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文档简介

1、,如何解读细菌学检验报告,2/77,主要内容,抗菌药物敏感性试验和报告解读,正常菌群和致病菌,用药经验和目标药物使用,2011年新变化标本采集注意事项,3/77,细菌引起的感染诊断,各种临床标本的细菌培养,各种标本的厌氧培养,腹泻患者的血清降钙素原(PCT)检测,4/77,真菌引起的感染诊断,各种临床标本的真菌培养,真菌涂片检查,真菌D-葡聚糖检测, GM试验,脑脊液墨水染色,隐球菌荚膜抗原乳胶凝集:诊断和疗效监测,5/77,由其他病原体引起的感染诊断,肺炎支原体抗体的检测,肥大的检测,外部斐济反应,伤寒感染的检测,抗酸染色,抗酸杆菌的检测,例如,通过结核分枝杆菌的荧光定量聚合酶链反应检测肺炎

2、链球菌抗原,尿液,脑脊液,6/77,7/77,条件致病菌的几种身份,致病菌:能够在宿主中繁殖并侵入或破坏组织,引起感染的微生物。 病人被这种细菌感染,用细菌报告中建议的抗生素治疗是有效的。定殖细菌:(定殖:细菌或真菌在人体的某一部位定居,形成相对稳定的寄生状态,不会因外界机械冲击而完全离开原居住地。)在体内繁殖但不侵入或破坏组织的微生物。以下现象表明报告的细菌是定居细菌:在用细菌报告中指出的抗生素治疗后,细菌消失,感染症状仍然存在。或者由于细菌的广泛耐药性,临床经验联合用药后感染症状有所改善,但细菌仍然存在。污染细菌:在取样过程中污染非感染部位的细菌。根据其无效处理,可以排除多次检查。8/77

3、,药物敏感性试验和报告的解释,基本概念药物敏感性试验的临床价值报告的解释及相关问题,9/77,CLSI介绍,临床上最常用的CLSI标准文件是抗菌药物敏感性试验的标准文件。本文件是需氧细菌药物敏感性的标准指南。其主要内容包括药物选择(抗菌药物分组)、结果判断标准(断裂点)以及需氧细菌纸片试验和稀释试验的质量控制。根据细菌学、药动学和临床资料,CLSI设定并定期修正抗生素对不同细菌的敏感性断点,并通过断点将细菌分为敏感型、中间型和耐药型。最新版本的CLSI m100-s19,10/77,CLSI文件中的敏感性、中介作用和耐药性定义,clsi。抗微生物敏感性试验的性能标准;第十九次信息补充。M100

4、-S19ed。2009,28 (1) :21。11/77,敏感:的最高血药浓度是MIC的4倍,这与常规剂量是有效的。中介:血药浓度最高的最低抑菌浓度,增加剂量或药物浓度部位是有效的;耐药性:最高血药浓度MIC无效。12/77,CLSI推荐的药物分组,13/77,抗生素等效性和抗菌谱,抗生素等效性:它是指利用一种相关抗生素的试验结果来预测同一种抗生素在体内的抗菌活性。如果头孢菌素等同于其他头孢菌素,则头孢菌素的结果可用于预测其他头孢菌素。这一特性允许在不影响临床广泛选择其他抗生素的情况下检测少量抗生素。抗菌谱:指在“野生菌”状态下,当细菌在体内达到有效浓度时,可被抗生素抑制的细菌种类。这些细菌被

5、称为对这种抗生素天生敏感的细菌。未列入抗菌谱的细菌是天然耐药细菌。14/77,细菌耐药性,细菌耐药性:它是一种具有防御能力和生物表型的细菌对抗灭菌和抑菌的抗菌药物。天然耐药性(固有耐药性):耐药性是某种细菌的固有特性,称为细菌的天然或固有耐药性获得性耐药性是不断变化的(其频率与抗生素的使用有关),这是无法预测的,因此需要进行药物敏感性试验。15/77,常见细菌的自然耐药,金。细菌耐药性监测分析中应注意的问题。中国抗生素杂志,2005,30(12):763,16/77,3。报告解释及相关问题,报告简介药物敏感试验中特殊耐药机制的解释阴性报告结果的解释各种标本阳性结果的解释相关问题及可能的临床投诉

6、,17/77,18/77,19/77,药物敏感试验中的药物选择,药物敏感试验中的药物选择原则代表药物在药物敏感试验中的作用,20/77,药物敏感试验中的药物选择原则,代表性:所选药物应具有可预测性:药物选择可提示抗菌药物的使用或耐药机制。例如,金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药性表明对全内酰胺类抗生素的耐药性;革兰氏阳性球菌对庆大霉素有耐药性,表明对氨基糖苷类药物有耐药性。肺炎链球菌选择苯唑西林表明对青霉素有耐药性。例如,大肠和克雷伯氏菌药敏试验中选择三代头孢菌素(头孢他啶、头孢噻肟)或氨曲南可提示细菌是否产生超广谱-内酰胺酶;在肠球菌药敏试验中选择高浓度的庆大霉素或链霉素可以表明是否可以采用联合

