流化床制粒技术在胶囊成型工艺中的应用.ppt

1、第43届药物制剂论坛暨胶囊制剂技术专题研讨会,流化床制粒技术在胶囊成型工艺中的应用,1、流化床制粒技术在中药成型工艺中的应用 巴戟天寡糖胶囊新工艺、新规格研究2、流化床粉末包衣技术在掩味工艺中的应用 盐酸苯环壬酯口腔崩解片的研究3、流化床微丸包衣技术在小肠定位中的应用 盐酸二甲双胍肠溶胶囊的研究4、流化床微丸包衣技术在结肠定位中的应用 结肠息肉预防和治疗的美洛昔康肠溶胶囊的研究5、流化床微丸包衣技术在肠道定速中的应用 酒石酸美托洛尔缓释胶囊的研究,汇报纲要,一、流化床制粒技术在中药成型工艺中的应用,研究的趋势：中药现代化已成为提升我国中药制造水平以及将中药推向世界的必由之路。中药提取物的成型工

2、艺研究是中药现代化的内容之一。多糖类的中药提取物占据中草药研究内容的一大部分。 问题的提出：中药多糖普遍存在严重的吸湿问题，巴戟天寡糖是这一问题典型的代表，采用传统工艺，必须进行疏水化处理并用大量的赋形剂进行稀释，才使制剂成型成为可能。这样客观上造成制剂的剂量偏大，增加了成本和服药量，与制剂“三小”、“三效”的现代发展趋势不相称。 解决的方案：流化床是一种现代化的药物制剂工艺设备，由于它具有独特的制药功能而在中药造粒上有重要意义。通过该技术手段制备颗粒，可将传统的混合、制软材、制粒、干燥、整粒等单元操作于一体，一次成型。更为重要的是，采用流化床顶喷制粒技术，可使中药多糖提取物无需浓缩、固化，在

3、严格控制溶液密度的前提下，直接以雾滴的方式喷于赋形剂表面上，这样可能避免多糖遇水变硬的难题，在赋形剂 用量较少的情况下，可能会顺利成型。 实验的目的：本研究针对上述问题，以巴戟天寡糖为多糖药物模型，探索多糖提取物的流化床成型工艺，重点考察该工艺的可行性以及赋形剂的最小用量限度。,巴戟天寡糖胶囊是我所开发的具有自主知识产权的中药新药，有很好的抗抑郁药理效果。该品种现有制剂成型工艺技术采取的是传统湿法制粒技术。要经过提取、浓缩、固化、疏水化、制粒、干燥、整粒、灌装等多个步骤，操作复杂，成品率低，而且赋形剂用量大，患者的服药粒数是3粒/次，3次/天。 本文在探索流化床一次成型新工艺的同时，看能否将巴

4、戟天寡糖胶囊的服药粒数降低至1粒/次，增加患者的依从性。,前 言,一、流化床成型工艺：优化工艺参数如进风温度、 进风压力、喷液速率、雾化压力等。 二、巴戟天寡糖胶囊新规格及其相关性能考察,实验部分,材料： 巴戟天水提取物：北京同仁堂股份有限公司 微晶纤维素：PH102，日本旭化成株式会社 仪器： 流化床：GPGC1型，德国GLATT公司 粉末基础物性测定仪：天津药物研究所,一、流化床成型工艺研究,考察参数：进风温度、进风压力、喷液速率、雾化压力 考察指标：颗粒流动性指数和粒经大小（平均粒经） 实验设计：单因素平行对照。 其它固定参数：喷嘴直径1.0mm，制粒前流化风量0.30bar，流化时间2

5、5min。干燥温度50，干燥风量0.35bar0.42bar，干燥至物料温度30，过滤袋每分钟抖动6次，每次持续5秒。,指标的确定及实验设计,工艺合理性评价指标的确定,影响胶囊质量的关键工艺指标是颗粒的流动性及颗粒的粒经大小，它直接影响胶囊能否顺利灌装以及灌装能否均一。本文采用流化床进行巴戟天寡糖胶囊成型工艺研究，以颗粒的流动性指数(flowability lndex, FI值)和颗粒的粒经大小（平均粒经）作为指标来反映工艺的合理性。,颗粒的流动性指数是休止角、抹角、压缩度、均一度等各参数的统计学加和值： 休止角：休止角是颗粒动态摩擦系数的反应，它与粒子形态、粒子含水量、表面电性质、粒度分布情

6、况等因素有关，休止角小的颗粒流动性好。 抹 角：抹角反应的是物料静态摩擦系数的大小，抹角越大，说明颗粒间相互作用力越大，流动性越差。 压缩度：压缩度反应的是可伸缩性和填充性，其值越小则填充性能越好。 均一度：颗粒大小的均匀程度用均一度值表现，均一度一般1，越接近1越好，均匀性好的颗粒。,流动性指数(FI值),上述参数只是从某一个侧面反映了微粒的流动性能，只有将上述参数综合考虑，才能对粉末的流动性有一个全面客观的评价。利用统计学知识将上述各参数进行标准化，用一个指数代替参数的具体数值，将各个参数对应的指数相加得到了一个总的指数，即流动性指数(FI值)。 FI值是综合了休止角、抹角、压缩度和均一度

