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文档简介
1、教学目标,知识目标 1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白 2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理 能力目标 体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤 。,2020/8/8,教学重难点,情感目标 初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神 教学重点 血红蛋白提取的过程 教学难点 血红蛋白提取的原理,2020/8/8,分离蛋白质的原理,根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附的性质、对其他分子的亲和力等等,可以用来分离不同蛋白质。,2020/8/8,凝胶色谱法,凝胶是一些多糖类构成的内含许多贯穿的通道的微小多孔的球体。
2、,凝胶色谱法原理,相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。 相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,在凝胶的外部移动,路程较长,移动速度较慢。,2020/8/8,缓冲溶液,指在一定的范围内,能对抗外来少量 强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用,具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。,2020/8/8,概念:带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。,琼脂糖凝胶电泳,分类:,聚丙稀酰胺凝胶电泳,电泳,样品处理及粗分离,2020/8/8,1.血液由血浆和各种血细胞构成。 2.血红蛋白包含四条肽链。 3.本实验所用材料:哺乳动物的红细胞。 4.采集血液时加入柠檬酸钠。,一:红细胞的洗涤一,1.目的:去除杂蛋白 2.方法:低速短时间离心 3.洗涤时加入试剂:5倍体积的生理盐水,2020/8/8,二:血红蛋白的释放,1.蒸馏水作用:使红细胞吸水破裂。 2.甲苯作用:溶解细胞膜,加速细胞破裂。,2020/8/8,三:分离血红蛋白溶液,2020/8/8,透 析,1.目的:除去样品中分子质量较小的杂质。 2.原理:透析袋
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