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文档简介
1、实验八 甲醛滴定法测定氨基氮含量,一、目的,二、原理,水溶液中的氨基酸为两性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。用甲醛处理氨基酸,甲醛与氨基结合,可形成羟甲基衍生物,使NH3+上的H+游离出来,这样就可用碱滴定NH3+放出的H+,从而计算出氨基氮含量。,掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和方法,如样品中只含有某一种已知氨基酸,由甲醛滴定的结果即可算出氨基氮的含量。如果样品是多种氨基酸的混合物(如蛋白质水解物),则滴定结果不能作为氨基酸的定量依据。甲醛滴定法常用于测定蛋白质的水解程度,随着水解程度的增加,滴定值增加,当水解完全后,滴定值保持恒定。,三、操作,1、 取3个100 mL的锥形瓶,
2、编号。于1、2号瓶内各加入0.1 mol/L的标准甘氨酸溶液2 mL和水5 mL,混匀。于3号瓶内加入水7mL 。然后向3个瓶中各加酚酞指示剂5滴,混匀后各加中性甲醛溶液2mL ,再混匀,分别用0.1 mol/L标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红色。重复以上实验两次,记录每次每瓶消耗标准氢氧化钠溶液的毫升数。取平均值,计算甘氨酸氨基氮的回收率。,2、取未知浓度的甘氨酸溶液2mL,依上述方法进行测定,平行做3份,取平均值。计算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克数。,四、结果计算,1.4008 为1mL 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。,1、回收率计算:,公式中: 实际测得量(mg
3、)为滴定1和2号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数的平均值与3号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数之差乘以1.4008。理论加入量(mg)等于2 乘以1.4008。,公式中: 为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。 为滴定对照液(3号瓶)耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。,2、氨基氮计算:,1.4008 为1mL 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。,试剂和器材 1试剂: (1)0.1mol/L 标准甘氨酸溶液 准确称取750mg甘氨酸,溶解后定容至100mL。 (2)0.1mol/L 标准氢氧化钠溶液 (3)0.5%酚酞指示剂 称0.5g酚酞溶于100mL50%乙醇。 (4)中性甲醛溶液 甲醛溶液(3637,分析纯) 50mL,加入0.5酚酞指示剂1 mL ,用0.1 mol/L的氢氧化钠溶液滴定至微红,贮于密闭的玻璃瓶中。此试剂在临用前配制。,试剂和器材 1试剂:
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