7、结果在内的一个人为规定指数，它是对颗粒流动性全面客观的反映。FI值越高，流动性越好。当FI60时，颗粒流动性较差，胶囊灌装时可能会出现“架桥”现象，影响胶囊装量的均一性。,流动性指数(FI值),流动性测定方法,颗粒的流动性需要通过粉体物性测定仪的测量得到。它是休止角、抹角、松密度、轻敲密度、压缩度、均一度，经量化评估后得到的综合结果。 （1）休止角(Angle of repose)：采用固定圆锥底法，取一定量的待测颗粒，在一定振动强度下使颗粒通过漏斗均匀流出，直至获得最高的圆锥体为止，测量圆锥体斜面与平面的夹角即得，重复三次，取其平均值。 （2）抹角 (angle of spatula)：待测

8、颗粒置于测定仪上，将升降台缓慢降下，测定物料斜面与抹板的角度，给予一固定强度的振动后，再次测量这一角度，平均两值即为抹角，重复实验三次，取平均值。,流动性测定方法,（3）松密度 (Aerated bulk density)：在一定的振动频率下，使物料均匀流入100ml杯中，用刮片刮掉杯上多余的物料，称重，物料的重量除以100为松密度。 （4）轻敲密度 (Packed bulk density)：将100ml杯子套上杯套，加入物料，置撞击台上撞击180次，边撞击边加入物料，取下杯套，刮下多余颗粒，称重，该重量除以100即为轻敲密度。 （5）压缩度 (Compressibility)：压缩度按下面

9、公式计算而得： 压缩度=（1 松密度 / 轻敲密度）100%,（6）粒度分布(Distribution of particle size)及均一度(Uniformity)： 将一系列筛网按孔径大小置于粉末物性测定仪的振动台上，取10g待测物料，在100HZ的机械强度下振动10min，测定不同目筛网上滞留物料的重量，计算累积筛下重量百分比，在粒度分布图上得到累积筛下重量百分比为10%、50%、60%的粉体粒径D50、D10、D60。 D60/D10的值为均一度，D50为其平均粒径。,流动性测定方法,工艺参数优化,进风温度的优化 进风压力的优化 喷液速率的优化 雾化压力的优化,进风温度的优化,操作

10、过程： 取微晶纤维素400g，以巴戟天水提取物为粘合剂，上药量按巴戟天寡糖与辅料2：1的比例计。 进风温度分别设定为45、40、35。 其它因素固定在：喷液速率为20rpm，雾化压力为2.0bar，进风量0.350.45bar。 结果如下:,进风温度的优化,Tab. 1 The Effects of Inlet Air Temperature on Granule Properties,通过对进风温度的考察，可以看到随着进风温度的降低，平均粒径逐渐增加。当进风温度为35时，颗粒粒径最大，同时颗粒的均一度值最大，说明粒径均匀性差。此时，FI指数最低，表明水分的蒸发效率不足，一部分颗粒发生粘连。当

11、进风温度增高至40以上后，蒸发效率变高，均一度值明显减小，流动性变好。结果见表1。 可见，进风温度设定为4045时，可获得较为理想的颗粒。,操作过程： 取微晶纤维素400g，以巴戟天水提取物为粘合剂，上药量按巴戟天寡糖与辅料2：1的比例计，进风压力设定为2bar-3bar、3bar-4bar、4bar-5bar，其它因素固定在： 进风温度为40，喷液速率为20rpm，雾化压力为2.0bar。流化制粒。 结果如下：,进风压力的优化,进风压力的优化,Tab 2 The Effects of Air Volume on Granule Properties,进风压力决定着物料的流化状态，流化状态又影

12、响着物料混合的均匀性及颗粒形态的好坏。由于气源压力的变化和过滤袋的振动，进风量会在一定范围内波动。本次实验结果见表2。 在低进风压力：2bar-3bar时，风量过低，物料没有被充分流化，上下层物料的润湿几率不同，同时由于热量没有即时排出，制粒之初，物料温度及出风温度一直居高不下，随着水量的加入，最终物料在锅底形成浆状物。在高进风压力：4bar-5bar时，风量太大，粉末间难于充分接触，导致颗粒的粒经偏小，均一度较差，流动性偏低。实验表明： 当进风压力固定在 3bar-4bar时对制粒最为有利。,喷液速率的优化,操作过程： 取微晶纤维素400g，以巴戟天水提取物为粘合剂，上药量按巴戟天寡糖与辅料

13、2：1的比例计，喷液速率设定为15rpm、20rpm、25rpm、30rpm，其它因素固定在：进风温度为400C，雾化压力为2.0bar，进风压力3-4bar。 结果如下：,喷液速率的优化,Tab3 The Effects of Spray Rate on Granule Properties,不同的喷液速率对制粒影响的结果见表3。 随着喷液速率的增加，流动性指数变化并不明显，但粒径明显增大。当喷液速率达到30rpm时，物料过湿而发生部分颗粒相互粘连现象。其原因可能是在喷液速率过高时，成颗粒的芯核增长速度过快，芯核形成后，流化时间过短，颗粒干燥不彻底导致相互粘连。为控制芯核的增长速度，防止粘连

