MDS的细胞和分子遗传学特征ppt课件

1、骨髓增生异常综合症患者的细胞和分子遗传学异常,陈 苏 宁,苏州大学附属第一医院 江苏省血液研究所,1,一、骨髓增生异常综合征概述 二、骨髓增生异常综合征的细胞遗传学异常 三、骨髓增生异常综合征的分子遗传学异常,2,骨髓增生异常综合症的特征和历史,骨髓增生异常综合症（MDS）的主要特征： 造血细胞的克隆性疾病 髓系细胞分化发育异常，无效造血，外周血细胞减少 高风险向急性髓细胞白血病（AML）转化 1913年瑞士学者Nageli报道第1例MDS患者 1973年报道第一组MDS病例（Am J Med, 1973） MDS疾病的发现和有效治疗措施的出现晚于其他主要血液肿瘤大约50-100年 流行病学资

2、料尚不完善,3,CA Cancer J Clin 2010,2010年美国血液肿瘤预期发病率和死亡率,发病率：淋巴瘤(NHLHL)白血病(CLLAMLALLCML)MM 死亡率：白血病(AMLCLLALLCML)淋巴瘤(NHLHL)MM,4,骨髓增生异常综合症（MDS）多见于老年，中位发病年龄63-70岁 发病率3-5/10万，年龄70岁的老年人发病率20/10万，年龄80岁的老年人发病率30/10万 男性多于女性,骨髓增生异常综合症的流行病学,5,美国2001-2004的流行病学调查结果显示：MDS发病率约为3.3/10万,Blood, 2008, 112:45-52.,6,其他国家的MDS

3、发病率,英格兰+威尔士+瑞典：3.6/10万 德国：4.1/10万 法国：3.2/10万 日本：1.0/10万,Sekeres MA. Hematol Oncol Clin N Am. 2010,7,骨髓增生异常综合症的分型,FAB WHO（2001） 维也纳标准 WHO（2008）,8,WHO分类(2008),FAB分类,9,MDS分类标准的比较,Komrokji RS, et al. Hematol Oncol Clin N Am. 2010,10,Good：正常核型，单纯-Y，单纯del(5q) ，单纯del(20q) Poor： 复杂核型异常（3种异常），累及7号的染色体异常 Inte

4、rmediate：其它异常,IPSS,JCO 2007;25:3503-3510,11,WPSS,JCO 2007;25:3503-3510,* Good：正常核型，单纯-Y、del(5q) 、del(20q) Poor： 复杂核型异常（3种异常），7号异常 Intermediate：其它异常,12,WPSS 积分与预后的相关性,JCO 2007;25:3503-3510,13,遗传学异常在MDS发病机制中起着重要作用,MDS患者在临床和实验室特征存在显著的异质性 外周血细胞减少的系列数目和严重程度 骨髓增生程度、骨髓原始细胞比例 向AML转化的概率 对治疗的反应和总生存期 MDS临床表现的异

5、质性反映了MDS遗传学异常的的多样性和复杂性 细胞遗传学异常：染色体的数目或结构异常、DNA拷贝数变化、UPD等 分子遗传学异常：基因突变 表观遗传学异常,14,一、骨髓增生异常综合征的流行病学及分型 二、骨髓增生异常综合征的细胞遗传学异常 三、骨髓增生异常综合征的分子遗传学异常,15,骨髓增生异常综合症是造血细胞的克隆性疾病，以获得性遗传学改变为特征 40-60%的MDS患者具有非随机的染色体异常 5q-/-5、7q-/-7、+8、20q-和-Y为MDS患者最常见细胞遗传学异常 细胞遗传学异常对于MDS患者的发病机制研究、诊断、分型、风险分层和预后判断有重要意义,16,通常AML的诊断标准，

6、原始细胞比例20%，但如果t(8;21)、t(15;17)或inv(16)阳性，不论原始细胞比例多少，诊断AML 如缺乏形态学改变，检出-Y、+8、del(20q)不足以诊断MDS 如患者有难治性的血细胞减少，但缺乏形态学的病态造血，如检出其他的MDS相关染色体异常，提示患者为MDS,17,Haase D, Blood, 2007;110:4385-95,德奥协作组2124例MDS患者常见异常核型统计,18,近年来，对del(5q) 的病理机制研究已取得了较大的进展 而del(7q)、20q-、+8等其他MDS常见细胞遗传学异常在MDS的起病和疾病进展中的意义尚不明确,19,MDS的染色体异常

7、大多缺乏和形态学亚型的联系，对分型很少有帮助，del(5q)属于例外 鉴于独特的临床表现和预后，WHO分型将伴有单纯del(5q) 、BM原始细胞5%、PB原始细胞1%、无Auer小体的MDS患者列为伴有单纯del(5q)的MDS亚型 多见于女性，中位年龄67岁 对来那度胺反应较好，可改善红系造血、诱导细胞遗传学缓解 “5q-综合征”约占该类患者中的1/3-1/2 以5q-为唯一异常，多为老年女性 有大细胞性贫血，血小板计数正常或增高，巨核细胞不分叶 感染或出血少见，转白风险小，抗贫血治疗不佳，依赖输血,20,Boultwood J et al. Blood 2010;116:5803-581

