植物组织培养的基本步骤_第1页
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文档简介

1、.植物组织培养的基本步骤成熟细胞离体（脱分化）分生细胞（分裂）愈伤组织（再分化）形态建成完整植株。培养基的主要成分【水分】【无机盐】 1. 大量元素： N，P，K，Ca，Mg，S（由相关的无机盐提供）2. 微量元素： Fe，B，Cu，Mn，Mn，Zn，Co【有机营养成分】 1. 糖类 2. 维生素 3. 氨基酸 4. 肌醇 5. 天然有机物【植物生长调节剂】 1. 生长素 2. 细胞分裂素 3. 其他生长调节剂【凝固剂】琼脂【其他物质】 1. 活性炭 2. 抗生素 3. 抗氧化物质 4. 硝酸银培养基和组织培养用具的灭菌方式【培养基，无菌水】高压蒸汽灭菌， 0.105MPa灭菌 1530 分钟

2、【移栽基质】曝晒，甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌 12h【接种室，缓冲室】紫外线灯照射30min，或气雾消毒剂【超净工作台】紫外线灯30min，之后打开风机过滤除菌【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒【接种工具】 70%乙醇浸泡或擦拭，之后用火焰灼烧灭菌【培养室】 3%来苏尔喷雾，或甲醛，气雾消毒熏蒸【皮肤】先用肥皂洗手，接种前用70%乙醇擦拭【瓶口，管口】 70%乙醇擦拭，用火焰封口;.【培养瓶表面】 70%乙醇擦拭【台面，桌面】 70%乙醇擦拭或喷雾消毒植物外植体的灭菌方式【茎尖，茎段，叶片】 1. 用 70%乙醇浸泡 30 秒，再用无菌水冲洗 1 次。 2. 用 2%次氯酸钠浸

3、泡 15min 或 0.1%升汞浸泡 510min。 3. 若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴吐温。4. 消毒时要不断震荡，使植物材料与消毒剂充分接触。5. 最后用无菌水冲洗 35 次。【果实】 1. 用乙醇迅速漂洗一下，再用无菌水冲。2.用 2%次氯酸钠浸泡 10min，用无菌水冲洗23 次。【种子】 用 10%次氯酸钠浸泡2030min，或 0.1%升汞消毒 510min，然后再用无菌水冲洗35 次。【花蕾】 1. 用 70%乙醇浸泡 1015 秒，无菌水冲洗一次。2. 在漂白粉中浸泡 10min，用无菌水冲洗23 次。【根及地下部器官】用 0.1%升汞浸泡510min 或用次氯酸钠浸泡1015m

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