结直肠癌异时性肝转移的分子标志物：miR-181a及其生物学功能ppt课件

1、结直肠癌异时性肝转移的分子标志物：miR-181a及其生物学功能,顾晋 陈治国,研究背景,microRNA的概念及其作用机制,研究背景,miRNA对肿瘤的发生发展起着重要的作用 miRNA在不同肿瘤组织中具有特征性表达模式 miRNA与肿瘤的生物学行为密切相关 可用于诊断CLL、乳腺癌和软组织肉瘤等肿瘤 miRNA与结直肠癌（CRC）肝转移的关系？,实验目的,筛选可能有助于预测CRC肝转移的miRNAs CRC肝转移相关的miRNAs功能研究,无肝转移的CRC,肝转移,miRNA表达的芯片检测,伴有同时性肝转移的CRC,生物信息学分析,原位杂交检测,筛选出CRC肝转移相关miRNAs,分子生物

2、学验证,组织芯片构建,实验方案,实验方案,体外培养,病毒感染,基因增强表达效率测定,比较转染前后生物学性状的改变,低转移潜能CRC细胞系HT29,接种,裸鼠移殖瘤,裸鼠局部成瘤能力,浸润能力,生长增殖,裸鼠局部瘤的转移潜能,携带miRNA前体的慢病毒表达载体,实验结果,完成miRNA芯片检测 无肝转移的CRC组织：5例 伴有同时性肝转移的CRC组织：5例 筛选出7个在两组间差异表达倍数大于1.7倍的miRNAs miR-181a，152，320a Let-7d，miR-15b，20b，223,实验结果,构建组织芯片 同时性肝转移的CRC原发灶 ：n=160 异时性肝转移的CRC原发灶 ：n=3

3、7 无肝转移的CRC原发灶：n=97 远癌正常CRC粘膜：n=72 原位杂交 Dig标记的LNA探针,实验结果,构建慢病毒过表达载体 LV-miR-181a-GFP LV-NC-GFP 慢病毒载体转染HT29细胞系,实验结果,Figure 1. miRNA detection in colorectal cancer tissues by LNA-ISH.,表1. miRNAs在CRC组织中的表达情况,Figure 2. . overall survival in CRC patients with different expression level of miR-181a,Figure 3

4、.The expression of reporter gene GFP in HT29 cell line,Figure 4.The fold change of the miR-181a expression in cell line,Figure 5. miR-181a enhance the proliferation of HT29 cell,Figure 6. miR-181a enhance the migration of HT29 cell in vitro,Figure 7. miR-181a enhance the migration and invasion of HT29 cell in vitro,Figure 8. In vivo tumor growth in NOD-SCID mice,Figure 9. Xenograft tumors in three groups,结论,miR-181a对预测CRC异时性肝转移可能具有重要的意义 miR-181a高表达是预后不良