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文档简介

1、食品中还原型抗坏血酸的测定,进入实验室要求,1、使用化学试剂时要注意人身安全。 2、注意玻璃器皿的使用,破碎。 3、仪器使用必须按照操作说明及教师指导进行,盲目操作导致损坏者后果自负。 4、实验器材用过后要及时清洗,实验结束后,要将器材摆放整齐。 5、课代表每次课均要安排值日生,负责打扫卫生。 6、课代表在每次实验课结束后要填写实验室使用记录、仪器使用记录本、多媒体使用记录等。,一、目的要求:,(一)掌握还原型抗坏血酸的测定原理。 (二)熟悉维生素C的生理作用及缺乏症。 (三)了解本次实验的操作步骤及注意事项。,二、原理,还原型抗坏血酸有还原性,能还原染料2,6二氯酚靛酚,该染料在酸性溶液中呈

2、红色,被还原后红色消失,当被测溶液中过量一滴染料时即显红色,以示终点。 在无杂质干扰时,被测溶液还原染料的量与其中所含抗坏血酸的浓度成正比。,三、仪器与试剂,(一)仪器 1.组织匀浆机 2.微量滴定管 3.量筒、烧杯、吸管、锥形瓶 4.天平,(二)试剂,1. 1%草酸、2%草酸 2. 白陶土 3. 抗坏血酸标准液:秤取0.1g纯抗坏血酸,溶解于1%草酸中,并用蒸馏水稀释至100ml,再取其中1ml稀释至50ml,迅速用以标定染料。(最好临用前配制),0.02mg/ml,(二)试剂,4. 0.02% 2,6二氯酚靛酚:溶解50mg 2,6二氯酚靛酚于200ml含52mg碳酸氢钠的热溶液中,冷却后

3、稀释至250ml,过滤后装于棕色瓶中,每周标定一次。 5.蔬菜水果:番茄、柿子椒、甘蓝、柑橘、橙子、鲜枣、猕猴桃等。,四、操作步骤,(一) 2,6-二氯酚靛酚溶液标定 取5ml新配置的抗坏血酸标准液,加5ml 1%草酸于三角瓶中摇匀,用2,6-二氯酚靛酚滴定至粉红色15秒不退为终点,所用上液的量相当于0.1mg 抗坏血酸。 由此计算:1ml 溶液相当于抗坏血酸的毫克数 经标定后计算得: 1ml溶液相当于抗坏血酸0.05mg,即0.05mg/ml,(二)样品测定,1. 称取样品100g,稍加切碎后置于组织匀浆机中,加入100ml的2%草酸溶液,制成匀浆; 2. 取10g 匀浆于100ml量筒内,

4、小心的以1%草酸稀释至100ml,摇匀,静置;,3. 加一勺白陶土脱色, 过滤,备用; 4. 取滤液5ml于锥形瓶中,立即用2,6-二氯酚靛酚滴定至粉红色存在15秒不退为终点,记录2,6-二氯酚靛酚的用量V1ml。测两次取其平均值; 5.用蒸馏水做空白对照,记录2,6-二氯酚靛酚的用量V2ml. 6.计算5ml滤液中含有的样品克数W(?g),(二)样品测定,五、计算,计算 100g 样品中还原型抗坏血酸的含量: V1滴定时所用染料溶液的毫升数 V2空白滴定时所用染料溶液的毫升数 C 1ml 染料相当于抗坏血酸毫克数(0.05mg/ml) W 所用滤液中含有的样品克数,六、注意事项,1. 操作过

5、程要迅速,因为还原型抗坏血酸易被氧化,一般不超过2min。 2. 食物匀浆在量筒中振摇可能产生泡沫,可加数滴异戊醇去除泡沫。,六、注意事项,3. 样品匀浆液有颜色时,应加入一勺白陶土,振摇脱色,过滤后,再取上层液滴定。 4. 样品中可能含有其它杂质,也能还原2,6-二氯酚靛酚,但还原染料的速度较抗坏血酸慢,所以滴定时以15s粉红色不退为终点。,七、思考题?,这种测量维生素C方法的优缺点是什么? 用蒸馏水做空白对照的作用是什么?,实验报告书写内容,一、目的要求 二、实验原理 三、操作步骤 四、实验结果 五、分析讨论,说明: 实验报告一律使用实验报告本; 学生完成实验报告后由课代表收齐后交给指导教师。,谢 谢 !,五、计算,计算 100g 样品中还原型抗坏血酸的含量: V滴定时所用2,6-二氯酚靛酚的毫升数 C

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