8、1,del(5q)的共同缺失区域和候选基因,21,del(5q)的靶基因及其小鼠基因敲除模型,22,Boultwood J et al. Blood,del(5q),miR-145和miR-146a的单倍体剂量不足,RPS14基因的单倍体剂量不足,上调靶基因,血小板增多,p53基因激活,p53靶基因激活,红系缺陷,？启动突变,5q-综合症,基因突变,核型改变,AML,23,1105例MDS患者临床及遗传学特征分析 组合FISH分析在MDS诊断中的价值,MDS细胞遗传学研究的结果分享,24,1105例MDS患者的FAB分型,欧美报道60-73岁,25,745例MDS患者WHO分型（2008）,2

9、6,MDS细胞遗传学分析,FAB及WHO各亚型核型异常率及IPSS核型风险比较,27,各条染色体异常分布图,1,28,29,MDS常见核型异常,30,Haase D, Blood, 2007;110:4385-95,德奥协作组2124例MDS患者常见异常核型统计,31,本研究中MDS患者的核型特点,MDS患者最常见异常为单纯+8，而德奥报道为单纯del(5q) del(20q)比例高于德奥报道 del(5q)及-7/del(7q)在复杂核型异常中多见 发现一种新的与MDS相关的异常核型idic(20q-),32,核型对预后的影响,33,1105例MDS患者临床及遗传学特征分析 组合FISH分析

10、在MDS诊断中的价值,34,FISH在MDS诊断中的意义还存在争议,40-60%的原发性MDS患者可检出核型异常 +8、-5/5q-、-7/7q-、20q-和-Y是MDS最常见的染色体异常，合计约占40%左右 针对上述异常的FISH常被用于MDS患者的细胞遗传学诊断中，以期提高核型异常的检出率 已有多项研究探讨FISH检测在MDS诊断中的意义，但病例数和方案设计有不足，结论不一 FISH在MDS诊断中的地位还不明确,Leukemia. 2001 Leuk Res. 2010 Leukemia. 2003 Am J Clin Pathol. 2010,35,核型分析和荧光原位杂交的对照研究,NK

11、: normal karyotype,36,2002-2010年9月在研究所就诊的249例初诊MDS患者，按WHO（2008）分类 中位年龄52岁（12-89），男女比例1.54（151/98） 249例患者接受R显带核型分析，均采用FISH检测+8、-5/5q-、-7/7q-、20q-、-Y和-17/i(17q-),研究对象和方法,37,病 例 特 征,38,FISH探针及cutoff值,39,结 果,40,234例（94.0%）患者进行了成功的染色体分析 143例(60.9%)正常核型，91例(39.1%)伴克隆性染色体异常 数目异常24例(26.3%), 结构异常41例(45.1%)，兼

12、有数目异常和结构异常26例(28.6%) 15例患者核型分析失败 无分裂相或分裂相数量少 分裂相质量差,染色体分析结果,41,91例MDS患者的异常核型分布,42,249例患者均针对+8、-5/5q-、-7/7q-、20q-、-Y和 -17/i(17q-) 进行了FISH检测 FISH结果： 27例(10.8%)伴有+8 26例(10.4%)伴有-5/ del(5q) 20例(8%)伴有-7/del(7q31) 10例(4%)伴有p53缺失 10例(4%)伴有del(20q12) 4例(1.6%)Y,FISH分析结果,43,在核型分析成功的234例患者中，染色体与FISH分析结果的一致率达到9

13、6.6%(226/234) 有8例患者的结果不一致 4例正常核型患者经FISH分析发现异常 4例复杂核型异常患者经FISH分析发现异常,染色体分析与FISH结果的比较,44,8例染色体与FISH结果有差异的患者特征,45,在核型分析失败的15例患者中，FISH分析发现其中46.7% (7/15)存在细胞遗传学异常 4例患者检出单纯+8 1例患者检出+8和-7q31 1例患者检出-5/del(5q31)和-17p13.3 1例患者检出-7q31、-5/del(5q31)和-17p13.3,染色体分析失败患者的FISH结果,46,FISH检测对于核型分析成功的MDS患者价值有限 对于分裂相数量少或缺如、质量差或核型复杂的MDS患者有较好的应用价值,小 结,47,一、骨髓增生异常综合征的流行病学及分型 二、骨髓增生异常综合征的细胞遗传学异常 三、骨髓增生异常综合征的分子遗传学异常,48,近年来，随着全基因组测序等技术的应用，在MDS患者中有