14、，应采取从15rpm至25rpm逐步增加喷液速率的措施，使粒子获得较佳的表面形态。,操作过程： 取微晶纤维素400g，以巴戟天水提取物为粘合剂，上药量按巴戟天寡糖与辅料2：1的比例计，雾化压力设定为2.5bar、2.0bar、1.5bar，其它待考察因素固定在： 进风温度为400C，喷浆泵转速为20rpm，喷液量200ml，进风量34bar。 结果如下：,雾化压力的优化,雾化压力的优化,Tab4 The Effects of Spray Nozzle Pressure on Granule properties,雾化压力决定着喷雾液滴的大小，雾化压力越大，液滴被剪切得越细小。制粒对喷雾液滴的要

15、求比较严格，结果见表4。当雾化压力为 1.2bar时，喷雾状态不佳，粘合剂多以大液滴形式从喷嘴射出，颗粒粒经增大且均一度较差，颗粒流动性指数偏小。当雾化压力在1.5bar时，物料表面可被液滴均匀润湿，颗粒的平均粒经变小，均一度变好，流动性指数增高。当雾化压力在2.0bar时，颗粒的粒经变小，均一度变好但不明显，流动性指数增高但不显著。当雾化压力升高至2.5bar以后，喷嘴压力过大，物滴喷射时冲击力太强，粘合剂密集于底筛中央，导致物料粘筛，通过筛网的风量下降，制粒难于继续进行。 结果表明：比较合理的雾化压力应在1.5bar2.0bar范围内。,本文通过对流化床工艺参数进行单因素考察，优化出中药巴

16、戟天寡糖胶囊颗粒一次成型的主要工艺参数: 进风温度： 40 45 进风压力： 3bar 4bar 雾化压力: 1.5bar 2.0bar 喷液速率: 15rpm 25rpm 选用上述工艺参数可以制备出粒经均一的巴戟天寡糖颗粒，能够顺利完成胶囊的灌装。,小 结,二、巴戟天寡糖胶囊新规格及其相关性能考察,胶囊的基本性能考察,裸置胶囊吸湿性比较,可见，新规格胶囊在减小赋形剂用量的前提下，样品的引湿性略有增大，须在包装上采取严格的密封措施。,二、巴戟天寡糖胶囊新规格及其相关性能考察,泡罩密封包装胶囊吸湿性比较,上述实验表明：150mg巴戟天寡糖胶囊新规格，既能缩短生产时间，减小赋形剂用量，又能改善胶囊

17、的崩解，提高装量的准确度。在同样的包装条件下，达到和旧规格同样的防潮效果。,可见，新规格胶囊在同样的包装条件下，其引湿性和旧规格相当。在泡罩密封包装的条件下，两者均能达到较好的防潮效果。,二、巴戟天寡糖胶囊新规格及其相关性能考察,本文探索了流化床顶喷制粒技术在中药制剂成型工艺上的应用。以巴戟天水提取物为中药模型，优化出流化床顶喷制粒的工艺参数，并对巴戟天寡糖新规格进行相应性质的考察，显示出该工艺在中药造粒上的实用性：,本文研究和优化出生产周期短、辅料用量少、颗粒均一而且质量稳定的巴戟天寡糖胶囊的流化床一次成型新工艺，该工作对于提高中药制剂的工艺水平积累了经验，为进一步开发和推广该技术奠定了一定

18、的基础。,结 论,流化床制粒技术 在中药制粒上的应用成果,品 名：盐酸苯环壬酯口腔崩解片 申请分类：新药 注册分类：化药5(新剂型) 规 格：2mg 适 应 症：用于预防晕车、晕船、晕机 进 度：完成临床前研究,二、流化床粉末包衣技术在掩味工艺中的应用,它的出现被誉为是药品技术的一大革命，即，固体制剂具有液体制剂的起效速度，且服用极为方便，它既可象普通片用水吞服，又可象分散片、泡腾片置于水中迅速分散后送服，还可不需用水置口腔中用唾液吞咽，特别适用于儿童患者、老年患者、吞咽困难患者、取水不方便患者、以及服药顺应性差的患者。 1998年，FDA的CDER命名委员会首次将该类产品定义为一种新的剂型口

19、腔崩解片(Orally disintegrating tablet，ODT)。其定义如下：口腔崩解片是一种含药的固体制剂，当放在舌面上时，可以迅速地、通常在几秒钟内崩解。,口腔崩解片是口服给药的新型方式，西方发达国家特别关注和重点发展。FDA首次将该类产品定义为新剂型,上世纪90年代初，为提高药物使用的方便性，解决特定适应症和特殊患者人群的用药顺应性，制药企业开发了一类只需放在舌面上就可以咽下的产品。,该指导原则首先对该原则发布的背景进行了说明，然后对口腔崩解片研发中需要考虑的技术要点进行了讨论，还给出了崩解时限测定方法的建议。,美国是对口腔崩解片最推崇的国家，2007年4月6日,FDA首次给

