微生物真菌课件：25章支原体

1、第二十五章 支原体属脲原体属,吉林大学基础医学院病原生物学系赵春燕,支原体（Mycoplasma）,1.无细胞壁 2.能在人工培养基中生长 3.能通过细菌滤器 4.最小原核细胞型微生物 5.二分裂繁殖 6.多形态性,“油煎蛋样”菌落,柔膜体纲,支原体目,肺炎支原体，人型支原体，生殖支原体，穿透支原体，发酵支原体，梨支原体,解脲脲原体,支原体分类,支原体科,无胆甾原体科,螺原体科,支原体属,脲原体属,人体分离: 20种， 其中8种是致病或条件致病菌: 肺炎支原体(M.pneumoniae,Mpn) 生殖支原体(M.geuitalium,Mg) 人型支原体(M.hominis,Mh) 发酵支原体(

2、M.fermentants,Mf) 穿透支原体(M.penetrans,Mpe) 梨支原体(M.pirum,Mpi) 关节炎支原体（M.arthritidis) 解脲脲原体(U.urealyticum,Uu),支原体与细菌L型比较,第一节 支原体属,一、肺炎支原体,1.形态 125-300nm 无细胞壁 高度多形性：球、杆、丝状和分枝状等 一般Giemsa染色较好，染为淡紫色,（一）生物学性状,2.结构 细胞膜可分为内、中、外三层：内外两层为蛋白质及糖类，中层为脂类（胆固醇含量多），凡作用于胆固醇的物质，如皂素、毛地黄甙、两性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。 有的支原体有荚膜或微荚膜 特殊的顶

3、端棒状结构： 粘附宿主上皮细胞表面， 与支原体的致病有关。,3.培养特性 营养丰富的培养基： 10%20%人或动物血清以提供胆固醇与其它长链脂肪酸，多数还需添加酵母浸液、组织浸液、核酸提取物和辅酶。 pH：适宜7.88.0（7.0易死亡），但解脲脲原体最适 pH5.56.5 兼性厌氧： 大多寄生性支原体在37时在微氧环境（含5%CO2和 90%N2）中生长最佳。 繁殖方式多样：二分裂繁殖外，还有分节、断裂、 出芽或分枝等方式,固体培养基： 310d 长出直径约1mm以下典型的“油煎蛋” 样菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，中心致密隆 起，深入琼脂，外周由颗粒包绕。,需用放大镜/低倍显微镜观察,4.生

4、化反应,支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性,肺炎支原体 + 红细胞 肺炎、支气管炎 人型支原体 + 泌尿生殖道感染 生殖支原体 + + 泌尿生殖道感染 发酵支原体 + + 流感样疾病、肺炎 穿透支原体 + + 红细胞 条件感染 CD4+T细胞 多见于艾滋病 巨噬细胞 解脲脲原体 + 泌尿生殖道感染 流产及不孕不育,5.抗原构造,主要抗原成分: 1.蛋白质：ELISA试验检测 2.糖脂：补体结合试验检测 P1膜蛋白抗原：引起机体免疫反应 黏附宿主细胞 制备疫苗 血清抗体:鉴定支原体的种类 生长抑制试验（growth inhibition test.GIT） 代谢抑制试验(metabo

5、lic inhibition test,MIT),6.抵抗力,理化因素:比细菌敏感(因无细胞壁) 热:弱, 50经30min死亡 20可长期保存 耐碱 酸和有机溶剂:较敏感(消毒剂、清洁剂) 但对结晶紫、醋酸铊和亚甲蓝有抵抗力 卡那霉素、氯霉素、红霉素和四环素等: 敏感 青霉素:不敏感,（二）致病性与免疫性,1.致病机制 荚膜或微荚膜：抗吞噬作用 粘附素：P1，P30粘附蛋白，粘附呼吸道黏膜上皮细胞 毒性代谢产物：神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤 自身抗体：引起肺内、肺外多种病变,2.所致疾病,1.感冒、咽炎、气管炎 2.支原体性肺炎：间

6、质性炎症 3.主要经飞沫传播，秋季发病率高，515岁青少年发病率最高。 支原体是实验室细胞污染常见病原,3.免疫性,体液免疫：补体结合抗体 生长抑制抗体 杀支原体抗体 SIgA,三、微生物学检查方法,1.病原分离,标 本：咽拭子或痰液 培养基：含马血清、酵母浸液培养基 SP-4培养基（提高分离率3040） 气体环境：510CO2 温度与时间：37，l2W 可疑菌落： (1)糖发酵 (2)溶血性 (3)血细胞吸附 (4)特异抗血清生长抑制试验等,2.肺炎支原体特异性核酸的检测 （1）PCR：检测16S rRNA或P1蛋白基因 （2）基因探针 3.血清学诊断 （1）间接血凝试验 （2）间接免疫荧光

7、试验 （3）ELISA 4.冷凝集试验：即用病人血清与人O型血红细胞或自身红细胞混合,4过夜时可发生凝集，而在37时这种凝集又分散解离开，效价在64-128倍以上或双份血清抗体效价升高4以上，有辅助诊断意义。此反应为非特异性。 冷凝集素：支原体作用于红细胞膜I抗原使其变性后产生的自身抗体，属IgM，是由支原体感染引起的一种自身免疫现象。,防 治,药物:四环素类(近年来耐药性增加) 大环内酯类:首选 (红霉素、克拉霉素、阿奇霉素) 喹诺酮类 疫苗: 减毒活疫苗 基因工程疫苗,二、其它支原体,寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜 属于正常菌群,引起条件性感染 生殖支原体:生殖道、呼吸道和关节腔的炎症

8、发酵支原体:可能与类风湿性关节炎有关 是AIDS相关性支原体 人型支原体:咽炎、尿道炎、卵巢脓肿 唾液支原体：齿槽溢脓,穿透支原体,1991年Lo首次从1例艾滋病患者尿中分离出一 种新支原体，其形态为杆状或长烧瓶状，一端 为顶端结构，具有粘附与穿入的作用。,顶端结构能粘附于人红细胞、单核细胞、CD4T淋巴细胞及人尿道上皮细胞，导致宿主细胞受损或死亡。 目前认为穿透支原体可能是AIDS发病的一个辅助因素。,第二节 脲原体属 解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum),一、生物学性状,形态：0.050.3 m，多形性 固体培养：37生长良好， T株：菌落很小 最适pH为6.0 生化反应：分解尿素产氨 抵抗力：对0.5g/L醋酸铊,四环素、氯霉素、 庆大霉素和卡那霉素敏感，对青霉素不敏感。,所致疾病 1.泌尿系统感染： 非淋菌性尿道炎、宫颈炎、阴道炎、前列腺炎、附睾炎等泌尿生殖道疾病，还与自然流产、早产、死胎和男性不育有关。 2.新生儿疾病 呼吸道病变 肺炎 新生儿脑膜炎,二、致病性,引起男性不育的原因： Uu吸附于精子表面， 使其运动受阻， 并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 Uu产生神经氨酸样物质， 干扰精子与卵细胞结合。 Uu与精子有共同抗原， 从而产生抗精子抗体,三、微生物学检查法,病原体检