2019_2020学年高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1.pptx

1、,专题5DNA和蛋白质技术,课题1DNA的粗提取与鉴定,1提取DNA的基本思路： (1)生物大分子的提取：选用一定的_方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。,一、DNA粗提取的方法与鉴定的方法,基础梳理,物理或化学,(2)DNA的粗提取：利用DNA与_等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。,RNA、蛋白质和脂质,2提取DNA分子的基本原理： (1)利用DNA的溶解性。 在NaCl溶液中的溶解特点： a在NaCl浓度为2 mol/L时_，而部分蛋白质发生盐析而生成_，通过过滤可除去部分_。 b在NaCl浓度为0.14 mo/L时_，过滤可除去溶解的部分_。,DNA溶解,沉

2、淀,蛋白质,DNA析出,蛋白质,在酒精溶液中的溶解特点：DNA不溶于_溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于_溶液。利用这一原理，可将DNA与蛋白质进一步分离。,酒精,酒精,(2)利用DNA的耐受性方面的性质。 蛋白酶能水解_，但对DNA没有影响。 大多数_不能忍受6080 的高温，而DNA在80 以上才会变性。 洗涤剂能够瓦解_，但对_没有影响。,蛋白质,蛋白质,细胞膜,DNA,二苯胺,蓝色,1选取实验材料：选取富含_的组织，如鸡血细胞、菜花等。,二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计,DNA,2具体操作步骤： (1)破碎细胞，释放DNA：如用鸡血细胞，置于清水中使之_并用玻璃棒_搅拌，过滤取滤液。

3、,吸水涨破,单向,(2)去除滤液中的杂质。 高浓度的_溶解细胞核内的DNA。 加蒸馏水降低NaCl溶液的浓度，使_、过滤。 将DNA丝状物再溶解、过滤。 (3)DNA的初步纯化：向滤液中加入体积分数为_溶液进行提纯。,NaCl溶液,DNA析出,95%的冷酒精,二苯胺,蓝色,1不同浓度的NaCl溶液对DNA的溶解度一定不同。 解析DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最小，低于或高于此浓度可能会出现DNA溶解度相同的情况。 答案,即时反馈,2冷却的体积分数为95%的酒精溶液能够溶解DNA中含有的蛋白质杂质。 解析在冷却的体积分数为95%的酒精溶液中DNA能析出，但蛋白质杂质能溶解。

4、 答案,3洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。 解析洗涤剂能瓦解细胞膜，使DNA从细胞中释放出来，但是不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。 答案,4将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝。 解析将DNA丝状物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，沸水浴后冷却可观察到蓝色出现。 答案,5加入酒精溶液后，用玻璃棒搅拌DNA滤液时，应顺时针和逆时针交替，这样搅拌更充分。 解析搅拌时，应缓慢沿一个方向搅拌，防止DNA断裂，以便获得较完整的DNA。 答案,6用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少。 解析在实验过程中用玻璃棒缓慢搅拌滤液的目的是以免加

5、剧DNA分子的断裂，并不会导致DNA含量减少。 答案,1DNA溶解性原理：结合DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线，分析DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度有何特点。,知识点一DNA粗提取与鉴定的方法,互动探究,(1)低于0.14 mol/L时： _。 (2)高于0.14 mol/L时： _。,DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐降低,DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐升高,2DNA粗提取的操作思路 DNA与蛋白质在NaCl溶液中的溶解情况如下表。,溶解,溶解,探讨通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出的思路是：用_的NaCl溶液溶解DNA，然后过