20、出关于口腔崩解片的技术指导原则,可见，经济越是发达的国家越是注重给药方式的技术升级。美国是药品消费最大的国家，人们已经将药品不仅仅看作是治病救命的手段，而已将其纳入生活消费的范畴，更加注重服药质量的改善和提高。,针对改善服药质量问题，我们与国外基本同步，系统开展了基于粉末直接压片工艺的口腔崩解片的技术研究,课题名称：盐酸苯环壬酯/甲磺酸酚妥拉明速释制剂研究 课题来源：国家“九五” 攻关项目 课题编号：96-902-02-17 获得经费：国家经费30万元，企业经费50万元 负 责 人：崔光华 起止时间：1996年2000年2003年,本人在硕士期间具体承担了该工作。论文基于粉末直接压片工艺的速释

21、固体制剂研究被评为军事医学科学院优秀论文及研究生,该类制剂当时国外没有确切定义,我们称之为速释片。 98年FDA将其统一命名为口腔崩解片,掩味技术是目前制约口腔崩解片顺利研发的瓶颈。盐酸苯环壬酯是该类问题典型的代表,改变味蕾对苦味的敏感度 矫味剂 甜味剂：糖精钠、阿司巴坦 芳香剂：苹果香精、香蕉香精 氨基酸：味精( 谷氨酸钠) 麻痹剂：苯酚钠、丁香油 苦味阻滞剂：腺苷酸,降低与味蕾接触的药量或药物浓度 包衣法：颗粒(粉体)包衣：100m, Eudragit E 微囊化：100m, 明胶 分散制粒：固体分散体 环糊精包合：适合于低剂量药物 熔融制粒法：硬脂酸、十八醇、聚乙二醇 改变溶液黏度：黄芪

22、胶、CMC-Na 离子交换结合：盐酸曲马多 多孔物质吸附吸收：沸石、二氧化硅 改变药物结构：前体药物(纳洛酮);成盐(克拉霉素),（1）流化床包衣技术。将500g盐酸苯环壬酯粉碎，过80目筛，使用沸腾床或流化床等设备包衣。包衣材料选用Eudragit E，用水配制成2-10%水分散体分散或用乙醇溶解，辅之以适量增塑剂和润滑剂。在物料温度25-50、雾化压力2.0-3.0bar、进液速率5-30ml/min的条件下包衣，包衣增重30-100%，即可。 （2）环糊精包合技术。将盐酸苯环壬酯与-环糊精，在一定的反应温度下，加水溶解，调节溶液pH值近中性，搅拌8-10小时，冷处静置24小时，过滤，或冷

23、冻干燥，即可。 （3）固体分散技术。选用在中性或偏碱性不溶，而在酸性水溶液中溶解的药用高分子材料，用适当有机溶剂如乙醇溶解，将主药加入并溶解，真空干燥或冷冻干燥使之固化，或直接作为药用粘合剂，即可。,我们采取三种技术措施，对盐酸苯环壬酯进行掩味处理，均能够得到理想的结果。,通过现代释药系统以及新型工艺技术，对疗效确切的口服畅销药物进行品种的技术革新，存在巨大的临床需求和市场空间。盐酸苯环壬酯具备上述特征。 盐酸苯环壬酯口腔崩解片的出现，能显著提高病患者的服药质量，使病患者的服药不受时间、空间以及环境的影响，变得更加省事、更加方便、更加有效。 盐酸苯环壬酯口腔崩解片的出现，能进一步挖掘国家级一类

24、新药“飞赛乐”的价值，提高产品的科技含量，延长产品的市场周期，拓展产品的使用范围、适应时代的发展需求。,课 题 意 义,申请日：2003.11.07 授权日：2006.11.08 期 限：2023.11.07(20年),其核心的技术特征已被中国发明专利授权保护, 盐酸二甲双胍溶胶囊的研究,本章研究小肠定位释药系统的同时，建立膜控微丸的成型工艺路线 关键材料是Eudragit L 100-55； 模型药物是盐酸二甲双胍； 研究重点是中试规模下的有机溶媒/水分散体包衣工艺比较； 拟解决的科学问题是阻止水溶性药物向水性衣膜的渗透和扩散。,三、流化床微丸包衣技术在小肠定位中的应用,酒石酸美托洛尔（04

25、0901，广东肇庆定康药业 ）；盐酸二甲双胍（040622，昆山双鹤药业）；美洛昔康（福建永春制药厂）。 Eudragit （罗姆公司）；空白丸芯（610750m，上海爱的发）； HPMC（6cps，上海运宏）； 流化床（GPCG-1，德国Glatt公司）；智能溶出测定仪（ZRS-6型，天津大学精密仪器厂）；紫外可见分光光度计（UV-160A，日本岛津）。 扫描电镜（SEM, Jeol JSM 5600 LV, Jeol, 东京日本）；金粉喷射头（JFC-1300, Jeol, 东京，日本）。北大医学部委托测试,材料与仪器,空白丸芯 药层 隔离层 功能层,制备流程,步骤一、上药层包衣：空白丸芯

