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文档简介
1、食品中蛋白质的测定方法,食品中蛋白质的测定方法,第一法:凯氏定氮法 第二法:分光光度法 第三法:燃烧法,凯氏定氮法测定蛋白质,原理 食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。,凯氏定氮法测定蛋白质,试剂 1 硫酸铜。 2 硫酸钾。 3 硫酸。 4 硼酸。 5 甲基红指示剂。 6 溴甲酚绿指示剂。 7 亚甲基蓝指示剂。 8 氢氧化钠。 9 95% 乙醇。 10 硼酸溶液(20 g/L ) 。 11 氢氧化钠溶液(400 g/L)。 12 硫酸标准滴定溶液(0.050
2、0 mol/L)或盐酸标准滴定溶液。 13 甲基红乙醇溶液(1 g/L)。 14 亚甲基蓝乙醇溶液(1 g/L)。,凯氏定氮法测定蛋白质,检测流程 称取样品(半固体23g;固体0.22g;液体1025g)于定氮瓶中 硫酸铜0.2g、硫酸钾6g做催化剂 20 mL浓硫酸(轻摇后于瓶口放一小漏斗) 消化至澄清继续0.5-1h 冷却,纯水转移至100mL容量瓶中 准确移取 5ml 10mL消化液用于蒸馏,加入10ml水 缓慢加入10ml40%的氢氧化钠溶液 蒸馏10min(液面离开冷凝管下端,再蒸馏1 min) 10mL2%的硼酸溶液吸收 加5滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 滴定,凯氏定氮法测定蛋白质,装置 1 电炉 2水蒸气发生器(2 L 烧瓶) 3 螺旋夹 4 小玻杯及棒状玻塞 5 反应室 6 反应室外层 7 橡皮管及螺旋夹 8 冷凝管 9 蒸馏液接收瓶。,凯氏定氮法测定蛋白质,计算方法: X试样中蛋白质的含量,单位为克每百克(g/100 g); V 1 试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积,单位为毫升(mL); V 2 试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积,单位为毫升 V3 吸取消化液的体积,单位为毫升(mL); c 硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度,单位为摩尔每升(mol/L); m试样的质量,单位为克(g ); F氮换算为蛋白质
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