7、用药方案。特殊性:选择抗生素浓度较高的感染部位。例如,可选择呋喃妥因作为尿路感染的尿样,可选择氯霉素和头孢呋辛作为中枢神经系统感染(可通过血脑屏障)的脑脊液。21/77,代表药物在药物敏感性试验中的代表性作用。代表性药物在药敏试验中的作用不仅限于药物本身,还代表相关的抗菌药物。22/77,代表药物在药敏试验中的预测作用,23/77,倪宇星,王。抗菌药物敏感性试验规范。上海:上海科学技术出版社,2002特殊耐药机制解读,常见特殊耐药表型ESBLs(产超广谱-内酰胺酶)MRS(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)包括MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)和MRSCN(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌)BL(产-内

8、酰胺酶)HLAR(高水平氨基糖苷类耐药肠球菌)AMPC酶碳青霉烯酶,25/77,特殊耐药机制CLSI规定抗生素和细菌的敏感组合不能报告,clsi。抗微生物敏感性试验的性能标准;第十九次信息补充。m100-s19ed。2009,28 (1) :23。26/77,对阴性报告结果的解释,阴性报告表明下列可能的非传染性疾病已经治愈且感染尚未治愈,但由于各种原因尚未检测到病原体。份标本采样和运输不当,采集、检验和保存不当,导致病原体死亡和污染。抗菌效果:经抗菌处理后,标本中含有大量的抗生素,病原菌受到伤害,不能正常生长;严重细菌:如嗜血杆菌、军团菌、淋球菌等。由于培养基营养成分差或培养条件有限,导致漏检

9、;特殊病原体:常规培养无法检测的病原体,如厌氧菌、结核分枝杆菌、衣原体、支原体、病毒等。有限检验技术:实验室条件和人员的技术影响。27/77,血液培养阳性结果的解释,临床因素,病史,体征,白细胞计数,影像学,病程,其他部位的培养结果,实验室因素,血液培养阳性率(阳性瓶数/总数),每套血液培养的阳性瓶数,微生物的阳性检测时间,菌株类型(如凝固酶阴性葡萄球菌),分子分型技术(如脉冲场凝胶电泳),传统方法(生化和抗菌谱)。包括白细胞和鳞状上皮细胞的数量/低功率,细胞是否含有细菌确定致病菌的存在、数量和种类。有助于初步报告、培养基的选择和培养结果的综合分析。29/77,痰培养阳性结果分析,有三种常见病

10、例。第一例:患者有典型的呼吸道感染症状,根据细菌报告,抗生素有明显疗效。这些患者痰标本的共同特征是:革兰氏染色:在痰涂片中发现大量白细胞,白细胞被大量形态一致的上呼吸道非正常细菌吞噬或伴有大量非正常细菌;痰培养:上呼吸道大量非正常细菌生长。痰培养与痰涂片一致。结论:报告的细菌为致病菌。30/77,痰培养阳性结果分析,第二例:患者有典型的呼吸道感染症状,根据细菌报告选择的抗生素无效,这些患者的痰菌检验有以下特点:痰涂片:大量白细胞,吞噬作用或伴有革兰氏阳性球菌(如葡萄球菌),革兰氏染色微球菌或杆菌(如厌氧菌),芽殖念珠菌,痰培养:大量阴性杆菌生长,痰涂片中发现大量细菌不生长或少量生长。痰涂片镜检

11、与痰培养结果不一致。结论:报告的细菌为定居细菌,占31/77。痰培养结果呈阳性。第三种情况:患者的感染已经基本治愈。痰检的目的是获得阴性报告,作为停止治疗和出院的证明。此类患者痰检特点:痰涂片:显示标本来自上呼吸道,有大量上皮细胞、大量阴性杆菌和少量白细胞。痰培养:大量阴性杆菌生长,最常见的是铜绿假单胞菌和不动杆菌。结论:报道的细菌为定居细菌。32/77,痰标本的细胞学筛查标准。近年来,推荐一种判断标本是否合格的简单方法是在显微镜下检查10个白细胞,其可被判断为基本合格并可用于细菌培养,特别是对于白细胞减少症患者。国家临床检验规程,第2版,第461页,第33/77页,“肺部细菌感染的病原体诊断

