高中生物 专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案新人教版选修1

1、专题2微生物的培养与应用 课题1微生物的实验室培养【自主学习】一、培养基1.概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质叫培养基。据其物理性质，可分为 培养基和 培养基，前者不加_，如琼脂，后者需要加入该物质。 2.营养构成：各种培养基一般都含有 、 、 和 ，此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一)获得纯净培养物的关键是 ，具体操作如下： 1.对实验操作的 、操作者的 和 进行 。 2.将用于

2、微生物培养的 、 和 等器具进行 。 3.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (二)消毒和灭菌1.消毒是指用较为温和的 或 方法杀死 或 （不包括 ）。（1）日常生活中常用的消毒方法是 消毒法。（2）对一些不耐高温的液体，则使用 消毒法。（3）对接种室、接种箱或超净工作台可使用 照射进行物理消毒，照射前可适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等以增强消毒效果。（4）实验操作者的双手使用 进行消毒。（5）饮用水水源用 进行消毒。2.灭菌是指用强烈的 杀死 ，包括 和 。常用的方法有： 、 、 灭菌。（1）接种环、接种针、试管口等使用

3、灭菌法。（2）玻璃器皿、金属用具等使用 灭菌法。（3）培养基、无菌水等使用 灭菌法，将灭菌物品放置在 内。（4）物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的 ；随后关闭排气阀继续加热，气压升至 ，温度为 ，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至 时打开锅盖，其目的是防止 。三、实验操作-大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是 ，本实验可分成 和 两个阶段进行。（一）、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：计算 。2. 倒平板：待培养基冷却至 左右时在 附近操作进行。其过程是：在火焰旁右手拿 ，左手拔出棉塞；使

4、锥形瓶的瓶口 ；左手将培养皿 ，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板 。（二）、纯化大肠杆菌 微生物接种：最常用的是 法和 法。 1.平板划线法是通过 在琼脂固体培养基表面 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。可以分离到由 繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即为菌落。其操作步骤是：将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到 的目的。将冷却的接种环伸入到 。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环 ，盖上皿盖，不要划破培养基。灼烧接种环，冷却后从 划线。重复上述过程，

5、完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。将平板 培养。分析：（1）取菌种前灼烧接种环的目的是 ；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的原因是 ； 取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是 。（2）最后灼烧接种环的目的是 在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是 。2.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将 进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。系列稀释操作：取盛有 mL水的无菌试管6支 ，编号101、102、103、104、105、106。用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中，并吹吸3次使菌液与无菌水充分混匀。从101倍液

6、中吸取 mL菌液注入到编号为102试管内吹吸均匀，获得102倍液。依此类推。【课后练习1】1、关于微生物营养物质的叙述中，正确的是 ( )A是碳源的物质不可能同时是氮源 B凡碳源都提供能量C除水以外的无机物只提供无机盐 D无机氮源也能提供能量2、不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一3、下列措施中不属于消毒的是（ ）酒精擦拭双手 向水中通入少量以Cl2 皮肤受伤处涂紫药水 灼烧接种环4、下列有关细

7、菌培养的叙述，正确的是（）A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D在半固体培养基中接种细菌培养后可观察其运动5、高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是（）A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上6、下列有关培养基的叙述正确的是( ) A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基

8、 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌7、不同培养基的具体配方不同，但一般都含( ) A碳源、磷酸盐和维生素 B氮源和维生素 C水、碳源、氮源和无机盐 D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素8、获得纯净培养物的关键是 ( ) A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B接种纯种细菌 C适宜环境条件下培养 D防止外来杂菌的入侵9、下列常用的无菌操作中错误的是 ( ) A用酒精擦拭双手 B用氯气消毒水源 C实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭10、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是 ( ) A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B计算、称

9、量、溶化、倒平板、灭菌 C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板11、有关倒平板的操作错误的是 ( ) A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置12、有关平板划线操作正确的是 ( ) A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 C将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放人培养箱中培养13、有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 ( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释B然后

10、将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C再放在适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落14、涂布平板操作需要用到 ( ) A接种环、滴管、酒精灯 B接种环、移液管、酒精灯 C涂布器、移液管、酒精灯 D涂布器、接种环、酒精灯15、为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基：成分乳糖蔗糖磷酸氢钾硝酸氨伊红Y美蓝蒸馏水PH含量5g5g2g1g0.4g0.065g1000g7.2（1）该培养基所含的碳源是 。（2）该培养基所含的氮源是 。（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是 。（4）该细菌在同化作用上的代谢类型是 。（5）该培养基用来鉴别的细菌是（

11、）A.霉菌 B.大肠杆菌 C. 酵母菌 D . 乳酸菌16、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_ _、_ _和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_ _、_ _等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 （2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_ _（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和_ _；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。 （3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。 （4）通常，对获得的纯

12、菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_ _ _。 （5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。 （6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_ 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。17、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 和 。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖

13、水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培养基被称为 。18、有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落

14、，常采用的接种方法有两种，即 和 。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。【课后练习2】1、将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是 ( )A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放人未接种的培养基 D为了下次接种时再使用2、有关微生物营养物质的叙述中，正确的是( )A是碳源的物质不可能同时是氮源 B凡碳源都提供能量C除水以外的无机物只提供无机盐

15、 D无机氮源也能提供能量3、作为自养生物唯一碳源的是（ ）A糖类 B石油 C二氧化碳 D花生粉饼4、大肠杆菌的代谢类型是（ ）A自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D异养兼性厌氧5、菌种保藏应控制的条件是（ ）（1）湿度 （2） 低温 （3） 干燥 （4） 有光 （5）隔绝空气 （6）适当有氧 A（1）（4）（6） B（2）（3）（6） C（1）（5）（6） D（2）（3）（5）6、下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（ ）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质7、平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（ ）A利于大肠杆菌的接种 B防止杂菌污染 C利于培养的冷却 D防止皿盖冷却

16、水倒流入培养基8、炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平，呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的寄主专一性，通过实验确诊。（1）细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。（2）细菌鉴定：实验流程图如题31图1所示对配制的液体培养基等需要采取_方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_（填“无机碳”或“有机碳”）。挑选可疑菌落制片后，用 观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是 .对照组试管中应加入 ，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照 。(填“高”或“低”)，则可明确疑似

17、患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。9、利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现在野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以活得高效菌株。（1）实验步骤：配置 （固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为 。将 接入已灭菌的培养基平板上。立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是 。菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现 现象的菌落即为初选菌落。经分离、纯化后即可达到实验目的。10、水华可因蓝藻爆发所致。科研人员尝试利用某种细菌限制蓝藻数量，相关实验的示意图如下。图中表示实验步骤。请回答问题:(1)从细胞结构的特点与复杂程度上看，蓝藻

18、属于 细胞；从生态系统的营养结构上看，蓝藻处于 ；蓝藻的代谢类型通常是 。 (2)引发水华的蓝藻可产生蓝藻毒素。蓝藻毒素 （是、不是）蓝藻生长、繁殖所必需的物质。蓝藻毒素对人是一种致癌因子，可使原癌基因 ，导致正常细胞发生癌变。(3)图中实验组在每个培养皿中，如果做三个重复实验，可采取的做法是：_。为完善实验设计方案，应增设对照组，可采取的做法是：_。(4)蓝藻通常呈蓝绿色，观察实验结果，发现培养皿中出现褪色空斑，说明蓝藻 _ 。11、高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。（1）过程称为_，过程是为了_。（2）上题中号培养基称为_(按功能分)；该培养基中除了加入淀