26、药物的水溶液 步骤二、隔离层包衣：载药丸芯HPMC的水溶液 步骤三、功能层包衣：隔离丸芯Eudragit水分 散体或乙醇溶液 步骤四：样品的老化：水分散体包衣样品需40 烘置24小时。,流化床底喷液相层积法,制备工艺,11,Wuster insert,Top spray,GPCG 1 Fluid bed (Bought from Germany in 2001),盐酸二甲双胍肠溶微丸的流化床底喷包衣工艺参数,转蓝法，转速100rpm，释放介质1000ml， 37 。02小时以pH1.2 HCl为溶剂，25小时以pH6.8的磷酸钠缓冲液为溶剂。规定的时间，取溶液10ml，滤过。 酸中释放量 精密

27、量取酸中续滤液溶液1ml，置10ml量瓶中，加pH6.8磷酸盐缓冲液至刻度，摇匀，分光光度法在233nm的波长处测定吸收度，按吸收系数为798计算出每粒胶囊的酸中释放量。 缓冲液中释放量 精密量取缓冲液中续滤液1ml，置50ml量瓶中，加缓冲液稀释至刻度，摇匀，分光光度法在233nm的波长处测定吸收度，按吸收系数为798，计算出每粒胶囊在缓冲液中的释放量。,肠溶微丸的释放度测定方法（已经过方法学评价）,Eudragit L 100-55包衣的盐酸二甲双胍肠溶微丸的SEM图,微丸拥有理想的球形的外观结构，粒经比较均一，外观比较光洁。,形成的肠溶衣膜连续、密封，厚度大致为50m左右。,结果与讨论,

28、乙醇包衣和水分散体包衣的比较,不含隔离层；释放介质：0-2 hpH1.2 盐酸；2-3 hpH6.8 磷酸缓冲液 乙醇包衣 水分散体包衣,结果提示：盐酸二甲双胍在水分散体肠溶包衣过程中发生向衣膜迁移、扩散现象，破坏衣膜的连续性和完整性,隔离层对包衣增重的影响,隔离层在不同包衣增重，不同溶媒条件下，对盐酸二甲双胍肠溶微丸的2小时酸中释药量影响。,隔离层可有效降低水分散体包衣工艺的肠溶聚合物用量，但同时加大了制造工艺的复杂。,040715批,040725批,040720批,盐酸二甲双胍肠溶微丸成品的释放度检查,可见，三批样品的2小时酸中释放量均低于10，而45分钟缓冲液中释放量均大于70，表明研制

29、的盐酸二甲双胍肠溶微丸具备理想的肠溶特征。,本试验目的是评价由北京利龄恒泰药业有限公司研制生产的盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）与市售盐酸二甲双胍肠溶片（250mg/片）之间的相对生物利用度，为北京利龄恒泰药业有限公司研制生产的盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）是否与成分相同的市售盐酸二甲双胍肠溶片（250mg/片）具有生物等效性提供试验依据。,本试验严格遵守赫尔辛基宣言的人体医学研究的伦理准则，公正、尊重人格，力求使受试者最大程度受益和尽可能避免伤害；本试验方案及其修订申请均经首都医科大学附属北京朝阳医院伦理委员会审核批准。,盐酸二甲双胍肠溶微丸人体生物等效性研究,试验总体设计及方

30、案的描述,采用双周期自身交叉对照试验设计。两周期，洗脱期为7天。 将受试者（人数19人）按体重指数随机等分为两组，方法为将受试者按体重指数排序后，依次从随机表中抽出对应数字，根据随机数字分组。随机分组结束后，再给每个受试者编上试验号。分别在两周期内服用试验制剂或参比制剂500 mg。受试者分组和服药顺序见下表。,单剂量试验 志愿者在两周期内分别接受下列两种处置； 1：试验制剂：给药二粒（含盐酸二甲双胍500 mg）； 2：参比制剂：给药二片（含盐酸二甲双胍500 mg）。 受试者禁食过夜（至少10小时），第二日早8：00服药，用200250mL左右温开水送服。 确定依据 依照化学药物制剂人体生

31、物利用度和生物等效性研究技术指导原则，进行生物等效性研究时，给药剂量一般应与临床单次用药剂量一致。受试制剂和参比制剂一般应服用相等剂量。盐酸二甲双胍临床单次给药剂量为500mg，故确定次计量为研究剂量。,剂量设置和确定依据,生物样本采集和试验过程,生物样本采集： 服药前及服药后0.5h，1.0h，1.5h，2.0h，2.5h，3.0h，4.0h，6.0h，8.0h，12.0h，24h 分别取静脉血5mL，离心分取血浆，-20C保存至测定。交叉给药后取血方法和时间相同。 试验过程： 试验期间，统一饮食, 主要食物为米饭、豆制品、鸡蛋、猪肉、青菜等，不严格限制饮水量。标本收集和分析四周内完成。试验