6、滤获得_，能够去除_；调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14 mol/L，使DNA析出，然后过滤获得_，能够去除_。,2 mol/L,滤液,该条件下不能溶解的杂质,析出物,该条件下能够溶解的杂质,3DNA不溶于_，而细胞中的某些_则溶于酒精溶液，此特点对于提取DNA的作用是_。,酒精溶液,蛋白质,将DNA和蛋白质进一步分离,DNA粗提取的三个原理 (1)利用DNA随NaCl溶液浓度的不同而溶解度不同的原理可粗提取DNA。 (2)利用DNA不溶于酒精，而细胞内的其他许多物质可溶于酒精的原理可进一步提纯DNA。 (3)利用DNA对酶和高温的耐受性可以去除蛋白质杂质。,核心归纳,1下表是关于DNA

7、粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用，表述正确的是,对点训练,解析柠檬酸钠溶液的作用是防止血液凝固；蒸馏水与鸡血细胞混合，蒸馏水的作用是让鸡血细胞吸水涨破；蒸馏水加入溶解有DNA的NaCl中，此时蒸馏水的作用是将NaCl溶液的物质的量浓度稀释至0.14 mol/L，从而析出DNA丝状物；将粗提取之后的DNA加入冷却的酒精中以纯化析出含杂质较少的DNA丝状物。 答案C,2对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是 A利用DNA能溶而蛋白质不溶于冷酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离 B在用花菜作实验材料时，研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜 C在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的

8、作用，可提高DNA纯度 D利用DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最大的特点，可将DNA与杂质分离,解析由于DNA不溶于酒精，而其它杂质如蛋白质可以溶于酒精，因此利用体积分数为95%的冷酒精溶液将DNA和蛋白质分离，A错误；提取分离DNA时，加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜，B错误；利用酶的专一性，蛋白酶只能将蛋白质分解，而不能分解DNA，因此在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离，从而提高DNA纯度，C正确；DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小，D错误。 答案C,1实验材料的选取： 哺乳动物的红细

9、胞和鸡的血液提取DNA效果更好的是_。原因是 _。,知识点二DNA的粗提取与鉴定的实验设计,互动探究,鸡的血液,鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得，而哺乳动物的红细胞无细胞核，不含DNA,2实验操作分析： (1)在鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是_。 (2)提取菜花的DNA时，加入洗涤剂和食盐的目的是： 加入洗涤剂的目的： _。 加入食盐的目的： _。,使鸡血细胞吸水涨破,洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放,食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解,(3)探讨在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的目的：,使血细胞过度吸水而破裂，以便核物质溶解,使NaCl溶液浓度降至0.14

10、_mol/L，以使DNA析出,(4)实验过程要充分地搅拌和研磨，如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？ 提示：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，导致看不到丝状沉淀物，用二苯胺鉴定不显示蓝色。,(5)实验过程中应如何使用玻璃棒搅拌？为什么？ 提示：搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部，搅拌要轻缓，并向一个方向搅拌以便获得较完整的DNA分子。,DNA粗提取与鉴定实验成功的关键 (1)破碎细胞应彻底充分。 (2)对提取的含杂质较多的DNA进行提纯时，所用的酒精必须经过充分预冷后才能使用。,核心归纳,(3)实验过程中，搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，并向一个方向

11、搅拌以便获得较完整的DNA分子。 (4)由于玻璃表面带电荷，DNA易被吸附于玻璃表面，故实验中应尽量不使用或少使用玻璃器皿，这样可以提取到较多的DNA。 (5)二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。,3图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列叙述不正确的是,对点训练,A图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同 B图1中完成过滤之后保留滤液 C图2中完成过滤之后弃去滤液 D在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质,解析图1、2中加入蒸馏水稀释的目的不同，前者是使细胞吸水涨破，后者是析出DNA，A错误；图1中加入蒸馏水使血细胞吸水涨破，完成过滤之后获取含DNA的滤液，所以要保留滤液，B正确；图2中加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低，DNA析出，所以完成过滤之后弃去滤液，C正确；在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉，其中的木瓜蛋白酶能分解DNA中的杂质蛋白，从而有助于去除杂质，D正确。 答案A,4下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是 A酵母菌和菜花均可作为提取DNA的材料 BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水 C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物 DDNA