微生物临床标本的采集、送检.ppt

1、第一节概述,一、 临床标本的采集、送检 与处理原则 目的：避免出现假阳性，假阴性。 确保检验结果的可靠,（一）临床标本的采集,采集标本时应区别正 常菌群污染还是致病菌， 有助于对病原菌的正确 判断。 例口部有大量正常菌， 标本要注意区别。血液， 脑脊液无菌生长。,采集标本注意事项,1、检验单：检查患者姓名、性别、年龄、临床诊断、标本类型、来源、送检目的及是否使用药物。,2、标本容器： 使用无菌容器。 容器灭菌采用物理方法。 避免使用吸水性强的容器 3、采集时间和部位： 时间 病程早期，急性期，典型期和用药之 前。特殊项目应采集早晚期标本。 部位 不同症状选择适当部位。,4、无菌操作： 严格注意

2、无菌操作，避免杂菌污染及环境污染。 血液、脑脊液、穿刺液、骨髓标本。 尽量避免污染。 粪便、痰液、咽拭子、肛拭子标本等。,先检查标本是否符合要求，不符合要求如果是采集原因，才能丢弃 标本采集后最好在2h 之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如尸检组织、支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4 环境中。脑脊液、滑膜液等则要在25 保存。一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h 。 特殊标本应保温并立即送检，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等。,5、痰 挑取带脓、血或含有颗粒等异常部分。 6、厌氧培养标本 判断标本检验项目，运送方式是否符合厌氧菌培养，置

3、于厌氧环境中培养。 7、血液 血液增菌培养基,二 细菌检验基本程序,（一）培养基选择原则 标本中分离出病原菌，检查出对抗生素敏感性，对临床诊断，治疗、预后和流行学调查有重大意义。 因此 选择合适培养基是保证病原菌检出的前提。,(二)细菌鉴定基本流程,标本选择,采集（保存、运输）,观察，前处理,直接图片检查,快速检验,分离培养（需、厌氧、CO2）,可疑菌落,报告,初步报告,增菌（需、厌氧、CO2）,血清学实验,药敏试验,动物实验,生化试验,涂片检查,报告,（三）诊断试剂的选择,1、选定有鉴定价值的实验 两种菌鉴定实验必须一种菌阳性大于率90%，另一种菌阴性率大于90%。 2、选择简易、快速、方便

4、的实验。 3、综合考虑实验的敏感性和特异性 敏感度 假阴性 ，特异性 假阳性 敏感度 特异性 特异性 敏感度,细菌学鉴定方法,1、形态学检查 特点：是细菌检验的重要方法之一 目的：了解细菌形态、结构、染色性 方法：不染色法，染色法、特殊染色法。 2、菌落的特点 观察细菌菌落形状、黏液性、颜色、溶血等,3、生化试验 是细菌检验的重要方法之一 根据细菌酶不同，从而对底物分解能力不同，产生不同代谢物来鉴别细菌。 4、血清学试验 根据抗原抗体在适宜条件下，能在体外发生特异性结合原理，用已知抗原或抗体检测未知抗体或抗原。 1）抗原测定 2）抗体测定,5、细菌抑菌试验 某些细菌可被特定化学物质或药物也抑制，利用这个原理来鉴定细菌。 如氰化钾抑制试验 沙门菌，志贺菌。 6、分子生物学检测 特点 快速、准确、方便。 1）核酸杂交 2）PCR 3）生物芯片,7、噬菌体分型试验 根据噬菌体对宿主感染和裂