32、过程中研究人员详细记录采血时间和药物不良反应。 在临床医生的严密监护下进行；准备急救条件和措施；受试者禁食过夜（至少10小时），第二日早8：00服药，用200 250mL左右温开水送服，早、中、晚三餐统一进食。按时取静脉血，并记录实际取血时间；受试期间避免剧烈运动；监护医生观察并记录受试者的不良反应发生情况并采取相应措施。,生物样本的测定方法,主要仪器 岛津CBM-20A高效液相色谱仪，API 3200，APCI源，SHIMADZU VP-ODS 150L2.0，TDL-5M台式大容量冷冻离心机。 试药 盐酸二甲双胍(含量99.5%，天津中新药业集团)；内标（盐酸苯乙双胍，含量99.3%，常州

33、亚邦制药有限公司）；甲醇、乙腈（色谱纯，Fisher）；醋酸铵（色谱纯，Dikma）。 血浆样品的处理 精密量取血浆样品200 L，加入内标溶液和甲醇各100L，混匀。加 11L稀醋酸，涡旋10s。加入乙腈1mL，涡旋20 s，3000 r/min离心5min，取上清液于5mL离心管中，45C N2吹干。残渣加100L石油醚，涡旋5s，3000 r/min离心2min，取上清液，弃去。待石油醚完全挥干后，加200 L去离子水，涡旋10s，12000 r/min离心3min，取上清液进样5 L。,质谱与色谱条件,质谱条件： 离子源：APCI源；离子喷雾电流：4.0；温度：300；GS1（N2）流

34、速：35pisg.；GS2（N2）流速：30 pisg；碰撞能量为30eV；检测方式：正离子检测；扫描方式：选择性离子反应检测（MRM）方式，用于定量分析的离子反应分别为盐酸二甲双胍m/z 130.2-71.0，盐酸苯乙双胍m/z 206.1-59.9。 色谱条件： 流动相：甲醇-乙腈-10mM醋酸铵溶液（20：20：60）；流速：0.2 ml/min； 盐酸二甲双胍及内标特征离子图见图1；空白血浆、盐酸二甲双胍及内标加入空白血浆中的色谱图、受试者血浆色谱图，见图2图4。盐酸二甲双胍的保留时间约为1.8 min，内标的保留时间约为3.1 min。内源性物质基本不干扰测定。,图1 盐酸二甲双胍（

35、A）及内标苯乙双胍（B）特征离子图谱,A,B,盐酸二甲双胍及内标特征离子图,盐酸二甲双胍及内标加入空白血浆中色谱图,空白血浆,空白血浆,主药+空白血浆色谱图,内标+空白血浆色谱图,线性关系及检测限,精密吸取空白血浆200L于5mL塑料离心管中，加入盐酸二甲双胍标准溶液和内标溶液各100L，制成含盐酸二甲双胍浓度分别为2.0，10.0，125.0，500.0，1000，1500，2000ngmL-1浓度系列样品，混匀，按“血浆样品的处理”项下同法操作，记录盐酸二甲双胍及内标的峰面积。以盐酸二甲双胍和内标峰面积比（Y）与盐酸二甲双胍浓度（C）进行线性回归，得回归方程为： Y=0.00194C+0.

36、0134 (r=0.9996) 由此可知，血浆中盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg）在2.02000 ngmL-1浓度范围内与峰面积比线性良好,血浆中盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg） 最低定量浓度为2.0ngmL-1.,盐酸二甲双胍与内标提取回收率,相对回收率及精密度,盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg）血浆样品的稳定性试验结果,盐酸二甲双胍血浆样品测定方法学质量控制样品测定结果（ng.ml-1）,统计处理,药代动力学参数计算 用DAS 2.0 软件分析数据，计算Tmax、Cmax、t1/2、AUC0t和AUC0，阐述盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg）在健康志愿者体内的药物代谢动力学特征。 统计

37、学处理方案 对药代动力学参数Cmax、AUC0t和AUC0，进行方差分析，再以双单侧 t 检验进行等效性判断。若受试制剂AUC的90%可信限落在参比制剂80125%范围内，Cmax的90可信限落在参比制剂70143%范围内，则认定受试制剂与参比制剂生物等效。 试验中进行的修改 依照2009年3月3日申报医学伦理委员会的原临床试验方案进行了2名受试者的预试验。根据对2名受试者药代动力学研究结果，调整了采血点，并加强了质量控制措施。故对原方案进行了修改。修改后的方案获得了申办者的同意，并获得伦理委员会的批准。,研究结果数据,19名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg后血药浓度-

38、时间曲线见图6； 单剂量口服二甲双胍肠溶胶囊受试制剂或参比制剂500mg后血药浓度-时间曲线见图8； 19名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg后平均血药浓度-时间曲线见图10； 受试者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）试验制剂或参比制剂500 mg后不同时间的盐酸二甲双胍血药浓度及均值标准差(ng/mL)见表6和表7； 受试者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）受试制剂或参比制剂500 mg后的药动学参数见表8； 受试者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）受试制剂或参比制剂500mg后的相对生物利用度（F%）见表9； AUC024 、

