培养基中放入过滤器进行培养，大肠杆菌菌落呈黑色，描述水样中大

9、肠杆菌的数量。大肠杆菌是黑中心、有无金属光泽、大肠杆菌是李红美蓝阵地(EMB)的典型特征，在牙齿课题的知识总结：例2微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最激烈的时期是A调节器B代数机C镇流器D衰退期，分析：种内斗争是生态因素。种内斗争反映了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。生活空间充足，营养充足时，种内斗争的程度比较低。随着微生物个体数量的增加，各个体的生存空间减少，营养物质减少，各个体生存空间和资源的竞争也越来越激烈，种内斗争也越来越激烈。由此可见，稳定期种内斗争最为激烈。在衰退期，微生物数量开始减少，pH极不适合微生物的生存，次代斯产物积累到了较高水平，此时微生物的生存斗争主要是与武器环

10、境的斗争。答案：c，1。细菌群体生长规律的正确表达是()a .液体培养基中b .接种至少一种细菌。接种一种细菌。d .及时补充消耗的营养素。2.使用选择性培养基的目的是培养()a .细菌。b .培养细菌。C .大量繁殖所需的微生物D .表达某些微生物所需的碳源和氮源分别为()A.CO2和N2 B葡萄糖和NH3 C.CO2和尿素D .葡萄糖和尿素，实践训练，A，C，D，4 .将M3设定为牙齿样品群落数的估计值C .比较实验的主要目的是实验组的非测试因素与其他生物环境相比，土壤中微生物的数量最多，种类最多。(威廉莎士比亚、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物)5。为了培养、分离酵母菌，清除杂菌，培养基上有更多的氮源物质B .更多的碳源物质C .青霉素类药物d .高浓度盐，B，C，例3(2005年江苏)抗生素作为细菌感染治疗剂，治疗效率和巨大，其中青霉素的发现和应用具有划时代的意义。青霉素发