12、:意义”,对血液或胸腔液体进行培养,直到通过纤维支气管镜或人工气道吸引致病菌。(2) BALF(支气管肺泡灌洗液):细菌104cfu/ml(1-2) PSB(抗污染样品刷),PBALF(抗污染灌洗液):细菌103cfu/ml(1),34/77,引起肺部细菌感染合格痰标本培养引起疾病或条件致病菌,但生长与显微镜检查结果一致(肺炎球菌、流感、卡他莫拉菌),同一细菌在入院后3天内培养多次,35/77。肺部细菌感染病原体的诊断无意义,少量病原体如上呼吸道正常细菌和草链、鼻衄球菌、非致病性奈瑟氏球菌、白喉样杆菌等。()未生长符合上述“确认”和“36/77,解释尿液培养阳性结果,37/77,解释尿液培养阳

13、性结果,下列因素可减少尿液中的细菌数量,判断结果时应注意:使用抗生素,细菌生长受到抑制;尿液稀释,尿液比重8.5,细菌生长受阻;尿频时,细菌在膀胱内停留时间短,菌落数减少;尿道口消毒剂混入标本影响细菌繁殖,减少菌落数量;不同种类的细菌有不同的生长率、不同的营养需求和不同的菌落数。,38/77,粪便培养阳性结果的解释,腹泻的原因:1。细菌感染。食物中毒。菌群失调,39/77,抗生素相关性腹泻的实验室诊断,抗生素相关性腹泻的本质是肠道菌群失调的细菌检查现象:1 .志贺氏菌和沙门氏菌没有生长;2.真菌没有生长;3.少量大肠杆菌没有生长或生长;4.其他阴性杆菌或阳性球菌增多,这是肠道菌群失调的现象,4

14、0/77。注意原始标本的直接涂片,对血培养涂片的痰涂片和分泌物涂片的脓液进行分类。意义:全导航,41/77,42/77,43/77,44/77,45/77,重视原始标本的直接涂片。根据培养结合涂片的结果,判断从定殖细菌或病原菌的尿培养物中分离出三种以上的细菌,或者分离出未被定义为病原菌的细菌,例如凝固酶阴性葡萄球菌和革兰氏阳性棒状杆菌,并且没有看到涂片。应该在报告中指出,这可能是被污染的细菌结合临床表现。凝固酶阴性葡萄球菌是从结膜拭子中分离出来的,但在涂片上没有发现,这可能是被污染的细菌。建议重新发送样本。凝固酶阴性葡萄球菌或革兰氏阳性杆菌是从前列腺液样品中分离出来的,涂片上没有发现,可能是被

15、污染的细菌。建议重新发送样本。当在涂片中看到细菌并且存在细菌摄入现象时,在培养过程中分离的细菌可以被认为是致病菌。46/77,相关问题2:直径越大,药物越好吗?不一定。因为不同的药物对相同的细菌有不同的断点,相同的药物对不同的细菌也有不同的断点,如果细菌有一些特殊的耐药机制,即使它们在体外是敏感的,也应该报告耐药。此外,还应考虑药代动力学和耐受性。因此,我们不能简单地比较直径值,认为直径越大,药物越好。药物敏感性的直径仅表示药物对某种细菌菌株的抗菌效果。直径越大(离中间值越远),药物对相应致病菌的作用越强。只有同一种药物才能与同一种细菌相比较。直径越小,耐药性越高。47/77,相关问题3所有报

16、告的细菌都是致病菌吗?不一定。原因如下:报告的细菌为污染细菌或定居细菌,细菌培养结果的临床意义与所采集的样品有关。如果是无菌标本如血液,则有很大的临床意义,但即使血液培养阳性,也可能是被污染的细菌。有些标本容易被污染,例如,痰标本容易被喉咙中携带的细菌污染,尿液培养物容易被下尿道和尿道口的外来细菌污染。它可能是由于使用抗生素后菌群的变化或菌群的不平衡引起的。特别地,当最初的感染是由多种细菌引起时,优势细菌可能在经过一段时间的治疗后变成优势细菌,或者真菌感染可能在经过广谱抗生素治疗后发生。当存在多种病原体时,由于不同的生长率和不同的营养需求,培养结果不能真实地反映病原体的种类和数量。48/77,

17、相关问题4:为什么痰涂片结果有时与痰培养结果不同?因为痰标本的选定部分在培养和涂抹时不一致;一些快速生长的细菌并不占很大比重,但由于其生长速度快,营养需求低,在培养过程中会很快成为优势菌,掩盖其他细菌的生长。从收集到接种的时间太长,导致一些挑剔的细菌死亡。在涂片中只能看到细菌的残余,而不能看到活的细菌。49/77,报告方法1,血液培养三级报告系统:1。阴性报告:培养两天后,发布初步报告:培养两天后,没有细菌生长,培养继续;最终报告时间为5天;2.阳性报告:在机器报警当天,将根据以下情况给出初步的临床形态学报告,51/77,对细菌室的临床投诉阳性率过低,且临床符合率较差。分析原因是标本采集和检验不规范,这是关键原因!不合

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