39、AUC0和Cmax的方差分析结果见表1012； 受试者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）受试制剂和参比制剂500mg后参数双向单侧t检验和90%置信区间检验结果见表13； AUC0-24、AUC0-和Cmax群体等效性分析结果见表1416；Tmax 非参检验（配对Wilcoxon法）结果见表17。,19名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg后血药浓度-时间曲线,19名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg后血药浓度-时间曲线,19名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg后血药浓度-时间曲线,A 受试制剂（微丸型，250mg）

40、 B 参比制剂（肠溶片，250mg）,单剂量口服二甲双胍肠溶胶囊受试制剂或参比制剂500mg后血药浓度-时间曲线,19名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg后平均血药浓度-时间曲线,受试者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）受试制剂或参比制剂500 mg后的药动学参数,受试者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）受试制剂或参比制剂500mg后的相对生物利用度（F%）,结果分析与评价,药动学参数 试验制剂 参比制剂 半衰期t1/2 4.140.74h 4.581.63h 峰浓度Cmax 619.7220.3ng.mL-1 666.6326.2ng.mL-

41、1 达峰时间Tmax 3.60.9h 3.42.0h； 曲线下面积： AUC024 3739.81130.1nghmL-1 3962.61324.7nghmL-1 AUC03841.01165.5nghmL-1 4146.41418.7nghmL-1 相对生物利用度 104.246.7% 100%,经双向单侧t检验，试验制剂AUC024的90%置信区间在参比制剂的83.5-112.2%；试验制剂Cmax的90%置信区间在参比制剂的81.6-113.8%；试验制剂Tmax经非参数检验无差异，说明试验制剂与参比制剂生物等效。,题 目：一种治疗糖尿病的肠溶药物组合物及其制备方法 申请号：200610

42、145832.8 发明人：高春生等 进 度：2009年10月份完成实审，现在已经授权。,研究结果申报国家发明专利,本章首先用前面建立的膜控微丸工艺路线制备用Eudragit FS 30 D包衣的美洛昔康肠溶微丸，然后详细进行体内外评价。 研究的重点是Eudragit FS 30 D膜控微丸的体外释放特征和比格犬体内的吸收特性。 拟解决的科学问题是弄清Eudragit FS 30 D的pH溶解临界值以及该系统能达到体内结肠定位的包衣膜厚度。 目的是进一步认识Eudragit FS 30 D的结肠定位潜力，为提高pH敏感的结肠给药系统的定位准确性和降低个体差异进行有益的尝试。,美洛昔康肠溶微丸的研

43、究,四、流化床微丸包衣技术在结肠定位中的应用,试验方法,美洛昔康肠溶微丸的制备 上药包衣：-环糊精美洛昔康（1:1，摩尔比） 隔离包衣：3，HPMC 肠溶包衣： Eudragit FS 30 D 滑石粉；无需增塑剂。 当包衣增重达到7.5，10，12.5，15(w/w) 时，在流化床取样口取出一定数量的微丸，作 为供试样品。所有的样品都要在温度40的环 境中老化24小时。 微丸的形态学检查（SEM）,释放度试验,转篮法，500ml释放介质，温度370.5，转速100rpm。 为了考察载药丸芯的药物释放行为，使用了pH1.2的盐酸液、pH6.8的磷酸盐缓冲液以及pH7.4的磷酸盐缓冲液。测定它们

44、的释药量。 为了评价肠溶微丸的抗酸性，使用pH1.2的盐酸液，测定2小时的释药量。 为了测定Eudragit FS 30 D的pH溶解临界值。采用更换释放介质的方法， 02h以pH1.2的盐酸液为介质， 26h分别以pH6.8，7.0，7.2，7.4的磷酸盐缓冲液为介质。 为了模拟胃肠道的转运情况，采用更换释放介质的方法： 02h采用pH1.2的盐酸液， 25h采用pH6.8的磷酸盐缓冲液，58h采用pH7.4的磷酸盐缓冲液 美洛昔康的含量测定：pH1.2的样品在345nm测定吸收度； pH6.8、7.0、7.2的样品在360nm测定吸收度； pH7.4的样品在363nm测定吸收度。,美洛昔康

45、肠溶微丸的流化床底喷包衣工艺参数,包衣后，老化前,老化后 (24 h,40 ),肠溶衣膜厚度,横截面图,28 m,homogenous and uniform polymer films,Eudragit FS 30 D 包衣的美洛昔康结肠溶微丸SEM,有孔隙,光滑致密,结果与讨论,一般来说，口服缓控释制剂应该有恒定的药物释放模式。 然而，药物自身的理化性质，特别是溶解度，对口服缓控释制剂的释药模式往往有很大程度的影响。,药物性质对肠溶包衣制剂释药的影响,M. Sugawara et al. 2005 . Eur. J. Pharm. Sci. 26:1-8,Meloxicam is an a

