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文档简介

1、生物 选修3现代生物科技专题,专题2 细胞工程,2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体,一、动物细胞融合：,2、原理：,膜具有一定的流动性,1、概念：选修3P.52,动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,物理法,化学法,生物法：,灭活的病毒,仙台病毒,丧失感染性,（不感染细胞）,保留融合活性,（诱导细胞融合）,3、过程：,（与植物细胞融合的基本原理相同）,细胞完成融合的标志：,细胞核融合为一个核,4、动物细胞融合与植物细胞杂交的主要区别：,促融剂不同：,植物：主要是聚乙二醇（PEG）,动物：除PEG外，还有灭活的病毒,植物细胞融合过程中，首先要除去细胞壁，制备原

2、生质体；而动物细胞无细胞壁，可直接诱导融合,见步步高P.216表,5、动物细胞融合的应用：,制备单克隆抗体,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,二、单克隆抗体：,其由何种细胞产生？ 主要分布在哪里？ 如何得到抗体？,抗原,动物体内,抗体,刺激,效应B 细胞,不仅产量低、纯度低而且制备的抗体特异性差

3、，灵敏度低,抗原不纯,抗体不纯,筛选单一的效应B细胞,（但不能在体外大量增殖产生大量的抗体）,抗原,动物体内,抗体,刺激,效应B 细胞,1、单克隆抗体的制备：,获得杂交瘤细胞,动物细胞培养,提取单克隆抗体,将抗原注入小鼠体内获得效应B淋巴细胞,效应B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,筛选能够产生所需抗体的细胞群,再在培养液或小鼠腹腔中培养,从培养液或小鼠腹水中提取,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,细胞融合后培养液中有几种细胞,已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。,在整个制备的过程中要经过几次筛选？,筛选得到杂交瘤细胞，筛选先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞下培养筛选出特异抗体的细胞群,2、单克隆抗体的应用:,应用: 疾病的诊断、治疗和预防。 优点:特异性强、灵敏度高。 实例: 各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断； 在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”，一旦发现 致病因素便与之结合

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