分离科学GCLCMS

1、期末总结,1. 色谱法,2. GC,3. LC,4. GC-MS,5. LC-MS,6. MS-MS,目 录,色谱法,1.原理 试样中各组分在色谱柱中的流动相和固定相间不断进行着分配，不同性质的组分在柱中的滞留时间不同，从而使各组分分离。,2.术语 相对保留值 r21 = tR2 / tR1 （柱温、固性） 分配系数 K = CS / CM （柱温、固性、试样、k） 分离度 R = 1.5 两峰完全分离标准,3.定性 纯物质：保留值、加入法 保留指数（IX） ：正构烷烃 仪器联用：GC-MS、LC-MS,4.定量-组分含量与峰面积成正比 m = fA 归一化法：全部出峰 标准曲线法 ：需组分纯

2、物质系列标液制成曲线，适用于大批量样品 内标法：需要标样和内标物，不适合大批量样品,内标物： 试样中不含有该物质； 与被测组分性质接近； 不与试样发生化学反应； 出峰位置应位于被测组分附近。,5.色谱方法分析验证 准确度：多次重复测定 平均值 真值 符合程度,回收率 = (C-A)/B (内标法),精密度：多次重复测定 测定值 彼此 符合程度,RSD = S / X,检测限（LOD）：被检出的最低量 信噪比：3:1 定量限（LOQ） ：被定量测定的最低量 信噪比：10:1 线性范围：,气相色谱法,1.结构,2.GC条件选择,高效液相色谱法,1.结构,2.LC分离类型,液-液分配色谱 原理 液液

3、萃取 溶解度 类型,反相色谱 固定相：C18 流动相:甲醇、乙腈、水 极性顺序：水（超纯水）乙腈甲醇 洗脱顺序：水甲醇乙腈 有机相比例减小： 溶剂极性-洗脱能力-tR，R 梯度洗脱：按一定程序连续地改变流动相的配比和极性，用来优化分离。,离子色谱 原理 利用离子对离子交换树脂的亲和力差异而进行分离 方式 添加抑制柱，降低流动相本底电导影响，提高目标离子灵敏度 离子对色谱 原理 将对离子或加到流动相中，使其与溶质离子结合形成离子对，从而控制溶质离子保留行为 体积排除色谱 原理 基于试样分子的尺寸和形状不同来实现分离,GC-LC 对比,GC-MS 联用,1.流程,GC：MS的进样器，纯化样品，提高

4、分析效率,MS：GC的检测器，定性专一,作用：将GC与MS联接，除去载气、降低气压,富集输送试样 直接插入式接口 喷射式分子分离器,2.结构,1.载气：高纯He 2.进样口：分流/不分流、填充柱进样口 3.色谱柱：固定相选择,分流比：液体样品蒸发后，少部分蒸汽进入柱子而大部分从分流 、 吹扫口流出，两者的比例为分流。,EI CI,1.单聚焦 2.四极杆 3.飞行时间,真空原因： 1.氧会烧坏离子源的灯丝； 2.高压会引起放电； 3.引起额外的离子分子反应，谱图复杂化。,固定相选择,3.MS中离子类型,4.MS中离子化方式,5.图谱类型,LC-MS 联用,1.LC-MS接口技术,HPLC,离子化

5、 接口,MS,作用： 1.去溶剂化 2.阻隔大气压与真空系统 3.离子化 4.去除中性物质和反极性电荷,ESI APCI,2.LC-MS 条件优化,离子源,离子模式,流动相 水、甲醇、乙腈 缓冲液避免不挥发，易结晶。,流量和色谱柱,3.样品预处理,反相固相萃取 作用：净化、富集、转换溶剂、保护色谱柱 步骤：预处理 上样 洗去杂质 洗脱收集分离物 模式：目标物在柱上保留后被洗脱 干扰物在柱上保留后被洗脱,GC-MS LC-MS 对比,MS-MS 联用,1.分类 空间串联：四级杆串联质谱（QQQ）、四级杆和飞行时间串联（Q-TOF） 时间串联：离子阱 两种模式都需碰撞活化室,2.QQQ结构,离子源,第一分析器Q1,第二分析器Q3,接收室,碰撞室Q3,