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文档简介

1、一、菊花的组织培养 1理论基础:植物细胞的_ 2基本过程:,二、月季的花药培养 1理论基础:花粉具有_ 2花粉发育过程:_、_、_等阶段 3产生花粉植株的两种途径:,三、血红蛋白的提取和分离 1凝胶色谱法:也称分配色谱法,是根据_ 分离蛋白质的方法。相对分子质量较小的移动速度较慢,而相对分子质量较大的无法_,移动速度较快。 2缓冲溶液:能够抵制外界的_对溶液pH的影响,维持pH_ 3电泳:带电粒子在_的作用下发生迁移的过程,4样品处理:红细胞的洗涤血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液透析 5_:凝胶色谱柱的制作_样品的加入和洗脱SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,四、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1PCR原理

2、:在一定的缓冲溶液中提供_,分别与两条模板链结合的两种引物,_, 同时控制温度使DNA复制在_反复进行 2PCR的反应过程:变性_延伸,五、植物芳香油的提取 1植物芳香油的提取方法:蒸馏、_和_等 2水蒸气蒸馏法原理是:利用_将挥发性较强的植物芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后,混合物又会重新分出_。根据蒸馏过程中原料放置的位置,可以将水蒸气蒸馏法划分为_、_和_ 3萃取法:将粉碎、干燥的植物原料用_浸泡,使芳香油溶解在_中的方法。芳香油溶解于有机溶剂后,只需蒸发出有机溶剂,就可以获得纯净的植物芳香油了,六、胡萝卜素的提取,答案: 一、1.全能性2.脱分化再分化3.种类年龄微量元素维生素甘

3、氨酸烟酸生长素细胞分裂素5.84.接种移栽 二、1.全能性2.四分体时期单核期双核期3.脱分化胚状体愈伤组织4.初花期完全未开放单核期细胞核由中央移向细胞一侧的时期醋酸洋红法焙花青铬矾法红蓝黑从受伤部位产生愈伤组织彻底去除花丝愈伤组织胚状体长出愈伤组织分化培养基上幼小植株分开,三、1.相对分子质量的大小进入凝胶内部2.酸和碱基本不变3.电场5.凝胶色谱操作凝胶色谱柱的填装 四、1.DNA模板四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶体外2.复性 五、1.压榨萃取2.水蒸气油层和水层水中蒸馏水上蒸馏水气蒸馏3.有机溶剂有机溶剂4.水蒸气蒸馏5.漂洗静置 六、1.岩藻微生物2.干燥萃取浓缩,1原理 (1)

4、植物细胞全能性的概念:高度分化的植物细胞,仍然具有发育成完整植株的潜能。 (2)高度分化的植物细胞全能性表达的条件 离体条件; 无菌操作(防止杂菌污染);,适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细胞分裂素等); 种类齐全、比例适合的营养物质; 温度、酸碱度、光照等条件的控制。,2基本过程,3影响植物培养的因素 (1)外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同。 对于同一种植物材料,材料的年龄,保存时间的长短等也会影响实验结果。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再化化。,(2)培养基的配制(MS培养基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、

5、Fe、Mo、I、Co。 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。 pH、温度、光照。 不同的植物对各种条件的要求往往不同。菊花适宜条件:pH在5.8左右;温度控制在18 22 ;每日日光灯光照12 h。,1DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同,2.比较细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR),3.血红蛋白的提取和分离方法 (1)凝胶色谱法 含义:根据相对分子质量的大小分离蛋白质。 原理 a相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢。 b相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。,(2)电泳法 含义:带电

6、粒子在电场作用下发生迁移过程。 原理:利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异和分子本身大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。,1几种物质的提取方法、原理及步骤,2.实验流程设计 (1)玫瑰精油的提取实验流程,(2)橘皮精油的提取实验流程 石灰水浸泡橘皮漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油。 (3)胡萝卜素的提取实验流程 胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素。,3水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏的区别 (1)这三种方法的基本原理相同,但原料放置位置不同。 水中蒸馏:原料放在蒸馏容器的水中,水要完全浸没原料。 水上蒸馏:容器中水的上方有筛板,原料放在筛板上,水量以沸腾时

7、不浸湿原料为宜。 水气蒸馏:蒸馏容器下方有一排气孔,连接外源水蒸气,上方有筛板,上面放原料。 (2)各自特点:水中蒸馏设备简单、成本低、易操作,而水上蒸馏和水气蒸馏时间短,出油率高。,4用层析法鉴定时应注意的问题 (1)选择干净的滤纸,为防止操作时滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以戴手套进行操作。 (2)点样时应注意点样斑点不能太大(直径应小于0.5 cm),如果用吹风机吹干,温度不宜过高,否则斑点会变黄。 (3)将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时注意滤纸两边不能互相接触。以免因毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,使溶剂前沿不齐,影响结果。,如图为科学家将胡萝卜韧皮部的细胞培养形成胡萝

8、卜植株的过程示意图(注:胚状体即等同于植物种子的胚的结构)。,请据图完成下列问题: (1)由细胞团形成胚状体要经过_过程。 (2)这种培养方法在生物技术中称为_培养。 (3)培养基中除了需要水分和有机营养物质外,还需要加入_和_。培养过程必要的外界条件是适宜的温度、_和_等。 (4)由胡萝卜韧皮部细胞培养成完整的胡萝卜植株证明了_。,解析:植物组织培养的理论基础是细胞的全能性;由细胞团发育成植物幼苗需经细胞分裂和细胞分化两个过程;植物组织培养所用的培养基中应含有植物生长发育所需的各种营养物质,为诱导根或芽的分化还应加入生长素、细胞分裂素两种植物激素,并保证适宜的外界环境。,答案:(1)细胞分裂

9、和细胞分化 (2)组织 (3)矿质元素生长调节类(激素)物质光照、氧气无菌 (4)植物细胞具有全能性,(2010沂水模拟)月季花药培养时的花粉粒最好是() A四分体时期B单核居中期 C单核靠边期 D二核或三核花粉粒 答案:C 解析:花粉发育过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说,在单核期细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。,一个由32P标记的DNA分子,放在未标记的环境中培养,复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的() A1/10B1/16 C1/25D1/32,解析:一个DNA分子n次复制后产生的DNA数目为2n,而DNA复制是半保留复制,其特点是:新形成的DN

10、A双链一条是来自亲代的DNA分子的母链,另一条是新形成的子链。这样最初由32P标记的DNA分子复制后,其标记的两条链就分别进入两个子代DNA分子中,即两个子代DNA分子被标记了。然而由于是在未标记的环境中培养,不论多少次复制,只有最初标记过的两条链存在的两个DNA分子中含32P,这样经n次复制,标记的DNA分子占2/2n,即1/2n1,所以本题应选B。 答案:B,(2010扬州模拟)在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是() A防止血红蛋白被O2氧化 B血红蛋白是一种碱性物质,需要酸中和 C磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能 答案:D,解析:利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境,保证血红蛋白的正常结构和功能,便于分离观察(红色)和科学研究(活性)。,作为萃取胡萝卜素的有机溶剂,哪一项不符合实验要求() A能充分溶解色素 B与水混溶 C对人无毒 D易与产品分离 解析:选择萃取胡萝卜素的有机溶剂的原则包括A、C、D三项,还要求不能与水混溶。 答案:B,在使用水蒸气

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