抗原抗体反应的类型PPT课件.ppt

1、抗原抗体反应的类型，可溶性抗原和对应的抗体的结合引起的沉淀反应(precipitation )； 颗粒性抗原与对应的抗体结合引起的凝集反应(agglutination )； 抗原抗体结合后激活补体引起的细胞溶解反应(cytolysis )； 细菌外毒素和病毒与对应的抗体结合产生的中和反应(neutralization )； 标记免疫的抗原抗体反应。 每种反应类型都包含几种实验技术。 第三章免疫原和抗血清的制备、3、抗原和抗体是免疫学检查的两个重要因素。 也是整个免疫反应的基本条件。 第一节免疫原的制备免疫原是对机体诱导抗体和致敏淋巴细胞在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。 颗粒性

2、抗原包括人和各种动物细胞抗原、各种细菌抗原和寄生虫抗原。 血细胞抗原的制备比较简单，常用细胞抗原为绵羊红细胞，用该细胞制备溶血素，直接取新鲜绵羊红细胞，用无菌生理盐水洗涤3次(每次2000rmin 10min离心)，最后配合106ml浓度的细胞悬液即可应用。 细菌抗原多为液体或固体的纯粹培养物，经集菌后处理。 一、颗粒性抗原的制备、5、细菌鞭毛抗原需要有动力菌株，菌液用0.30.5甲醛处理，菌体抗原加温100加温去除22.5h鞭毛抗原应用。 毒素抵抗的原则是杀菌后必须加入0.5l氯化钙溶液。 寄生虫和真菌抗原除了用破碎法加工粗提外，多适当纯化。 根据细胞膜的不同，也有变成颗粒性抗原的。 颗粒抗

3、原悬浊液呈浊水状或乳浊状，多采用静脉内免疫法，很少添加佐剂进行皮内注射。 (1)组织和细胞粗抗原的制备.用于制备组织细胞抗原的组织需要在新鲜或低温下保存。 一旦获得器官或组织材料，必须立即去除表面的被膜或结缔组织和一些大血管。 脏器用生理盐水注入，去除血管内残留的血液和有形成分，用含有0.5LNaN3的生理盐水冲洗血迹和污染物。 将洗净的组织切成小块，粉碎。 粉碎方法包括用快速组织捣固机法研磨法、二、可溶性抗原的制备和纯化、7、2组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备抗原的细胞包括正常细胞、传代细胞或病理细胞(例如肿瘤细胞)。 细胞抗原可分为膜蛋白抗原、细胞质抗原(主要为细胞器)、细胞核和核膜抗原

4、3种成分。 3种抗原的制备需要破碎细胞，其方法如下。 (1)反复冻融法：将细胞或组织整体在冰箱内冻结，然后在室温下融解。 这样重复2次，大部分组织细胞和细胞内的粒子都能冻融。 (2)超声波破碎法：常用于微生物和组织细胞的处理。 (3)自溶法：利用组织和微生物的自酶系统，在一定的pH和温度下使细胞裂解。 自溶的温度，动物组织细胞总是选择04，微生物总是选择室温(2225 )。 自溶多添加甲苯和氯仿等少量防腐剂，NaN3会抑制酶的活性，因此请不要使用。 (9)酶处理法：溶菌酶、蜗牛酶、纤维素酶等，在一定条件下能消化细菌和组织细胞。 在溶菌酶一般碱性条件下，PH8.0能作用于革兰氏阳性菌细胞壁的溶菌

5、，该方法适用于多种微生物。 酶促细胞具有作用条件温和、内容物成分不易破坏、细胞壁破坏程度可控等特点。 表面活性剂处理方法：在适当的温度、pH值和低离子强度条件下，表面活性剂能与脂蛋白形成微泡，改变膜的溶解或渗透性。 常用的表面活性剂有十二烷基硫酸钠(SDS阴离子型)、二乙胺乙酰溴(阳离子型)、聚山梨糖醇(非阳离子型)、苯溴胺等。 该方法常用于细菌破碎，作用较温和。 提取核酸时，一般用这种方法破碎细胞。(11 )、11 )、(2)离心分离法离心分离法最常用于亚细胞成分和大分子蛋白质的分离，是进一步精制的第一次筛选。 (3)选择性沉淀法的选择性沉淀法是使用各种沉淀剂、或在某些条件下促进抗原成分的沉淀的方法。 核酸除去法盐析沉淀法(1)抗原的粗筛(2)提取球蛋白(3)抗原的浓缩、12、有机溶剂沉淀法水溶性非离子性聚合物沉淀法常用聚合物为聚乙二醇(Polyethyleneglycol )的水溶性聚合物沉淀蛋白质的机理尚未充分明确大致机理是聚合物和蛋白质形成共沉淀物，聚合物和蛋白质之间发生水的再分配，聚合物和蛋白质形成复合体。 凝胶过滤也称为分子筛色谱，凝胶是三维空间中具