46、cidic drug (pKa values of 1.1 and 4.2) and practically insoluble in water.the percentage of drug ionized and thus the solubility increase with an increase in the pH value,pH-dependent solubility,美洛昔康几乎不溶于水，溶解度呈pH依赖性,-环糊精对美洛昔康载药丸芯释药的影响,未包衣的美洛昔康载药丸芯的释药曲线,-环糊精在显著增加载药丸芯溶出速率的同时，保持了美洛昔康非pH依赖的溶解度状态，确保药物的性质

47、不对制剂的释药模式产生影响。,不同用量Eudragit FS 30 D的抗酸性,Eudragit FS 30 D的不同包衣水平 对美洛昔康肠溶微丸2小时酸中释药量的影响,Eudragit FS 30 D的包衣增重和微丸抵御胃酸溶解的能力呈正相关。 当用量大于12.5时，微丸能够顺利通过胃部。,美洛昔康肠溶微丸在模拟的胃肠道条件下的释药结果,从体外模拟试验看： 15(w/w)包衣水平的Eudragit FS 30 D能使微丸顺利通过胃部和小肠上端，而在回盲肠或结肠释放药物。,12.5包衣增重 15包衣增重 Eudragit FS30D膜控微丸在模拟胃肠道条件下的药物释放曲线,Eudragit F

48、S 30 D的pH临界溶解值,15水平的Eudragit FS 30 D膜控微丸在不同pH下的释药曲线,肠溶聚合物都存在自身特有的pH临界溶解值，该值直接决定它们的用途。 Eudragit FS 30 D的pH临界溶解值存在争议如6.8, 7.2, 7.5等。 本实验条件下，Eudragit FS 30 D在0.2M 的磷酸盐缓冲液中的pH临界溶解值在7.2以上。,Gupta. 2001. Int. J. Pharm. 213, 8391 Rudolph. 2001. Eur. J. Pharm. Biopharm. 51, 183-190 Huyghebaert. 2005. Int. J.

49、 Pharm. 298, 2637,释放介质对肠溶包衣制剂释放度的影响,磷酸盐缓冲液的浓度和离子强度对肠溶制剂释药的影响,不论是采用NaCl，还是磷酸盐来调节溶媒的离子强度，对药物的释放速率都能产生相同的加快效果。,释放介质对肠溶包衣制剂释放度的影响,缓冲液的种类（磷酸盐碳酸氢盐）对肠溶包衣制剂释药的影响,Eudragi FS 30 D膜控微丸在碳酸氢盐缓冲液中的释药速率明显慢于磷酸盐缓冲液。,释放介质对肠溶包衣制剂释放度的影响,碳酸氢盐的浓度对肠溶制剂释药的影响,碳酸氢盐的浓度越低，Eudragit FS 30 D膜控微丸的释药速率越慢。,相对于磷酸盐缓冲液，碳酸氢盐缓冲液的离子强度、离子组

50、份和人体肠道消化液的组成更相似。因此，使用碳酸氢盐缓冲液为溶媒进行肠溶制剂释放度试验，有可能提高肠溶包衣制剂的体内外相关性。,美洛昔康肠溶微丸在比格犬体内的转运及吸收试验,受试动物：4条比格犬。为了更好地模拟人体胃肠道的pH值环境，在 给药前的15 分钟和给药后的45分钟对比格犬进行了肌肉 注射五肽促胃酸激素的措施。 给药剂量：10 mg/body 受试制剂：包15 Eudragit FS 30 D 的美洛昔康肠溶微丸 对照制剂：未包肠溶衣的美洛昔康载药丸芯 分析方法：HPLC，吡罗昔康为内标，氯仿酸化提取，波长360nm。 药动参数：tlag in vivo, tmax, Cmax, AUC

51、,溶 剂 空白血浆+主药,空白血浆+主药+内标 第1条犬,口服受试制剂第5h 后的血浆样品,体内研究的色谱行为及方法学结果,回归方程：As/i0.2384C+0.001 线性范围：0.0510.00g/ml 线性关系：r20.9998 最低检测限：0.05g/ml 最低定量浓度：0.10g/ml 绝对回收率：50.993.3 相对回收率：98.6108.4 日内及日间RSD：0.977.22,美洛昔康肠溶微丸在每条比格犬体内的药时曲线,当Eudragit FS 30 D包衣的美洛昔康肠溶微丸被比格犬口服后，药物的In vivo tlag明显延长。,未包衣的载药丸芯； 包衣的载药微丸,美洛昔康肠

52、溶微丸在比格犬体内的药动学参数,鉴于微丸或胶囊在比格犬肠道内的平均转运时间分别为2.8 h或3.3 h，本研究结果证明，Eudragit FS 30 D包衣的肠溶微丸能将美洛昔康递送至比格犬的结肠部位。,Aoyagi N, et al. 1982. Bioavailability of griseofulvin from tablets in beagle dogs and correlation with dissolution rate and bioavailability in humans. J Pharm Sci 71, 1169-1172,Niwa K, et al. 1995. Preparation and evaluation of a time