HIV的实验室快速检.ppt

1、HIV的实验室快速检测,广元市妇幼保健院 张正怀 2011年8月,在艾滋病免费筛查工作中，检验科的主要工作是作好检测试剂的领取、登记、保管、检测。,检测前先按照全国临床检验操作规程和每种试剂的使用说明书写好作业指导书（SOP文件），检测的时候严格按照作业指导书进行检测。,操作方法,1.抽取静脉血2ML左右,置血清或血浆管内待血清或血浆析出,如不能立刻检测,析出后放4冰箱保存（最好分离出血清或血浆）。 2.检测前将试剂和样本从冰箱中取出,放置平衡至室温。 3.无抗凝剂的全血标本测试时操作要及时,避免血液凝固,影响结果。 4.严格按照每种试剂的使用说明书操作。,先用“艾康生物技术(杭州)有限公司”

2、的试剂检测。检测结果阴性则直接出阴性检验报告。 若检测结果阳性则用“英科新创（厦门）科技有限公司”的试剂检测。检测结果阴性则出据阴性检验报告；检测结果阳性则不出具检验报告，填写“复检单”送当地疾控中心复检。复检单填写可与当地疾控中心联系。 孕前及孕期未筛查者，产时用以上两种试剂同时检测。,艾康生物技术(杭州)有限公司 人类免疫缺陷病毒HIV1/2型抗体检测试剂(胶体金法)说明书 检验方法： 在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将试剂恢复至室温（2030）。 从原包装铝箔袋中取出试剂，在1小时内应尽量地使用，特别是温度高于30或在高湿度条件下。 加样：将检测试剂板放在干净的平台上，用吸管吸取

3、标本后，滴入1滴全血/血清/血浆（约25l）于加样孔S中，随后加入1滴缓冲液（约40l），于加样孔S中。 等待紫红色条带的出现，测试结果应在15分钟左右读取。20分钟后判定无效。 检验结果的解释： 阳性（+）：两条红色条带出现。一条带位于测试区内（T），另一条带位于质控区（C）。 阴性（）：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）无紫红色条带出现。 无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。,阴性结果,阳性结果,英科新创（厦门）试剂 检

4、验方法: 在使用此试剂前必须仔细阅读试剂的说明书,需严格按照说明书执行有关操作,否则无法保证可靠的信息。 血清、血浆标本： 待测标本从储存的条件下取出，平衡至室温并编号。 将扬需数量的测试试剂从包装盒中取出平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。 用微量加样器取60l血清或血浆样本，或用试剂盒内所配塑料滴管吸取样本，垂直滴加两滴于试剂的加样处。 加样后，阳性标本可在130分钟内检出。经过试验确证，反应时间（从加样后计算起）超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。 全血样本： 将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 将所需数量的测试试剂从包装

5、盒中取出平衡至室温，打开铝箔馐袋，平置于台面上。 用微量加样加样器取60l全血样本，或用试剂盒内所配塑料滴管吸取样本，垂直滴加两滴于试剂加样处，随即加一滴金标全血样本稀释液。 加样后，阳性标本可在130分钟内检出。经过试验确证，反应时间（从加样后计算起）超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。 结果判定：与艾康生物试剂相同。,作好检测原始记录。 作好检测结果信息登记。,不同厂家的试剂原理、检测样本类型（全血/血清/血浆）、操作方法等有不同要求，一定要严格按照说明书要求操作。 不同试剂因为包被的抗体不同，对早期感染的样本检测结果可能有不同。 一般可以使

6、用全血的试剂都配有样本稀释液。,注意事项：,注意事项：,4.HIV快速试剂是初筛试剂，不能用于HIV感染的确证 5.胶体金诊断类试剂对湿度敏感，检测时打开包装袋后，应在1h内进行检测，以防试剂吸收水分后失效，未用完的试剂一定要密封保存。 6.一定在规定试剂内判读结果，超出规定时间再判读结果无效，对于弱阳性反应应该有2个人以上共同判读结果,快速检测结果的影响因素,试剂质量 环境温度 样本质量：溶血严重、使用抗凝血、样本量 结果判读时间 操作人员个体差异,关于报告,1.阴性可直接出具阴性报告,但要进行必要的咨询,最好能了解到近期有无高危行为. 2.阳性结果送CDC进行复检或确证,确证结果未出之前一定不要告之受检者结果. 3.筛查结果没有不确定结果.,快速试剂保存条件,1.可以2-30，有稀释液的快速试剂，建议保存在2-8冰箱。 2.试剂进出一定要有记录,包括试剂效期、批号、接受人等。 3.每天查看并记录保存试剂冰箱温度和检测环境的温度。,全国艾滋病检测技术规范 2009年修订版,质量控制,1.外部质量控制,由市CDC确证实验室定期发放质控考核样本,各监测点完成. 2.每批检测试剂启用前做质控检测,由市CDC实验室完成 3.移液器每年校准1次 4.每天记录冰箱/孵育箱温度 5.做好每次试验记录 6.试剂选有国家药监批准的试剂 7.建立必要的SOP文件,关于艾滋病检测点