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文档简介
1、1,实验三,红细胞压积测定 网织红细胞计数 红细胞沉降率(血沉)的测定,2,一、红细胞压积测定,3,概念,一定量的抗凝全血,经规定速度和时间离心沉淀,沉下的红细胞体积与全血体积之比,即为红细胞压积。,4,器材,红细胞压积管(温氏管) 为平底厚壁玻璃管。管上刻有0-10cm刻度,其读数一边由下而上供测红细胞压积用;另一边由上而下,供红细胞沉降率测定用。,5,静脉血采集方法,抽取病人静脉血2ml,于EDTA二钾抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K2ML)24小时室温保存。,6,操作步骤,用细长毛细滴管吸取混均的抗凝血,插入温氏管底部,然后将血液缓慢注入至刻度“10”处,注意防止气泡产生。 用
2、水平离心机以3000r/min离心30min,读取暗红细胞层,再离心10分钟。,7,判读结果,可见血液被分离成五个层次,自上至下为: 淡黄色(血浆层) 乳白层(血小板层) 灰红层(有核细胞层,含白细胞及有核红细胞) 暗红层(含二氧化碳血红蛋白的红细胞) 最底层为鲜红层(含氧合血红蛋白的红细胞层)。 读取红细胞层的柱高的毫米数,乘以1,即为每升血液中红细胞体积的升数。,8,正常参考范围,男:0.400.50L/L(4050 vol %) 女:0.370.48L/L (3748vol %),9,临床意义,脱水、烧伤、大手术后,通过测定压积以决定是否静脉输液及输液量。 血细胞比容增高: 见于各种原因
3、引起的血液浓缩;及各种原因所致的红细胞绝对性增多,如真性红细胞增多症。 血细胞比容降低: 见于各种贫血,但必须结合红细胞数和血红蛋白量。,10,二、网织红细胞计数,11,概念,网织红细胞是未完全成熟的红细胞。 红细胞由骨髓进入外周血,需24-48h合成最后20的血红蛋白,残余的嗜碱性物质才能完全消失,成为成熟的红细胞。将其分为五型:花冠型、丝球型、网型、破网型、点粒型。,12,静脉血采血方法,抽取病人静脉血2ml,于EDTA二钾抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K2ML)24小时室温保存。,13,细胞受色原理,网织红细胞较成熟的红细胞稍大,胞浆中残存多少不等的嗜碱性物质,经煌焦油蓝活体染
4、色呈浅蓝或深蓝色的网状结构。,14,试剂,10g/L煌焦油蓝等渗盐水溶液: 煌焦油蓝1g 枸橼酸钠0.4g 氯化钠0.85g 蒸馏水加至100ml,15,操作步骤,于玻片的一端加10g/L煌焦油蓝等渗盐水溶液一滴,任其自然干燥备用。 取末梢血一滴于干燥染料上,用推片搅动混匀后,将两玻片盖合,待3min以上时间,才推制血片。 油镜下,计数1000个红细胞中的网织细胞数。,16,正常参考值,成人: 0.51.5 绝对值:24x 109/L84 x109/L 儿童: 36,17,18,临床意义,网织红细胞显著增加:表示骨髓红细胞生成旺盛, 常见于溶血性贫血(可高达70)。 其次急性失血性贫血,急性失
5、血后 5-10天达到高峰,2周后恢复正常。 营养性巨幼红细胞性贫血和缺铁性贫血可因缺乏造血物质,仅轻度增加(也可正常或减少)。 网织红细胞数量持续上升,常提出慢性失血,如消化道溃疡等。 网织红细胞显著降低,表示骨髓增生低下,见于再生障碍性贫血。,19,贫血治疗效果观察,如缺铁性贫血和营养性巨幼红细胞性贫血,经相应治疗后1-2日开始增多,1周左右达到最高峰,因此观察网织红细胞数量的反应,是贫血疗效的评价指标。 骨髓受白血病、肿瘤等浸润时,血中网织红细胞也可呈不规则的病理性轻度增多,此系病理刺激所至,它不反应造血旺盛。,临床意义,20,三、红细胞沉降率的测定,21,目的,了解红细胞沉降率及掌握其测
6、定方法。 掌握血沉测定的正常值及临床意义。,22,原理,将加有抗凝剂的血液置于一特制的具有刻度的玻管内,置于血沉架上,红细胞因重力作用而逐渐下沉,上层留下一层黄色透明的血浆。 经一定时间,沉降的红细胞上面的血浆柱的高度,既表示红细胞的沉降率。,23,材料及用具,血沉管 血沉管架 肝素溶液 注射器等。,24,方法及步骤,取0.13mol/L枸橼酸钠0.4ml放入试管中; 抽取病人静脉血1.6ml,注入枸橼酸钠液中充分混匀; 用魏氏血沉管吸血到0刻度,并直立于血沉架上1小时,观察红细胞下沉的毫米数,即为红细胞沉降率。,25,注意事项,采血后实验应在3小时内完毕,否则血液放置过久,会影响试验结果的准确性。 沉降管应垂直竖立,不能有倾斜。 沉降率随温度升高而加快,故应在室温22-27时进行。 在吸血之前,须将血液充分摇均(但不可过分震荡以免红细胞破坏)。 吸血时,要绝对避免产生气泡。,26,方法及参考值,魏氏自然沉降法: 男性15mm /h 女性20mm /h,27,临床意义,1.增快见于: (1)生理性:运动、月经期、妊娠3月以上直至分娩后3周、60岁以上高龄者及年幼小儿。,28,临床意义,(2)病理性: 各种炎症:急性细菌性炎症后23天,血沉可增快;风湿热活动期、结核活动期,血沉亦可增快。 组织损伤及坏死持续23周,心肌梗死发病1周左右血沉增快。 恶性肿瘤。 其他各种高球蛋白血症
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