酶动力学和抑制作用.ppt

1、、Enzyme kinetics and inhibition酶动力学和抑制作用、底物浓度对酶反应速度的影响、低底物浓度时：反应速度与底物浓度成正比，表现为一次反应特征。 随着基质浓度的升高，反应速度不成比例地加速的反应是混合水平的反应。 基质浓度达到一定值反应速度达到最大值(Vmax )时，此时基质浓度进一步增加，反应速度不增加，显示零水平的反应。 梅曼模式Michaelis-Menten model，Km:v=1/2vmax时的基质浓度，km值：酶反应促进速度达到最大反应速度的一半时的基质浓度，其单位为mol/L，米氏常数km，(2)Km值为固定的基质、一定的温度和pH (3)一般来说，1

2、/Km可以近似表示酶对基质的亲和力的大小，1/Km越大表示亲和力越大。 (1)Km是酶的特征常数，仅与酶的性质有关，与酶的浓度无关，如果同一酶有几个基质就有几个Km值，其中Km值最小的基质一般称为该酶的最佳基质或天然基质。line weaver-burkplotlineweaver-Burk图、Enzyme inhibition酶的抑制、不可逆可逆可逆可逆竞争性非竞争性主要是酶的必备基(抑制作用与失活作用不同)产生抑制作用的化合物称为抑制剂。 (抑制剂与改性剂不同)，不可逆抑制作用定义了抑制剂与酶的活性中心的功能基团共价结合，抑制酶的活性，不能通过透析或超滤等物理方法去除抑制剂而恢复酶活性。

3、不可逆抑制作用(irreversible inhibition )、E IEI，例： DFP(DIFP )对乙酰胆碱酯酶的抑制，可逆抑制作用抑制剂与酶蛋白非共价结合，引起酶活性的暂时丧失。 抑制剂通过透析等物理方法去除，能够恢复酶的活性的一部分或者全部。 根据抑制剂与酶结合的情况，可以分为：竞争抑制非竞争抑制、2、可逆抑制作用、(1)竞争可逆抑制作用的抑制剂结合到活性中心时竞争性的抑制通常可以通过增大基质浓度即提高基质的竞争力来消除。 s、竞争可逆抑制图、I、例：丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用、竞争抑制作用动力学方程式的探讨、与a、标准米方程式相比，在b、I 0时，方程式还原为米方程式。 (2

4、)非竞争可逆抑制作用、E S ES ESI、E I EI ESI、非竞争性酶与抑制剂结合后，也可与基质结合的酶与基质结合非竞争抑制剂与酶活性中心以外的基团结合。 这样的抑制作用不会因提高基质浓度而减弱，非竞争性可逆抑制图、非竞争性抑制作用动力学方程讨论、与a、米方程比较，取b、I0、I、c、方程的倒数，进行双倒数图、可逆抑制作用的动力学、a .竞争性抑制。b .加入非竞争抑制剂、非竞争抑制剂、无抑制剂、-1/Km、1/v、1/Vmax、非竞争抑制剂后，km没有变化，Vmax减少。 1/s，可逆抑制的动力学比较，抑制类型Vmax Km无抑制剂Vmax Km竞争抑制不变大非竞争抑制不变，3，一些重

5、要的抑制剂及其实际意义，(1)不可逆抑制剂： E IEI，或者有机磷化合物，化学X: -F，-CN等这些有机磷化合物是部分专业的有机磷化合物中经常使用DFP和有机磷杀虫剂，如1605、敌百虫、敌畏、乐果等。 巯基酶抑制剂、a、烷基化剂：例如ICH2COOH、ICH2CONH2等，b、有机水银、有机砷化合物、金属酶抑制剂、氰化物、硫化物、一氧化碳等金属酶抑制剂。 含有Ag、Cu2、Hg2、Pb2等金属盐的重金属抑制剂可以使很多酶失活。 (2)可逆抑制剂，最常见的是竞争抑制剂，例1 :次磺胺药中的对氨基苯次磺酰胺，例2 :抗癌药5 -单氟尿嘧啶，控制酶活性的调节， 反馈规则反馈调节反馈抑制序列反馈

6、抑制、Allosteric enzymes变异酶、变异效应海藻酸转氨基甲酰酶atcaseaspartatetranscarbamylase，(1)ATCase催化剂的化学反应和atcase的动力学曲线，(2)ATCase活性调节的机理，有催化活性的序列，无催化活性的序列， revve Phosphorylation磷酸化作用-protein kinase蛋白激酶Dephosphorylation脱磷酸化作用-protein phosphatase蛋白磷酸酶， proteolyticaa酶原的活化酶原必须在一定条件下去除一个或几个特殊的肽键，从而使酶的构象发生一定的变化，不能被活化，这一过程称为酶原活化。1、胃蛋白酶原(pepsinogen )的活化、2、胰蛋白酶原(trypsinogen )的活化、3、胰蛋白酶原(chymotrypsinogen )的活化，为什么直接活化的本质：酶的活性中心形成或暴露的过程意义：自我Blood clotting cascade凝血